云锦杜鹃RhLIS基因的克隆与表达分析

芳樟醇合酶(LIS)是植物香气化合物中芳樟醇合成途径的关键酶。为探究杜鹃花(Rhododendron spp.) LIS基因的功能及表达特性,解析芳樟醇的合成机理,本试验以云锦杜鹃(Rh. fortunei)为试材,利用反转录PCR(RT-PCR)技术和cDNA末端快速扩增(RACE)技术克隆LIS基因全长cDNA序列,并应用顶空固相微萃取(SPME)与气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术,分析云锦杜鹃不同花期的花瓣及其他组织中LIS基因的表达水平和芳樟醇含量的变化关系。结果表明,从云锦杜鹃花苞cDNA中克隆得到RhLIS基因,含有完整的cDNA开放阅读框(ORF)序列长1 887 bp,编码628个氨基酸,与其他物种的LIS蛋白质氨基酸序列具有40%~50%的同源性;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析结果表明,在不同花期的花瓣中,云锦杜鹃RhLIS表达水平先升高后降低,在盛开期的表达量最高,雄蕊中的表达量远高于雌蕊,幼叶高于老叶,花瓣高于花蕊和叶片。检测分析花香成分中芳樟醇的释放量,结果显示在云锦杜鹃不同花期的花瓣中,芳樟醇含量变化趋势与LIS基因的表达水平相一致,在半开期达到最大值,花蕊中芳樟醇含量均远低于花瓣;云锦杜鹃LIS基因的表达量与芳樟醇含量呈高度正相关。本研究结果为杜鹃花芳香品种的培育和改良提供了理论依据。     

海南番木瓜疫病病原菌鉴定与ITS序列分析

笔者对海南番木瓜疫病病原菌进行分离、纯化及致病性测定,并通过形态学和分子生物学技术对其进行鉴定。结果表明通过形态学鉴定和核糖体DNA-ITS序列分析,进一步明确海南番木瓜疫病病原菌为棕榈疫霉（Phytophthora palmivora）。     

TET去甲基化酶对猪卵母细胞发育的影响

【目的】研究TET(ten-eleven translocation)去甲基化酶对猪卵母细胞发育的影响。【方法】将收集的猪卵丘-卵母细胞复合体(COCs)置于不同浓度(0(对照组)、100、200和400μmol/L)Bobcat339抑制剂的体外成熟培养液中培养42 h,测量卵丘扩展直径,统计成熟率,确定最小有效浓度。在体外成熟培养液中培养27 h后,利用免疫荧光(IF)检测5-甲基胞嘧啶(5mC)与5-羟甲基胞嘧啶(5hmC)信号强度以及纺锤体组装情况;利用DCFH-DA染料检测卵母细胞活性氧(ROS)水平;利用JC-1染色法检测线粒体膜电位水平(MMP);利用ATP检测试剂检测卵母细胞ATP水平;利用实时荧光定量PCR检测42 h时COCs卵丘扩展相关基因表达水平和27 h时卵母细胞抗氧化相关基因表达水平。【结果】与对照组相比,100、200和400μmol/L组卵丘细胞扩展水平均极显著降低(P<0.01),100、200和400μmol/L组成熟率显著或极显著降低(P<0.05;P<0.01),确定最小有效浓度为100μmol/L,后续试验均用该浓度。IF检测...     

海南甘蔗发展情况与思路

海南岛地热带北缘,光温水条件优越,一年四季适合农作物生长,是我国唯一最具热带海洋气候特点的宝地,海南有宜农地１０１．６万公顷,宜热作地８４．７万公顷,是发展甘蔗生产的最适地区,小面积产创全国之冠,每公顷产量高达４２６吨（三亚市崖城,品种海蔗４号,１９７６年）糖蔗的含糖份也名列全国前茅,有些年份蔗糖份平均达１４％以上,有的品种高达１９．１％,（崖城红皮,３月份）。“八五”以来,每年种植甘蔗面积１０万     

