一个大豆孢囊线虫抗性相关基因RGA的克隆

大豆是主要的油料作物,起源于中国,在我国种质资源十分丰富。大豆孢囊线虫(SCN)(HeteroderoglycinesIchinohe)是一种土传的定居性内寄生线虫,不易防治,常引起大豆黄萎病等病害,是大豆生产上危害最大的病害之一。大豆孢囊线虫病生理小种多达十几种,在我国,大豆孢囊线虫病病原主要为3、4号生理小种。大豆抗孢囊线虫的研究一直是世界上大豆抗病育种研究的热点之一。在本课题的前期研究中,根据已克隆的植物抗孢囊线虫病基因的保守序列设计引物,对经常规鉴定为抗(感)孢囊线虫3号生理小种的15个大豆品种基因组DNA进行PCR扩增,在大豆抗病品种中获得一条大豆抗孢囊线虫的特异条带。本研究在此基础上利用该对引物,对高抗孢囊线虫3号小种的北京小黑豆基因组DNA进行扩增,并克隆了特异扩增片段,命名为RSCN3,经测序及BLAST分析,发现其DNA序列与GenBank、EMBL、DDBJ、PDB中的大豆似受体激酶RHG4、水稻TMK(leucinerichprotein,receptor-likekinase)基因等均有80%以上的同源性。根据该DNA序列推测其氨基酸序列,在其序列中共找到21个亮氨酸,将该序列与蛋白质序列同源性进行比较,结果发现与植物中的受体激酶、富含亮氨酸重复的蛋白激酶有较高的同源性。因此推测RSCN3克隆片断为一个与受体激酶有类似作用的抗病相关基因的RGA,并将该序列登录到GenBank中,登录号为:AY580161。     

甘蔗离体培养的变异机理及筛选技术 Ⅲ.游离氨基酸对生物大分子及绿苗分化综合效应的多元分析

对甘蔗组培绿苗分化过程中的游离氨基酸组分和含量进行的主分量分析表明,不同培养基或不同品种供体下的第一主分量均为中性氨基酸,贡献率达40％—66％,并且中性氨基酸处于转化状态比处于积累状态对绿苗分化更为有利。而第一、二主分量共同表明丙氨酸—丝氨酸族、天冬氨酸族和谷氨酸族的效应较为重要,但在不同培养基中所起的效应有所差异。通径分析表明各类氨基酸对于不同培养基和不同供体对绿苗分化所起的直接和间接作用不尽相同。而同一品种在同一培养基分化过程中对绿苗分化率、核酸及蛋白质含量起主要直接作用的氨基酸种类和排列顺序是很相似的,相似程度越大,绿苗分化率越高。本试验在MS培养基分化过程起主要直接作用的是甘氨酸和蛋氮酸,而在N_6培养基中的是赖氨酸,苏氨酸和亮氨酸。     

籼稻萌芽糙米GABA含量分析

以籼稻多系一号,特优175,威优77三个品种的糙米为材料,分析了相同条件下生产的萌芽糙米及不同处理的萌芽糙米GABA(r-氨基丁酸)含量。试验结果表明:不同品种的萌芽糙米GABA含量差异显著,多系一号萌芽糙米GABA含量为244mg/kg,与特优175,威优77比较差异达到显著水平;萌芽糙米GABA含量是糙米的5倍;糙米浸泡后催芽,在萌芽生长过程中GABA含量逐步提高,24h后达到最高值时开始下降;生长素GA对富集GABA有一定的促进作用,但烘干和晒干两种处理对萌芽糙米GABA含量没有影响。     

太子参不同组培脱毒苗产量与氨基酸含量的比较

对太子参的3种组培脱毒种苗(即茎尖苗、愈伤组织苗、种子苗)的大田生长速度、参根产量性状和游离氨基酸的含量进行了比较.结果表明,茎尖苗和愈伤组织苗的生长速度和参根产量均显著优于对照苗;种子苗的生长速度与对照苗无显著差异,参根产量低于对照苗.3种组培脱毒苗的参根氨基酸总量都明显分别高于对照苗,而必需氨基酸含量与对照苗均无显著差异.     

果蔗不同器官在不同生育期的同工酶聚类相关分析

为了解过氧化物酶(POD)和酯酶(EST)同工酶在果蔗生长中的变化规律,本研究选择不同的取样时期和植株不同器官,对8个果蔗品种利用垂直平板聚丙烯酰胺电泳得出的叶片、根组织不同生育时期POD、EST同工酶酶谱进行聚类分析,并检测其相关性。结果表明:(1)不同品种间同工酶谱的遗传相似系数存在差异,特别是外引黑皮果蔗(Badila)与中国地方品种之间存在着一定的遗传差异;(2)不同生育时期叶片或根部的POD同工酶和EST同工酶酶谱的聚类图都存在着差异;(3)叶片中的POD、EST酶谱在各个生育时期均达到极显著相关。说明叶片是这两种酶基因表达的最重要活性部位,因此叶片可以作为同工酶分析较为稳定和适宜的采样部位。     

不同生长时期对马蓝药效成分的影响

摘 要：采用HPLC法对3个不同产地马蓝茎、叶中的3种中药效成分（靛玉红、靛蓝、色胺酮）在不同生长时期的含量进行了测定,结果表明：马蓝中的药效成分含量随着季节的变化而变化,其中靛玉红、靛蓝含量在11月份都达到最大值,是提取靛玉红和靛蓝的最佳时期;而适宜于色胺酮提取的最佳时期在10月份。因此,可以根据马蓝提取物质的不同选择其最佳收获期。     

马蓝基因组DNA提取及RAPD反应体系的优化

摘 要：以马蓝为研究材料,对马蓝基因组DNA的提取以及RAPD-PCR反应体系进行了优化。结果表明,在提取液中加入PVP和β-巯基乙醇去除酚类物质,采用高盐沉淀DNA和多次洗涤去除糖类,可以得到高质量的马蓝基因组DNA。电泳检测结果表明,所获得的DNA完整,无降解,完全可以满足RAPD等分子标记分析的需要。同时对马蓝RAPD-PCR反应体系中各个影响因素进行了优化,建立了适合马蓝RAPD分子标记的最佳反应体系,即20μl反应体系中含有1.25UTaqDNA聚合酶,0.25mmol/LdNTP,2.5mmol/LMg2+,50ng模板DNA,1.0μmol/L引物;反应程序中最佳退火温度为38℃。     

肉穗草组织培养与扩繁研究

肉穗草是一种清凉觧毒,用于防治肝炎的青草葯,在福建闽南一带销量较大,目前野生资源日趋枯竭。肉穗草自然繁殖系数低,人工栽培采用分株或扦插繁殖成活率不高。采用植物组织培养技术,可以大量繁育种苗,供生产使用。以顶芽和茎段为材料,培养无菌苗,研究不同配比的激素对肉穗草生育的影响,结果表明：在附加0.5mg/LBA和0.2mg/LNAA的MS培养基上诱导丛生芽,成活率达到41.67%;在附加2.0mg/LBA＋0.2mg/LNAA的MS培养基上增殖效果最好,增殖率达到7.47倍;在MS＋0.1mg/LNAA＋0.1mg/LIBA＋活性碳0.2%培养基上生根率达100%。