玉米淀粉分支酶基因SBEⅡb的克隆与过表达载体的构建

【研究目的】克隆玉米分支酶基因SBEⅡb并构建该基因的过表达载体pCASBEⅡb。【研究方法】从糯玉米（Waxycorn）新鲜胚乳中提取总RNA,利用RT-PCR方法克隆玉米淀粉分支酶基因SBEⅡb的全长cDNA。【结果】克隆得到了玉米淀粉分支酶基因SBEⅡb的全长cDNA,用BLAST软件作同源序列比对的结果显示,该片段的核苷酸序列与GenBank上报道的序列具有99%的同源性,全长2719bp,编码799个氨基酸。【结论】将该基因连接到携带GUS报告基因的植物表达载体pCAMBIA1303中,并通过了GUS活性检测,说明已成功构建了玉米淀粉分支酶基因SBEⅡb的过表达载体pCASBEⅡb。     

油菜含MATH结构域基因BnaMT1的克隆及表达分析

利用已构建的甘蓝型油菜种子发育过程SSH文库,筛选得到1个含MATH结构域的EST序列,并以其为信息探针,经电子克隆获得了该基因的全长cDNA,命名为BnaMT-1。BnaMT-1的开放阅读框(ORF)全长1 209 bp,编码402个氨基酸,相对分子质量为46 130.7,预测的理论等电点为8.50,其结构包括信号肽、跨膜结构及2个连续的MATH结构域,为亲水性胞外分泌蛋白;进化树分析发现,该基因与拟南芥含MATH结构域基因亲缘关系较近;利用半定量RT-PCR技术对该基因在甘蓝型油菜湘油15号不同组织及种子不同发育时期的表达分析表明:BnaMT-1在叶、花和果荚中都有表达,在根和茎中没有表达;种子发育过程中,BnaMT-1均有表达,且表达量于花后30～35 d最高,之后表达量下降。推测该基因可能与种子发育及油脂合成代谢相关。     

AtSDG8启动子区域功能元件的分析

启动子控制着基因表达的起始和程度,对基因的活动起着“开关”作用.为了深入了解基因SDG8的功能与特性,对SDG8启动子进行了初步的功能分析.以GUS作为报告基因,选取长度不同的两个启动子片段构建载体,转化到拟南芥中,获得转基因植株SLP和SSP.通过GUS基因的表达分析推测SDG8启动子的核心功能区域在-873～-2706 bp之间,这一结果为进一步研究SDG8基因的功能和结构打下了基础.     

水稻矮秆多分蘖突变体htd(t)的遗传分析与基因定位

在粳稻品种中花11的组培苗中发现1份可以稳定遗传的矮秆多分蘖突变体,相比野生型,突变体株高明显下降、分蘖能力明显增强。为定位控制该性状的基因,以该突变体和野生型杂交构建遗传群体,与籼稻黄华占构建定位群体,再利用SSR和In Del分子标记定位该基因。遗传分析表明,矮秆多分蘖突变体受1对隐性核基因控制,暂命名为htd(t)。利用F2代定位群体将突变基因定位于第4号染色体标记RM1345和ZM4-12之间,遗传距离分别为3.9和2.6 c M。序列分析表明,htd(t)可能为HTD1的等位基因。     

甘蓝型油菜抗菌核病研究进展

油菜是主要油料作物之一,由核盘菌(Sclerotiniasclerotiorum(Lib.)deBary)引起的菌核病(sclerotiniastemrot)是油菜的主要病害。针对当前与菌核病相关研究的新进展,本研究从4个方面对其进行了概括：（1）核盘菌的侵染方式以及在侵染过程中核盘菌分泌的草酸与寄主中钙离子的动态关系;（2）油菜通过合成植保素、酚类化合物、木质素、几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶等来抵抗核盘菌入侵的抗病机理;（3）现有综合防治技术中抗性种质筛选、无花瓣育种和生物防治;（4）利用与草酸代谢相关基因、抗病相关基因、防御相关转录因子基因和抗菌肽基因开展的油菜基因工程研究成果。并且进一步提出了未来油菜抗菌核病研究的可能方向,这些总结与建议为今后油菜抗菌核病研究提供了有益参考。     

