球孢白僵菌生长及毒力影响因子的研究进展

随着害虫综合治理的提出，昆虫病原真菌在防治农林害虫上的应用日趋广泛，白僵菌是世界各国研究应用最多的真菌杀虫剂。从白僵菌生长所需的营养、温湿度条件等方面的研究进展进行阐述，总结了提高菌株生长水平和杀虫效果的主要措施，以期对今后白僵菌的培养及应用提供参考。     

苏云金芽胞杆菌研究进展

论述了苏云金芽胞杆菌的作用范围、ICPs基因的多样性、杀虫机理、基因工程以及产业化研究的进展情况。     

苏云金杆菌毒力指示昆虫玉米螟与棉铃虫、粘虫、黄地老虎的毒力相关性测定

选用在我国分布较广、出现频率较高的４个血清型中的６株供试菌株，以玉米螟为毒力指示昆虫，进行了毒为指示昆虫与棉铃虫、粘虫和黄地老虎的毒力相关性测定。结果显示，设定各供试菌株对玉米螟的毒力指数为１，那么各供试菌株对棉铃虫的相对毒力指数为０．６４７±０．０７４，对粘虫的相对毒力指数为０．２６８±０．０７，对黄地老虎的相对毒力指数为０．１４５±０．０３１。４种供试昆虫对各种供试菌株的相对敏感性顺序为玉米螟＞棉铃虫＞粘虫＞黄地老虎。     

球孢白僵菌不同菌株酯酶同工酶酶谱与RAPD多态性的研究

为明确球孢白僵菌的遗传多样性,本研究通过酯酶同工酶技术及RAPD-PCR技术,对实验室保存的15株球孢白僵菌,从蛋白水平与分子水平进行了遗传多样性的研究。结果表明：利用酯酶同工酶酶谱所显示的菌株间的相似性范围在0.125~1.000,而应用RAPD技术所得到的菌株间的相似性范围在0.4848~0.8848,酯酶同工酶酶谱所表现出的遗传差异性要大于RAPD谱带的差异性。可见球孢白僵菌种间存在着较为丰富的遗传多样性。     

苏云金杆菌HBF-1菌株晶体蛋白活化及对金龟幼虫毒力的影响

通过SDS-PAGE研究了缓冲液pH值对HBF-1菌株晶体蛋白的降解活化作用及其对晶体蛋白杀虫毒力的影响.结果表明,晶体蛋白在牛胰蛋白酶和金龟子幼虫中肠液作用下的降解程度,随着缓冲液pH值的增加而加深.幼虫中肠蛋白酶在缓冲液pH值达到8.0时,就能完全降解晶体蛋白;而胰蛋白酶在pH值达到11.0时,才能把晶体蛋白完全降解.产生的活力片段分子量近似,均在63.0kD左右.在pH11.0条件下,胰蛋白酶的降解速度大干幼虫中肠液.生测结果显示,晶体蛋白经中肠液水解后,其毒力明显增强,在7d和14d增效率分别达到1.25和1.00.同时,经强碱性缓冲液处理后,也起到了较强的增效作用.     

球孢白僵菌与11种新型化学杀菌剂的相容性评价

本研究测定了当前市场上常用的11种化学杀菌剂对球孢白僵菌HFW-05萌发、生长速率、产孢量、胞外蛋白酶产生水平及杀虫活性的影响。结果表明,常规浓度下,除68.75%氟菌霜霉威对菌株HFW-05菌丝生长没有抑制作用、50%啶酰菌胺对菌株HFW-05产孢量没有抑制作用外,其余杀菌剂对HFW-05孢子萌发、菌丝生长、产孢量和胞外蛋白酶产生水平均有显著抑制作用。60%唑醚代森联对菌株HFW-05的抑制作用最强,常规浓度、5倍稀释和10倍稀释浓度下均显著抑制菌株HFW-05孢子萌发、菌丝生长、产孢量及胞外蛋白酶的产生。多数杀菌剂随处理浓度的降低和时间推移对菌株HFW-05的抑制作用逐渐减弱。白僵菌-杀菌剂同时使用时,42.4%唑醚氟酰胺、10%苯醚甲环唑和50%咯菌腈没有降低HFW-05的杀虫活性,小菜蛾2龄幼虫的校正死亡率和僵虫率与单独使用菌株HFW-05差异均不显著;25%双炔酰菌胺、50%啶酰菌胺、50%烯酰吗啉、68.75%氟菌霜霉威、50%醚菌酯、60%唑醚代森联和32.5%苯甲嘧菌酯则显著降低了菌株HFW-05对小菜蛾2龄幼虫的杀虫活性,其中60%唑醚代森联对菌株HFW-05的致病力影响最大,对小菜蛾2龄幼虫的校正死亡率降低了49.9%;25%吡唑醚菌酯对小菜蛾2龄幼虫有一定致死作用,校正死亡率为46.2%,与菌株HFW-05同时使用时小菜蛾2龄幼虫的校正死亡率提高了20%。     

