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为建立一种更加准确、敏感的鸭疫里默氏杆菌检测方法,根据鸭疫里默氏杆菌16S rRNA基因序列设计2对巢式PCR引物,在完成最佳反应条件筛选、特异性、敏感性、重复性试验的基础上,建立巢式PCR检测方法.结果表明,建立的巢式PCR对1、2、10、X型鸭疫里默氏杆菌的16S rRNA都能扩增出特异性片段,而对大肠杆菌、多杀性巴氏杆菌、沙门菌、鸭源金黄色葡萄球菌的基因组不能扩增出特异性片段,DNA最小检测量为0.392 fg/μL,是常规PCR的1 000倍.该巢式PCR方法具有快速、敏感、特异、通用的优点,可用于鸭疫里默氏杆菌感染的检测、分子流行病学调查和分离菌株的快速鉴定. 相似文献
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北京地区奶牛隐性乳房炎金黄色葡萄球菌的分离鉴定及药敏试验 总被引:1,自引:0,他引:1
为了解北京地区奶牛隐性乳房炎中金黄色葡萄球菌的感染情况及对常用药物的敏感性,用科玛嘉显色培养基和16SrRNA PCR检测方法对5个奶牛场的100份隐性乳房炎奶样进行金黄色葡萄球菌的分离鉴定,采用K-B纸片扩增法进行药敏试验。结果表明,显色培养基分离到24株疑似金黄色葡萄球菌,经16SrRNA PCR鉴定,15株为金黄色葡萄球菌;药敏试验结果显示,15株金黄色葡萄球菌均对β-内酰胺类中的氨苄西林产生普遍耐药性,对克林霉素和环丙沙星的耐药率较高,分别为53.33%和40%;对氧氟沙星、庆大霉素、头孢噻肟和头孢曲松的耐药性较低,耐药率为6.67%。说明15株金黄色葡萄球菌分离株对7类9种抗菌药物都有不同程度的耐药性。 相似文献
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为探索鸡新城疫疫苗的最佳免疫方式,通过3组不同的试验对14日龄雏鸡进行新城疫疫苗接种,采用间接酶联免疫吸附试验方法检测不同时间段鸡血清中的抗体水平,并利用SPSS16.0软件对各组数据进行方差分析。结果显示:肌肉注射新城疫疫苗7~21天时鸡血清NDV特异性HI效价与滴鼻试验组相比有较大的差异(P≤0.05),30天后两者差异变小(P≥0.05)。肌注组的抗体水平始终大于滴鼻组,肌注与滴鼻叠加免疫组的抗体水平一直大于肌注组,且90天后两者数值差异显著,肌注与滴鼻叠加免疫后效果最好且持续时间最长。 相似文献
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非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)引起的烈性传染病,为了保证其检测结果的准确性和可靠性,需要研制试剂盒中使用的阳性标准质控品。本试验旨在研制含ASFV核酸序列的病毒样颗粒,并探究其在检测方法中的应用。首先扩增p72基因的全长片段,利用昆虫杆状病毒系统,包装出含有p72基因的ASF DNA病毒样颗粒。为了进一步验证该病毒样颗粒在应用中的可靠性,本研究将病毒样颗粒与ASF的组织毒及细胞毒同时进行DNA核酸提取,进行实时荧光定量PCR。结果表明,本研究制备的病毒样粒子能很好的取代ASFV在实时荧光定量PCR检测方法中作为阳性质控品,且能对核酸提取过程进行质控,实时荧光定量PCR检测试剂盒中,病毒样粒子的最低包装浓度为102 TCID50。进一步研究发现该病毒样颗粒也适用于普通PCR及LAMP检测方法中,最低浓度分别为103和101 TCID50。本试验结果将为规范ASF检测方法,促进ASF检测方法的转化应用及保证检测结果的准确度和可靠性提供科学依据。 相似文献
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一起雏鸭喹乙醇中毒报告1992年10月,昆山麻鸭场发生了一起雏鸭喹乙醇中毒事故,现将详情报告如下:1发病情况1992年10月3日,昆山麻鸭场从上海青浦某孵坊购进樱桃谷肉鸭1000只。4日后饲料中添加了喹乙醇,当天的日饲量是16公斤。添加喹乙醇总量为2... 相似文献