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为更加快速、灵敏地检测草鱼呼肠孤病毒(Grass Carp Reovirus,GCRV),建立环介导等温扩增(RT-LAMP)检测方法。根据GenBank中GCRV HZ08等毒株VP6蛋白基因序列设计引物,以GCRV弱毒疫苗株(GCHV-892)总RNA为模板建立RT-LAMP反应,对扩增产物用限制性内切酶PvuⅡ进行酶切鉴定,所得酶切产物大小符合预期值。随后对LAMP反应体系包括Mg2+、dNTPs、甜菜碱(betaine)和内外引物浓度比进行了优化,并以含VP6蛋白基因的重组质粒(pEASY-VP6)为模板考量了该方法的敏感性,结果显示最低检测限为10copies.μL-1,比RT-PCR检测方法敏感10倍。特异性试验表明与白斑综合征病毒(WSSV)、嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、病毒性神经坏死病毒(VNNV)无交叉反应。应用RT-LAMP方法检测16份疑似出血病草鱼,6份病料获得了阳性扩增,与RT-PCR检测结果一致。 相似文献
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克氏原螯虾现状分析与研究思路 总被引:13,自引:0,他引:13
克氏原螯虾(Procarabarus clarkii),又称红色沼泽螯虾、小龙虾或克氏螯虾,原产于墨西哥北部和美国南部,在动物分类学上隶属甲壳纲,十足目,螯虾科,原螯虾属。1918年移植到日本的本州,大约在二十世纪三十年代末期由日本引入南京,开始在南京及其郊县繁衍;由于该虾适应性广,生命力和繁殖能力强,对水质要求不高,很快遍布长江流域的每一个角落,并成为归化于我国自然水体的一个种。最近十几年,种群发展特别快,在有的湖泊和地区已成为优势种群,已成为我国淡水虾类中的一种重要资源。 相似文献
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本研究采集了江苏省扬中地区健康与患病河蟹池塘表层(0-5 cm)和深层(5-10 cm)的底泥,分析了不同池塘底泥的微生物群落特征和主要影响因子。结果表明,患病组底泥的pH(7.77±0.11)和总钾(1.78±0.11)显著低于健康组的pH(7.91±0.05)和总钾(1.95±0.13),而水溶性盐总量(1.50±0.23)显著高于健康组(1.05±0.19)。在0-10cm深度范围的底泥中,健康组深层微生物多样性(Shannon)显著高于表层(P<0.05),而患病组表层和深层的微生物丰富度(Ace和Chao)、多样性(Shannon)均显著高于表层(P<0.05)。两种池塘底泥微生物中的优势菌群均为变形菌门(Proteobacteria)、绿湾菌门(Chloroflexi)和酸杆菌门(Acidobacteriota)。两种池塘存在包括芽孢杆菌属(Bacillus)在内的多种差异菌群。RDA分析结果表明,总氮是影响河蟹池塘底泥微生物群落的主要环境因子。此外,决定健康池塘底泥微生物群落的环境因子还有水溶性盐、碳酸钙和总硫,而决定患病池塘底泥微生物群落的环境因子为有机质和pH。因此,底泥中芽孢杆菌和pH等可能是潜在影响河蟹健康的关键因素。本研究结果可为养殖河蟹池塘的微生态调控提供理论参考。 相似文献
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人工育苗的优点是:苗种纯正;大小整齐;无敌害;能按照需要有计划地生产;能提早产卵时间进行早繁苗生产;还能有效地保护自然资源。对虾人工育苗的方式可根据育苗池的类型分为水泥地育苗、聚脂纤维水槽育苗和土地育苗。水泥池育苗又分为室外和室内两种,目前大量采用的是室内水泥池育苗。其工艺流程图解如下:1亲虾准备1.1亲虾的选择一般应选择个体较大(15cm以上),附肢齐全,健壮,无病无伤,对外界刺激反应灵敏,不易捕捉、食欲旺盛、已交配的雌虾。成熟的亲虾,卵巢宽而他满,体包友而带黄,第一腹节处的卵巢特别发达,并向两侧下… 相似文献
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中华绒螯蟹家系定向构建与定向育苗技术研究 总被引:1,自引:0,他引:1
利用中华绒螯蟹3个群体:“苏蟹一号”F4代选育群体、长江野生群体和沿海河口野生群体及其4大类杂交组合,通过笼式和坑式定向交配设计,实现了规模化定向构建中华绒螯蟹全同胞家系和父系半同胞家系。坑式交配采用亲蟹1雌1雄,共定向构建9个全同胞交配土坑;笼式交配采用亲蟹3雌1雄,共设置交配网笼17个。至2009年4月,经过越冬暂养,其中坑配亲蟹的抱卵率及越冬成活率达100%,笼配49只雌蟹获抱卵蟹亲蟹为45只,越冬成活30只。为尽量减少由于繁育条件不一致造成的各家系间的环境偏差,使每个家系幼体培育阶段的条件尽量保持一致,共选择抱卵蟹26只进行育苗。采用面积2×667 m^2室外土池6只,选择6只坑配抱卵蟹,按照一池一只设计,进行室外天然海水土池生态定向育苗;采用3 m×2 m×1.5 m聚乙烯网箱20只,选择20只笼配抱卵蟹按照一箱一只设计,进行室外土池网箱定向育苗。通过规模化培育,最终成功构建20个中华绒螯蟹家系,其中父系半同胞6个,共培育家系蟹苗280万只。 相似文献
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