双链RNA技术与植物病毒研究

 90%以上的植物病毒基因组是RNA。含RNA基因组的病毒会产生特异的双链RNA（dsRNA）。从受到病毒侵染的植物组织中提取病毒相关的dsRNA，进行病毒的检测和分类，诊断植物病毒病，探索生物防治植物病毒病的新途径，是植物病毒研究的重要内容。本文就双链RNA技术在植物病毒研究中的应用做一综述。     

绞股蓝抗TMV蛋白的分离及编码基因的序列分析*

以半叶法测定抗烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus，TMV)活性为监控手段，采用(NH4）2SO4分级沉淀、阳离子交换及亲和层析等方法，从绞股蓝(Gynostemma pentaphyllum)中分离到一种抗TMV蛋白，其分子量约为27kD，N端19个氨基酸残基为DINFSLAGADGQTYNTFIA(SWISS—PROT登录号为P83206)。N端序列分析表明，它是一种新的核糖体失活蛋白(ribosome-inactivating proteins，RIPs)，命名为gynostemmin。gynostemmin与其它植物RIPs的N端同源性介于10％-73％之间，其中Y14F17构成植物RIPsN端的“钉子”位点；gynostemmin与葫芦科植物RIPs的同源性为31％～73％，其中F4L6A9Y14F17I18,6个残基为葫芦科植物RIPsN端“钉子”位点。根据N端序列和葫芦科植物RIPs下游保守氨基酸序列设计简并引物，采用PCR扩增并克隆了编码gynostemmin的基因，包含609个碱基，推导出的203个氨基酸残基约占成熟蛋白的75％，软件分析表明，它含有核糖体失活蛋白的活性位点区。     

珊瑚藻藻红蛋白α亚基脱辅基蛋白基因克隆与序列分析

藻胆体是红藻的光合作用捕光器官。藻红蛋白位于藻胆体的尖端，在能量传递体系中位于第一环节，是第一级捕光色素，直接吸收和传递光能，对藻体的生理活动有重要影响。藻红蛋白的光吸收区位于蓝绿光区(498-565nm)，可以利用高等植物不能利用的光能。如能通过基因导入而将高等植物的光合作用器加以改造，使其光吸收范围扩大，可大大地促进高等植物的生长发育。     

抗病虫基因新资源:绞股蓝核糖体失活蛋白基因

核糖体失活蛋白(ribosome-inactivating protein,RIP) 具有广谱的抗植物病毒活性和抵抗多种植物病原真菌以及农业害虫的活性,在植物保护上具有广阔的应用前景.从传统中草药绞股蓝中分离的13个核糖体失活蛋白基因序列,基因序列登录代码为:AY075115,AY134616-7,AY279104-7,AY279218-20,AY160767-9,为培育抗病虫作物新品种提供了新资源.     

福州地区豨莶黄脉病病原的分子鉴定

为明确引起福建省福州地区豨莶上黄脉症状的病原,利用PCR技术,从3个样品上均扩增到双生病毒约500 bp的特异片段,选择病毒分离物Fz02进行全序列测定.结果表明:Fz02 DNA-A全长2771 nts,具有典型的双生病毒的基因组结构特征,与豨莶黄脉病毒广州分离物(Sb YVV-Gz01)同源性最高,达93.4%.利用设计的卫星分子的特异性引物,在病毒分离物Fz02中扩增到betasatellite分子(Fz02β).Fz02β全长1359 nts,与Sb YVV广东分离物(GD13)伴随的betasatellite同源性最高,为85.3%.系统关系树表明,Fz02与Sb YVV各分离物聚类为一个大分支.此外,Sb YVV序列变异较大.     

线虫寄生菌巴斯德杆菌的生物多样性研究进展

巴斯德杆菌(Pasteuriaspp. )是一类结构特殊且能产芽孢的革兰氏阳性菌,能寄生于多种重要的植物病原线虫,在控制线虫群体方面效果明显.作为一类线虫寄生菌,该菌属内种间、分离物间、种与分离物之间在表型特征、寄主范围、遗传本质等多方面存在差异,并呈现出较为明显的多样性.本文就该菌的生物多样性研究状况作一总结,并阐明其在线虫生防中的意义.     

杂交籼稻新组合丰优香占及其栽培技术

丰优香占是江苏省里下河农科所选育的优质早熟杂交籼稻新组合。表现产量高．且单、双季稻兼用;抗性好,米质优且有浓郁香味,籽粒大而匀称,深受试种者的欢迎．适宜我省和邻省地区作单季稻和连作晚稻推广种植。     

C-末端缺失和完整的绞股蓝核糖体失活蛋白在大肠杆菌中的表达

将绞股蓝(Cynostrmma pentaphyllum)核糖体失活蛋白(Ribosome-Inactivating Protein,RIP)DNA部分片段和cDNA序列(GenBank登录号分别为AY075115和AY279219)插入到表达载体pGEX-2T的BamH 1/EcoR1位点处,构建了与谷胱甘肽S-转移酶(Glutathione S-transferase,GST)融合表达的载体。诱导表达和序列测定验证读码框的结果表明,C-末端缺失和完整的绞股蓝RIP在大肠杆菌DH5α菌株中实现了融合表达。     

农杆菌介导的遗传转化在花生上的应用及前景

农杆菌介导的遗传转化已广泛应用于各种植物。本文综述了农杆菌介导的遗传转化在花生上的应用及其前景。     

水稻条纹病毒病害特异性蛋白基因克隆及其与纤细病毒属成员的亲缘关系分析

由水稻条纹病毒(Rice stripe virus,RSV)引起的水稻条纹叶枯病于20世纪初始发于日本关中一带,1963年在我国苏、浙、沪一带首次爆发成灾,现已扩展蔓延到全国18个省、市、自治区的水稻种植区。从2000年该病害在江苏、河南等地再次爆发成灾,发病面积达50％以上,严重制约了当地的稻米生产,已成为该地区水稻主要病害之一。 RSV是纤细病毒属(Tenuivirus)的代表种,其 RNA4编码的病害特异性蛋白(disease specific pro- tein,SP)在病叶的积累量与病害症状的严重度存在密切的关系。本文对发生于云南和江苏不同稻区的RSV的SP基因进行了分子克隆和序列比较分析,并对纤细病毒属6种病毒之间的亲缘关系进行了分析。