检测牛边缘无浆体抗体的竞争抑制ELISA方法的建立

为建立检测牛边缘无浆体(Anaplasma marginale)抗体的方法,本研究以牛A.marginale膜表面重组MSP5蛋白作为包被抗原,抗MSP5单克隆抗体(MAb)作为竞争抗体,建立一种用于检测牛A marginale抗体的重组MSP5蛋白竞争抑制ELISA(CI-ELISA)方法.经优化确定CI-ELISA的最佳反应条件为:抗原包被浓度为2μg/孔,封闭液为2%脱脂乳,MAb的稀释度为1:400,酶标二抗的稀释度为1:1000,阴性和阳性血清临界值分别为33%和40%;该方法具有良好的特异性和重复性;2 348份临床血清样品的检测结果表明,217份为阳性,阳性率为9.2%,与IDEXXA marginale抗体检测试剂盒的阳性符合率为95.3%,阴性符合率为100%.本实验建立的ELISA方法具有较高的特异性和重复性,可用于流行病学调查研究.     

牛源空肠弯曲杆菌及其HSP43重组蛋白免疫原性研究

为评价牛源空肠弯曲杆菌(C.jejuni)及其HSP43重组蛋白(rHSP43)的免疫原性,本研究采用常规方法分别制备白油、铝胶佐剂和不加佐剂的全菌体免疫原和rHSP43免疫原,分别以不同剂量经皮下接种途径免疫6周龄小鼠,应用间接ELISA方法检测两种免疫原免疫小鼠后抗体消长情况,并通过攻毒实验评价其保护效果。结果显示,其产生的抗体水平白油佐剂组要高于铝胶佐剂组,两者明显高于未加佐剂组(p0.05)。在全菌体免疫原组中,5×109cfu/mL组免疫保护率高于5×107cfu/mL组,前者与5×105cfu/mL组相比较差异极显著(p0.01)。在小鼠免疫后21d以1×1010剂量的C.jejuni攻菌,全菌体免疫原能够提供完全保护,而以白油佐剂乳化的rHSP43仅能提供75%的保护。本研究结果为C.jejuni的疫苗研制提供了实验依据。     

副猪嗜血杆菌的分离鉴定及药敏试验

黑龙江省近几年频繁发生以多发性浆膜炎、关节炎、脑膜炎以及急性死亡为特征的传染病,为猪场造成严重经济损失,为了确诊是否有副猪嗜血杆菌感染,采集病死猪肝脏、脾脏和肺脏等病料,进行副猪嗜血杆菌的分离;对其理化特性进行鉴定,应用PCR方法对其16S rRNA基因扩增后进行克隆测序,将测序结果在GenBank上进行BLAST分析,把相近的基因序列应用DNAStar软件进行同源性和进化关系分析;用分离菌株进行药物敏感性试验,筛选敏感药物。结果分离出一种具有多形性的NAD依赖性菌株,经鉴定为副猪嗜血杆菌;16S rRNA基因进化分析结果表明,分离菌株与以往报道的副猪嗜血杆菌中国、日本和美国分离株属于同一亚群,而西班牙分离株属于单独的亚群;分离菌株对壮观霉素和头孢拉定高度敏感。     

犊牛群发冠状病毒性腹泻的诊断与治疗

1发病情况安达市某奶牛场存栏母牛400头,以舍饲为主。2012年3—5月份期间,新生犊牛发生腹泻,发病率100%,死亡率70%。母牛精神状态、食欲等均出现异常,发病仅限于1周龄以内犊牛,一般出生后2-3 d便出现腹泻。应用常见的抗生素和中药治疗,对症治疗采取补液、停喂母乳等措施均未见效果,死亡率极高。     

犊牛群发性肺炎鉴别诊断与药敏实验

2015年3月,黑龙江省林甸花园乡某牛场,犊牛爆发咳嗽,死之前头往后仰抽搐,口腔里有唾液。通过对病死犊牛剖检结果可见,病灶主要集中在肺部,无菌采取病料进行细菌的分离鉴定,将所分离的细菌通过临床检查、生物学特性鉴定和PCR鉴定分析,确诊是由巴氏杆菌及化脓隐秘杆菌混合感染引起的肺炎从而导致死亡。动物实验也显示纯培养物对小鼠致死率较高,药敏试验表明这两种菌对链霉素、环丙沙星、氨苄西林、头孢呋肟等药物高度敏感。     

糙米加湿调质工艺参数对其力学指标影响规律的研究

以糙米(含水率13.3%)为原料,研究糙米加湿调质各工艺参数对其力学指标的影响规律。以糙米初始含水率、一次加湿量、均质时间为试验参数,以糙米的力学特性为考核指标,采用二次旋转正交组合试验方法设计试验,用Reda软件包处理试验数据,得出了各试验参数对其力学指标影响关系的回归方程,分析了各试验因素对力学指标的影响,证实了糙米的力学指标与碾米能耗的密切相关性。     

牛疱疹病毒Ⅰ型DQ01株理化特性鉴定及gD基因的序列分析

牛疱疹病毒Ⅰ型 (BHV-1) gD 蛋白是已知组成 BHV-1 病毒粒子被膜的 4 种蛋白(gB、gC、gD 、gE)之一.鼠和牛的免疫试验显示,gD 能够引起比 gB、gC 更强而持久的细胞免疫.试验对 BHV-1 大庆分离株(DQ01株)的理化特性进行了鉴定,并对 gD 基因进行了序列分析,现报道如下.     

芦笋皮提取物抗氧化性研究

为了提高芦笋皮的综合利用价值,以总还原力、还原力、清除DPPH·(1,1-苯基2-苦肼自由基)、超氧阴离子自由基(O2-·)、抑制脂质过氧化物能力为指标,对芦笋皮提取物乙酸乙酯相、正丁醇相、水相的抗氧化作用进行研究。结果表明,芦笋皮三相提取物具有一定的抗氧化能力,抗氧化顺序为正丁醇相>乙酸乙酯相>水相。不同试验组在样品浓度0.0625 g·L-1到2.0000 g·L-1范围内,随着浓度的升高还原力、清除DPPH·、清除O2-·、抑制脂质过氧化物能力逐渐增大。抗氧化能力与黄酮类化合物的含量呈正相关,说明抗氧化能力与其所含的黄酮类化合物有关。