基于gL蛋白的牛传染性鼻气管炎间接ELISA检测方法的建立及初步应用

为建立牛传染性鼻气管炎(infectious bovine rhintracheitis, IBR)的血清学诊断方法,本试验对牛传染性鼻气管炎病毒(infectious bovine rhintracheitis virus, IBRV)gL蛋白进行原核表达和纯化,作为包被抗原,建立了间接ELISA检测方法。结果显示,iELISA方法的最优反应条件：抗原包被质量浓度为0.773 mg/L,4℃过夜;3%BSA、37℃封闭1 h;血清1∶20稀释,室温孵育30 min;二抗稀释度为1∶5 000,37℃孵育30 min;底物反应条件为37℃5 min。特异性试验结果显示,该方法仅与IBR阳性血清反应呈阳性,而与牛口蹄疫(FMD)、牛病毒性腹泻(BVD)、布鲁菌病的阳性血清无交叉反应。敏感性试验结果显示,阳性血清1∶640稀释时检测结果仍呈阳性,表明该方法敏感性较高。重复性试验结果显示,批内变异系数为1.9%～7.7%,批间变异系数为2.6%～4.6%。对171份牛血清进行IBRV抗体检测,本试验建立的iELISA方法检出阳性样品67份,阳性率为39%;商品化试剂盒检出阳性样品60份,阳性...     

中药对脾虚仔猪胃蛋白酶和胰蛋白酶的影响

[目的]确定自拟的固肠促长散对脾虚仔猪胃蛋白酶和胰蛋白酶的影响。[方法]采用给仔猪注射利血平和交替不喂与喂饱的方法构建脾虚仔猪模型,分别在注射利血平前、最后一次注射利血平当天、灌药结束后次日及第8天测定仔猪的胃蛋白酶活力和胰蛋白酶含量。[结果]试验结束后,固肠促长散组的各种酶活性与正常对照组差异不显著,脾虚对照组和思密达组的各种酶活性与正常对照组差异显著。[结论]固肠促长散能促进利血平所致脾虚仔猪的胃蛋白酶活力和胰蛋白酶恢复。     

gltS基因缺失对禽致病性大肠杆菌生物学特性的影响

为研究谷氨酸转运蛋白GltS编码基因对禽致病性大肠杆菌(APEC)生物学特性的影响,本研究利用λ-Red同源重组方法构建APEC CE129(WT)株gltS基因缺失株CE129ΔgltS(KO)和基因回补株CE129ΔgltS/gltS (RS),并均经PCR及测序鉴定,结果显示,gltS基因缺失株及回补株均正确构建。通过连续10 h测定各菌株OD600nm值绘制WT、KO、RS菌株的生长曲线,利用梅里埃自动生化鉴定系统测定3株菌的生化特性;利用K-B纸片法检测3株菌对8类16种药物的敏感性;利用半固体培养基检测3株菌的运动能力。结果显示,3株菌的生长特性、生化特性、药敏特性和运动能力均无明显差异。利用细菌平板计数法计算检测WT与KO菌株的体外竞争指数(CI),分析KO菌株是否致弱。利用结晶紫染色法测定3株菌的生物被膜(BF)的形成能力,并利用刚果红琼脂板及含荧光增白剂的琼脂板分别检测菌株BF中curli菌毛及纤维素的形成情况。结果显示,WT与KO菌株的体外CI为0.32,表明KO菌株轻度致弱。BF形成能力检测结果显示,相对于WT、RS菌株,KO菌株BF的形成能力极显著降低(P<...     

中草药对鸡小肠淋巴细胞影响的组织学观察

为探讨中草药对肠道免疫作用的机理,试验对鸡小肠固有膜内淋巴细胞数量进行了动态观察,将120只1日龄海兰褐公雏养至37日龄,随机分为4组,其中A、B、C组为试验组,每天分别灌服高剂量(9.0 mg/mL)、中剂量(6.5 mg/mL)和低剂量(4.5 mg/mL)的中草药,D组为对照组,并运用组织学常规切片技术和H.E....     

