传染性法氏囊病病毒抗原表位与乙型肝炎病毒核心抗原嵌合基因的构建及其表达产物分析

为提高传染性法氏囊病病毒(IBDV)多表位基因5epis的免疫效力,本研究应用重叠延伸PCR技术,在乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)基因的231位～232位核苷酸(77位～78位氨基酸残基)之间插入BamHⅠ和EcoRⅠ酶切位点,构建基于HBcAg修饰基因(mHBc)的抗原表位嵌合体基因分子载体pET-mHBc。将编码IBDV多表位基因5epis定向插入到pET-mHBc的mHBc基因中,获得嵌合体基因mHBc-5epis表达重组质粒pET-mHBc-5epis,并在大肠杆菌中表达。经SDS-PAGE分析,重组嵌合体蛋白的分子量约29 ku,表达量约占菌体总蛋白的47.6%;Western blot结果表明,重组嵌合体蛋白可与IBDV抗体反应形成1条特异性蛋白带;重组嵌合体蛋白呈病毒样颗粒(VLP),直径约100 nm～120 nm;用IBDV抗体夹心ELISA检测,抗原效价达到1∶200。本实验成功构建了5epis与HBcAg嵌合体基因,并在大肠杆菌中高效表达,具有IBDV抗原反应性的重组病毒样颗粒嵌合体蛋白,为研究其表位型基因工程疫苗提供了新途径。     

5株乳酸菌的分离鉴定与生物学特性研究

从泡菜和仔猪粪便中分离出5株乳酸菌,分别命名为RS、RB、RFT、RST、RO,结合细菌形态学、生理生化特性和16S rRNA序列同源性分析进行鉴定,并对其特性进行了研究.结果表明RS菌株为植物乳杆菌,RB、RO菌株为粪肠球菌,RVI、RST为屎肠球菌.其中RS菌株具有较好的耐酸性、一定的胆盐耐受力,对温度敏感;RB、RPT、RST、RO菌株对模拟肠液具有较强的耐受力,45-55℃处理30 min不影响其生长;5个菌株对大肠杆菌O<,157>和沙门氏菌的抑菌率均达到98%-100%,可作为优良的益生菌候选菌.     

黄山球孢白僵菌野生种群流行菌株的28S rDNA Ⅰ型内含子分析

通过4对引物,对采自黄山的40株球孢白僵菌菌株进行28S rDNA I型内含子分析,以探讨黄山自然种群的遗传结构及流行菌株类型。结果显示,在黄山球孢白僵菌自然种群中,存在着13种不同的内含子单倍型,显示出在黄山小范围内的球孢白僵菌种群也存在着丰富的遗传多样性。不同单倍型在种群中所占的比例不同,其中BBBA型占据主导地位,为37.5%,ABAA型和ABBA型次之,分别为15%和12.5%,而BABA等7种单倍型则各仅占2.5%,反应出不同的遗传背景的菌株具有不同的遗传稳定性与环境适应性。数据同时显示,同核体菌株在黄山球孢白僵菌自然种群中的比例为82.5%,显示出同核体在遗传稳定性上优于杂核体,但同时,17.5%的杂核体比例也显示出准性生殖在球孢白僵菌种群中的普遍性。     

新时期中国种植业结构调整再思考

新时期我国经济逐渐步入"新常态",国内农产品连年丰收、供给充足,这些都为种植业新一轮结构调整提供了契机。为此,结合当前国内外经济发展、种植业生产结构、农民收入情况以及资源环境保护的要求,提出本轮种植业结构调整应该在确保粮食安全的前提下,鼓励粮经轮作和种植饲料作物,构建与资源环境承载力相匹配的产业结构,推进六次产业发展,并通过以市场为导向、政策支持、科技创新、发展现代加工业与物流服务业等方式顺利实现此次结构调整。     

环剥对冬枣叶片内有机营养物质含量的影响

采用不同的环剥宽度,于盛花期对4～5a生的冬枣树体进行处理,测定叶片内有机营养物质的含量,同时调查当年树体的坐果率和翌年的萌芽率。结果表明:环剥宽度为1.0cm的树体有助于坐果率提高和树体营养回流的实现。     

定西市马铃薯黑痣病综合防治技术规程

从范围,规范性引用文件,术语和定义,防治策略,防治技术等方面规范了定西市马铃薯黑痣病综合防治技术。     

靶向传染性法氏囊病病毒VP1基因siRNA对病毒复制的抑制

根据传染性法氏囊病病毒（IBDV）VP1基因保守区序列,选择设计了3个靶向VP1的小干扰RNA序列（siR-NA）：VP1-siRNA668、VP1-siRNA1034和VP1-siRNA2250,化学合成DNA序列,体外转录合成siRNA,转染鸡胚成纤维细胞（CEF）后接种IBDV,分析siRNA对病毒复制的影响。结果显示,病毒接种后72h,3个VP1-siRNA转染组未出现明显的细胞病变（CPE）,病毒滴度分别为102.75,102.00,101.75 TCID50/0.1mL,而siRNACON转染和单纯IBDV接种对照组均出现明显CPE,病毒滴度均为106 TCID50/0.1mL;用荧光定量RT-PCR分析VP1基因水平,3个VP1-siRNA转染组比对照组分别降低了73.10%,81.79%,90.28%。结果表明,本试验选择设计的3个siRNA具有明显抑制IBDV复制功能,其中2 250位点的siRNA抑制效果最明显,推测该区域是VP1基因的重要功能区,是新型抗IBDV药物与疫苗设计的重要靶标。     

县域土地资源资产负债核算体系构建——以包头市固阳县为例

文中以“自然资源资产负债表编制中正确体现土地资源资产负债”为目标,依据土地资源资产负债的核算内容,提出了具有可操作性的核算范式,以包头市固阳县为例,根据资产负债指标体系和方法,结合土地资源的数量、质量情况及负债数据,采用收益还原法、年金资本化法、当量因子法等评估方法,核算出经济、社会和生态三个方面的资产价值量;从土地环...     

桂东县厚朴产业的现状及发展对策

对湖南省桂东县厚朴产业现状进行了调查研究和分析,总结了桂东县厚朴生产中存在的一些问题,并提出了桂东县厚朴产业发展的一些对策。     

桃树病虫害的综合防治技术

探讨桃树病虫害防治的若干措施。