三峡库区花岗岩林地坡面优先流对降雨的响应

通过在长江三峡曲溪小流域花岗岩林地坡面开挖土壤剖面 ,采用自记雨量计和翻斗式流量计对优先流、土壤渗流及降雨进行了观测 .结果表明 ,在同场降雨中 ,优先流流速最大可达土壤剖面渗流流速的 2 16 6倍 ,所测优先流总量在土壤剖面渗流总量中占 5 5 %～ 7 2 % .在其他影响因素相同的条件下 ,降雨强度越大 ,优先流产生的时间越早 .在一次降雨过程中 ,降雨历时延长 11h时 ,优先流总量可增加 96 94 0cm3.优先流峰值流量与降雨量、降雨峰值呈正相关关系 .同时 ,降雨量的大小还直接影响到优先流在土壤剖面渗流中所占的比重 .同场降雨中不同优先流的波形比较相似 ,即上升阶段的历时较短 ,表现为较大的正斜率 ;而降雨停止后 ,波形呈缓慢的下降趋势 ,表现为较平缓的负斜率 .     

氯酸钾对储良、石硖龙眼催花效果比较

龙眼是极典型的亚热带果树，在常规栽培条件下，除了树体营养积累外，冬季12月至翌年1月间，要有一段相对低温(10～14℃)期才有利于花芽分化，这对于海南地区来说极难达到，因此，海南龙眼常年歉收。20世纪90年代末，台湾省将氯酸钾用于龙眼花期调控技术引进大陆后，全国各龙眼产区先后使用该项技术进行验证试验。但由于不同龙眼品种对氯酸钾的敏感程度不同，且气候、土壤等因素也影响氯酸钾催花效果，因而各地的试验结果也不尽相同。本试验是针对海南主栽品种储良和石硖龙眼进行催花效果比较，以期获得较科学的数据，为生产实践提供依据。     

菠萝凋萎相关病毒-1实时荧光定量RT-PCR检测体系的建立与应用

菠萝凋萎相关病毒-1( Pineapple mealybug wilt associated virus-1, PMWaV-1)是田间检出率最高的菠萝凋萎病毒。本研究根据PMWaV-1 CP基因保守序列设计特异性TaqMan探针和引物, 建立并优化了PMWaV-1实时荧光定量RT-PCR检测方法。优化后的反应体系制备的标准曲线为 y=-3.307×logx+38.18, 相关系数 r2为0.998。试验结果表明, 该方法能特异性地检测PMWaV-1, 对PMWaV-2、3和阴性对照均无反应; 最低检测限达到40拷贝。重复性试验表明批内和批间变异系数均小于1.98%, 是一种操作简便、特异性强、灵敏度高、重复性较好的PMWaV-1定量检测方法。样品检测结果表明PMWaV-1在菠萝植株老叶、嫩叶和吸芽中的病毒含量呈递减趋势。     

四川省耕地资源态势及持续利用探讨

耕地是人类生存和发展最宝贵的物质基础。当前四川耕地资源数量不断减少,耕地质量日益下降,不利于经济社会的持续发展。本文分析了四川省耕地资源的数量和质量态势及影响因素,并提出了建立健全耕地保护制度、盘活存量土地和加强中低产田改造等实现耕地资源持续利用的政策建议。     

无籽西瓜优质品种引种试验

对目前海南从国内外引进栽培的无籽西瓜品种及国内部分省市主栽品种中表现较优的9个品种进行了品比试验。通过田间农艺性状、物候期及产量比较及果实品质鉴定等，分析筛选出综合性状表现较优的嘉新、农友新1号、崖研1号等3个品种，同时初步摸索出配套的高产栽培技术，并在全省扩大示范推广种植130多公顷，新增产值141．8万元，新增利润121．2万元，产生了良好的社会经济效益。     

番石榴丰产栽培关键技术

自近几年从台湾引进珍珠番石榴品种后，海南番石榴产业发展迅速，2005年全省种植面积3．5万亩，总产3．8万吨。目前已经成为果业中重要的组成部分，取得了较好的经济回报。但海南种植番石榴科技含量低，果实品质、果实外观参差不齐，制约了番石榴产业更进一层发展。