顽拗植物荔枝蛋白质双向电泳的改良方法

研究了荔枝胚胎蛋白双向电泳技术，在试样制备，电泳及银染等方面进行了技术改进，探索出一种可获得稳定，清晰的双向电泳图谱的方法， 凝胶银染后，可分辨蛋白质斑点数约有300个，蛋白质等电点在pH3.5-9.5，大多在pH5.0-8.0，相对分子质量为15000－90000，大多为25000－70000。     

羊奶果的共生固氮及氮素的运转形式

对羊奶果根瘤的固氮、吸氧、防氧保护及固氮产物的运转进行研究。羊奶果是热带植物，离体根瘤固氮活性在25－30℃时最高，且在离体3h以内无显著变化；35－40℃的高温对根瘤吸氢活性有促进作用，离体根瘤的吸氢活性可保持6h 以上，低温对固氮活性有明显的抑制作用。羊奶果为酰脲型植物，根、根瘤和木质部中都含有大量的尿囊酸，酰脲含量均占氮化合物总量的50％以上，说明它的根瘤和根都能将氮素转化成酰脲并经过木质部 向上转运，还有部分氮素通过丝氨酸、蛋氨酸为主的氨基酸形式运输。根瘤中未检测到血红蛋白，但有较高含量的SOD、ASA和GSH.     

多花水仙胚珠离体培养

对多花水仙4个品种类型进行胚珠离体培养,结果表明品种的倍性起着重要作用。三倍体难以培养成功。胚珠的发育状况亦有很大影响。用作离体培养的胚珠,以授粉后15—20天,正值球形胚或心脏形胚形成期为最适宜;未经授粉、受精的胚珠未能培养成功。适宜的培养条件可以打破种子的休眠,直接在试管审发芽成苗。     

嵌合体和柑桔育种

嵌合体(Chimera)是指两个或两个以上遗传成分不同的组织在同一植株或器官存在。许多果树都存在着嵌合体,有的嵌合体具有重要利用价值。现将有关这方面的研究综述于后。     

(木奈)嫩芽总RNA的提取与纯化

以嫩芽为材料,对Trizol法进行改进提取总RNA,试验结果表明,加入10%PVPP与材料共研磨,并在Trizol提取液中加入1%β-巯基乙醇,可以完全排除酚类物质、色素等杂质的干扰;采用在匀浆液中加入终浓度为20%乙醇沉淀多糖、在裂解液抽提的上相中加入终浓度为3 mol/LLiCl沉淀RNA、在RNA的粗提液中加入适量的3 mol/LNaAc(pH5.2)和低浓度的无水乙醇沉淀多糖等方法相结合,可以有效地去除多糖的干扰,获得纯净、完整的RNA样品,用它为模板进行RT-PCR反应,获得PPO基因保守区约600～800 bp的cDNA条带;而单独采用在匀浆液中加入终浓度为20%乙醇沉淀多糖的方法,不能将样品中的多糖去除干净,这些残留的多糖会抑制逆转录酶的活性,导致逆转录反应的失败.     

荔枝幼胚的离体培养

把３个不同胚胎发育类型荔枝，品种乌叶，兰竹，绿荷包的幼胚置于含有不同生长调节剂的ＭＳ培养基上进行培养，结果表明：授粉后１５ｄ的胚胎人工培养十分困难，而授粉后３０－４０ｄ的幼胚，在ＭＳ基本培养基附加一定浓度的ＢＡ，ＮＡＡ，ＧＡ以及ＡＢＡ等的不同组合培养基上，均可诱导形成细胞团，并能进一步形成胚状体或芽状体，部分育型品种兰竹，有胚胎败育早期但未死亡１／２ＭＳ附加低浓度的细胞人裂素及生长素等的培养基上，     

西番莲属2个主要栽培类型的核型分析

紫果西番莲和黄果西番莲的核型公式分别为２ｎ＝２ｘ＝１８＝１４ｍ±４ｓｍ和２ｎ＝２ｘ＝１８－１４ｍ（２ＳＡＴ）＋４ｓｍ，按Ｓｔｅｂｂｉｎｓ的核型分类，属于２Ａ和１Ａ型，两者之间并无明显差异，均是较原始的类型。     

银杏第1染色体DNA文库的构建

观察了50个银杏根尖的染色体,发现在约半数根尖中,最大的1对染色体(第1染色体)随体有差异,其中1条随体较大而明显,另1条则很小.采用玻璃针分离法,通过显微操作系统成功地分离了随体较为明显的那条第1染色体.将分离到的单条染色体去蛋白,Sau3A酶切,并在染色体DNA片段两端加上Sau3A人工接头,进行2轮PCR扩增,得到了大小为300-3000bp的扩增片段.用第2轮PCR产物构建质粒文库,得到了约含有75000个重组子的该染色体DNA文库.随机挑取66个重组子进行分析,发现插入片段大小主要分布在500-2000bp,平均为800bp.该文库为银杏第1染色体特异探针的筛选、遗传图谱的构建、重要基因的克隆以及性染色体的鉴别等研究提供了基础.     

荔枝幼果内源生长调节物的消长与胚胎发育的关系

荔枝幼果中内源生长促进物和抑制物的相对含量对胚胎(种子)发育有重要影响。幼果中过氧化物酶的活性在胚胎发育各期也有差别,这与相应发育时期生长调节物的稳定性或酶促氧化降解可能有一定关系。     

植物几丁质酶及其应用研究进展

几丁质酶是高等植物普遍存在的一种重要的病程相关蛋白,近年来被广泛应用于植物抗病基因工程的研究.本文概述了国内外有关植物几丁质酶的研究情况,介绍了几丁质酶的特性、结构、分类、细胞学定位和功能及几丁质酶基因的克隆与其在植物基因工程中的应用.