几种农林废弃物复合基质的理化特性及对浙江楠容器育苗的效果

将农林废弃物（枯枝落叶、药渣、锯末、山核桃Carya cathayensis果壳、玉米Zea mays秸秆）分别与珍珠岩以及蛭石按比例混合成10种混配基质,以浙江楠Phoebe chekiangensis常用容器苗基质（泥炭、蛭石、珍珠岩的比例为3 ∶ 1 ∶ 1）为对照,分析了不同混配基质的理化性质,从中初步确定了处理2,处理3,处理4,处理5和处理7为较优混配基质,探讨了筛选出的5种混配基质及对照对浙江楠3年生大苗生长和生理特性的影响。结果表明:处理3的农林废弃物混配基质（枯枝落叶、玉米秸秆、蛭石、珍珠岩的比例为3 ∶ 3 ∶ 2 ∶ 2）栽培的3年生浙江楠的苗高、地径、分枝数、地上鲜干质量、地下鲜干质量、可溶性糖质量分数及可溶性蛋白质量分数均高于对照,高径比、根冠比、根系活力及叶绿素质量分数虽略小于对照但与对照不存在显著差异,说明处理3的农林废弃物混配基质可以替代以泥炭为主的对照基质栽培浙江楠,处理3的基质价格为89.00元m－3,明显低于对照为236元m－3的基质价格,对实现浙江楠容器苗工厂化生产意义重大。表7参12     

昆明市呈贡大学城周边“农家乐”休闲旅游开发的SWOT分析

以昆明市呈贡大学城为例,对呈贡大学城周边农村发展"农家乐"休闲旅游活动进行SWOT分析,分析其发展的4项优势及4项劣势,面临的三大机遇与三大威胁,提出丰富产品形态、打造推广品牌等4点建议与对策,以期为昆明呈贡及国内类似大学城的周边农村发展"农家乐"休闲旅游活动提供参考。     

海水胁迫下4种苗木的生长与生理特性

采用盆栽的方式,以无柄小叶榕(Ficus concinna var．subsessilis)、台湾相思(Acacia confusa）、巨桉(Eucalyptu grandis）和木麻黄(Casuarina equisetifolia）的两年生实生苗为试验材料,设海水体积分数为0（CK）、乍浦30%、乍浦50%、乍浦70%、乍浦100%和三甲河100%等6个处理。随后分别在第4、8、12、16、20和24天采样进行分析,研究不同体积分数海水处理下4种2 a生幼苗形态、存活率、SOD活性、MDA质量摩尔浓度及离子吸收分布的影响情况。结果表明,4种苗木均在海水体积分数高于乍浦50%（pH 8.15）时形态发生变化,并在三甲河100%处理24 d后,巨桉出现死亡;随着海水体积分数的增加与胁迫时间的延长,4种苗木叶片中超SOD均呈先升高后降低的趋势,在三甲河100%处理时,巨桉叶片中MDA质量摩尔浓度的累积量最高;随着海水体积分数的增加,4种苗木植株体内Na⁺质量分数均增加,且叶片中Na⁺质量分数的增幅依次为巨桉＞台湾相思＞无柄小叶榕＞木麻黄。此外,4种苗木叶片中K⁺质量分数均呈先增加后减少的趋势。经比较得出,在海水胁迫下,苗木的耐盐性高低为无柄小叶榕＞台湾相思＞木麻黄＞巨桉,并且4种苗木均能适应pH 8.50以上的环境,都属于碱土植物。     

BraSDG8 RNA干扰载体的构建及其对拟南芥的遗传转化

BraSDG8是拟南芥SDG8的同源基因,同属于ASH1家族,与开花调控相关。在克隆得到BraSDG8全长cDNA序列的基础上,选取其中一段保守片段构建RNA干扰载体pFGC5941-BraSDG8,并通过农杆菌GV3101介导,浸花法转化野生型拟南芥Col,获得了1株稳定遗传的转基因植株,为进一步研究BraSDG8的基因功能奠定了良好的基础。