河北省不同生态区的苏云金芽孢杆菌cry基因多样性研究

摘要：为了明确苏云金芽孢杆菌在不同的生态区的分布特点,从河北省不同生态地区（阜平天生桥、涞源白石山、安新白洋淀、保定郊区大田、安国中草药田）采集土样806份,采用温度-抗生素法分离Bt菌株46株。利用PCR-RFLP对46株菌进行了基因型研究,结果表明从46株Bt菌株鉴定出八种不同的基因型cry1, cry1I, cry2, cry3, cry4, cry8, cry30, cry32,11株未鉴定出基因型。通过SDS-PAGE分析,结果表明这些菌株主要表达130-150KD,70-80 kD,60kD和30kD蛋白。     

球孢白僵菌与低剂量化学杀虫剂对小菜蛾的协同增效作用

本文联合应用球孢白僵菌Beauveria bassiana HFW-05与低剂量化学杀虫剂,评价其是否对小菜蛾防治具有协同增效作用,为小菜蛾的有效防控提供新的途径。结果表明,低剂量的化学杀虫剂对菌株HFW-05分生孢子的萌发率、菌丝生长和胞外蛋白酶活性没有影响,甲氨基阿维菌素苯甲酸盐和氯虫苯甲酰胺的增效作用最明显。低剂量甲氨基阿维菌素苯甲酸盐和氯虫苯甲酰胺与HFW-05混用均可明显提高对小菜蛾2龄幼虫的杀虫速度。氯虫苯甲酰胺最低设定浓度10×与HFW-05 3个浓度（1.0×10⁶、1.0×10⁷、4.0×10⁷孢子/mL）混用对小菜蛾的理论LT₅₀均低于1 d,显著低于单独使用HFW-05孢悬液。甲氨基阿维菌素苯甲酸盐4×与HFW-05 3个浓度（1.0×10⁶、1.0×10⁷、4.0×10⁷孢子/mL）混用对小菜蛾的LT₅₀分别为2.4、2.2和1.2 d,显著低于单独使用HFW-05孢悬液。甲氨基阿维菌素苯甲酸盐和氯虫苯甲酰胺均没有影响HFW-05对小菜蛾的僵虫率。表明白僵菌HFW-05与低剂量甲氨基阿维菌素苯甲酸盐和氯虫苯甲酰胺联合应用,在保证白僵菌侵染作用的同时,可有效提高对小菜蛾的致病力,是防治小菜蛾的一项新的有效措施。     

高温胁迫法对球孢白僵菌HFW-05耐热力及毒力的提高

为了检测及提高球孢白僵菌HFW-05对高温环境的耐受力,将浓度为108孢子/mL的孢悬液,在48℃下恒温振荡水浴,不同时间取出测定孢子存活率,同时将处理液接种制备孢子粉,测定下一代的产孢量、疏水性、不同温度下的萌发中时、生长速率、毒力以及胞外蛋白酶和几丁质酶的活性.结果表明,高温胁迫处理能够在一定程度上提高HFW-05菌株的耐热力.其中处理120 min孢子存活率可达到80%以上,处理110 min在27℃下产孢量是对照的3倍多,两者的疏水性均显著高于对照.各处理一代菌株分生孢子在32℃下萌发中时(GT50)均显著低于对照,在32,34℃下胞外蛋白酶和几丁质酶活性高于对照,但各处理间差异不显著.以二龄初小菜蛾为供试幼虫,在27℃下,各处理的毒力仍均低于未处理对照,但在32℃下均显著高于对照,在34℃下对照及处理分生孢子均无杀虫活性.     

河北省不同生态区的苏云金杆菌资源调查

在河北省６个生态区共采集土样４６３７个，从中分离获得２４１株苏云金杆菌，平均分出率为５．２％。从苏云金杆菌在河北省６个生态区的分布上分析，南太行山东麓暖温半干旱区苏云金杆菌分出率最高，达９．８％；冀中凉温半干旱区苏云金杆菌种类最多，有５种Ｈ血清型分布。对分离菌株鞭毛血清型鉴定结果表明，河北省有Ｈ１、Ｈ３、Ｈ４、Ｈ５、Ｈ６、Ｈ１０及Ｈ１１型的苏云金杆菌分布，其中Ｈ１１型为我国首次分离。通过对２４１株苏云金杆菌的生物测定，筛选出１０余株对玉米螟、棉铃虫和粘虫的高毒力菌株，为我国生产高效的苏云金杆菌杀虫剂提供了重要的菌种资源