蓝狐出血性肺炎病理组织学观察

正由绿脓杆菌引起的出血性肺炎近几年在我国各地养殖场频繁发病,目前已经成为危害蓝狐、水貂等毛皮动物养殖产业的主要传染病之一。出血性肺炎又叫绿脓杆菌病,是铜绿假单胞菌感染所造成的一种急性、接触性传染病,经常发生于温暖潮湿的秋季,病变特征主要是出血性肺炎和败血症。该病发病急,病程短,死亡快,死亡率为6%～54%,毛皮动物中水貂     

20味中药对貉源绿脓杆菌地方流行株的体外抑菌活性研究

为了研究20种中药对貉源绿脓杆菌地方流行株HBP-G1的体外抑菌活性,试验采用管碟法和试管二倍稀释法分别测定20种中药对貉源绿脓杆菌地方流行株HBP-G1的抑菌圈直径大小和最小杀菌浓度(MBC)。结果表明:金银花、黄柏、板蓝根、诃子、五味子5种药物对貉源绿脓杆菌地方流行株HBP-G1体外抑菌效果好,抑菌圈直径在17. 4～19. 3 mm之间,MBC在7. 825～15. 65 mg/mL之间;其他药物存在不同程度的敏感性。说明此20种中药对貉源绿脓杆菌地方流行株有不同程度的抑菌活性。     

貉源细小病毒和沙门氏杆菌混合感染的诊治

为了研究秦皇岛某养殖场母貉死亡的原因,笔者无菌采集死亡貉的心血、肝脏、肠内容物等病料组织,采用胶体金试纸条法、PCR法、细菌分离鉴定、K-B纸片法等分别检测细小病毒、病原菌感染情况及病原菌的耐药性。结果表明:死亡貉细小病毒阳性,病原菌为沙门氏杆菌;分离到的沙门氏杆菌对头孢曲松、头孢拉啶、环丙沙星等5种药物敏感,对其他药物存在不同的耐药性。说明貉源细小病毒和沙门氏杆菌混合感染是引起母貉死亡的主要原因。临床上对细小病毒无特效治疗药物,接种疫苗是预防该病的主要方法。     

一株致水貂流产的大肠杆菌的分离鉴定及耐药性检测

为检测唐山某水貂养殖场引起母貂流产的病原菌及其耐药情况,试验采用病原检测、细菌分离与形态观察、生化试验、16S rRNA PCR检测、致病性试验等方法对水貂致病原进行鉴定,并采用药敏试验测定其耐药情况。结果表明:水貂阿留申病毒、犬瘟热病毒、细小病毒、加德纳杆菌和布鲁氏杆菌等病原检测为阴性;从无菌采集的阴道分泌物及胎儿等病料组织中分离到1株病原菌,将其命名为HB-E2株,该株病原菌为两端钝圆、短小杆状的革兰氏阴性菌,通过PCR检测鉴定为大肠杆菌; HB-E2株大肠杆菌对小白鼠具有很强的致病性,对头孢曲松、头孢克肟、环丙沙星等5种药物高度敏感,对氟苯尼考、头孢拉定、阿米卡星等5种药物中度敏感,对氨苄西林、阿莫西林、新霉素等6种药物耐药。     

蛋鸡笼结构与卡鸡的关系

蛋鸡自进入产蛋鸡笼直至淘汰，中途死亡的原因是多方面的，其中因鸡笼卡鸡而造成的死亡总数占有一定比例。如果鸡笼结构科学合理，则卡鸡现象发生很少。如鸡笼结构不佳，则会使卡鸡现象大大增加，自鸡上笼至淘汰连绵不断，造成严重的经济损失。笔者所在地区曾有一农村养鸡户，１９９６年春天进雏鸡６００只，经精心饲养管理，至５０日龄上笼前只损失雏鸡３只，但上笼后仅１个月，就因鸡笼结构问题而造成１０２只鸡被卡死。为了减少损失，禽主夫妻二人轮换看护，仍收效不大。后经用塑料打包带对鸡宠进行编结改造，虽然减少了卡鸡现象，但由于…