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[目的]将安氏隐孢子虫肌动蛋白基因进行克隆并在Hela细胞中真核表达。[方法]根据筛选安氏隐孢子虫T7噬菌体展示文库获得的肌动蛋白(CA42)部分编码基因序列设计特异性引物,扩增目的基因CA42,构建重组真核表达载体pVAX1-CA42,将其转化入He-la细胞,用间接免疫荧光、SDS-PAGE、Western blotting检测CA42蛋白在转染细胞中的表达情况。[结果]重组质粒能在Hela细胞中表达,且表达产物具有反应原性。[结论]成功克隆并表达了安氏隐孢子虫肌动蛋白基因,并在Hela细胞中能够稳定表达。 相似文献
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从长春、天津、大连地区分离到10株马立克氏病病毒(MDV),经电镜观察、琼脂扩散试验、痘斑及蚀斑形成试验,均符合MDV的特点.通过MDV单克隆抗体、鸡胚细胞培养及致病性试验等鉴定,10株病毒均为血清I群MDV.火鸡疱疹病毒疫苗对其中的C-4株的保护率低于京-1株(P<0.01),而对其它株的保护率与京-1株差异不显著(P>0.05). 相似文献
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本研究在双抗体夹心ELISA检测牛病毒性腹泻-粘膜病病毒(BVD-MDV)抗原的基础上,研制了检测BVDMDV抗原的试剂盒。经试验证明特异、敏感,4℃保存6个月检测结果稳定;与原方法比较,易于保存及运输,使用方便,为商品化推广应用提供了前提。 相似文献
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以IGF-Ⅰ基因作为松辽黑猪生长和胴体性状的候选基因,采用PCR-SSCP方法检测30头松辽黑猪IGF-Ⅰ基因外显子4(179 bp)的多态性,对该基因的不同基因型与生长和胴体性状的关系进行分析。结果表明,IGF-Ⅰ基因的2个等位基因和3种基因型在松辽黑猪中均有不同频率的分布,遗传多态性较高; IGF-Ⅰ不同基因型对断奶后日增重有显著影响,AA型显著高于AB型和BB型(P<0.01)。AA型猪的瘦肉率显著低于AB型和BB型(P<0.01),而AA型猪的平均背膘厚显著高于AB型和BB型(P<0.01),对其它性状的影响差异不显著。因此,IGF-Ⅰ基因的遗传分析结果说明该基因对松辽黑猪的平均日增重、瘦肉率和平均背膘厚等3个性状有显著的遗传影响,可以初步推断IGF-Ⅰ基因可能是影响猪生长和胴体性状的一个主效基因或是一个与影响猪生长和胴体性状的QTL连锁的基因。 相似文献
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本实验利用弗式完全佐剂和弗式不完全佐剂,乳化病毒,制备免疫抗原,对BALB/c小鼠进行三次免疫。将免疫效价达到1:10000以上的免疫小鼠脾细胞与SP2/0细胞进行融合,通过间接ELISA方法对阳性杂交瘤细胞株进行筛选,并通过有限稀释法将呈强阳性的杂交瘤细胞亚克隆3~4次,直到杂交瘤细胞阳性率达到100%。得到阳性株命名为2E3,对阳性株细胞进行扩大培养,并将细胞注入腹腔,提取腹水,测定细胞上清及腹水的效价,分别为10×25,10×26。利用亚类鉴定试剂盒测定单抗的亚类。鉴定结果为IgG1型。 相似文献
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应用PCR技术,从小鼠基因组中克隆了1.6kb乳清酸蛋白(WAP)基因5’上游调控序列,经酶切和测序证实与已知序列基本一致。为了证实此调控序列能否指导外源基因在乳腺中的表达,将此序列与报告基因CAT融合,构建了pWAP—CAT—polyA乳腺定位表达载体,脂质体包裹后,经乳导管将其注入到妊娠中后期家兔乳腺中进行暂时表达。分别于家兔分娩后1—10d采奶,用ELISA检测乳汁中CAT含量。结果表明,所构建的载体在家兔乳腺中能够表达,表达水平在家兔分娩后1—5d较高。 相似文献
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利木赞牛与草原红牛杂交后代体尺性状效果分析 总被引:2,自引:0,他引:2
在草原红牛的进一步选育过程中,引进利木赞牛杂交,用SPSS软件对各杂交后代以及草原红牛群体间体尺性状进行了统计分析。结果表明,F1代在体高、十字部高、坐骨端高、体长、坐骨端宽、髋宽和腿围等7个体尺性状上均值极显著或显著高于草原红牛(P<0.01或P<0.05);F2代在腿围和髋宽性状上极显著高于草原红牛(P<0.01);F3代在髋宽性状上极显著高于草原红牛(P<0.01)。因此,采用引入杂交可以提高草原红牛群体肉用性能。 相似文献
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实验小鼠是最常使用的一种模式动物,在生命科学和医学研究中发挥着巨大的作用。NIH稀毛小鼠是被毛异常的自发突变鼠,其背景品系是封闭群NIH小鼠,为常染色体隐性遗传。毛囊的生长发育包括形态发生和周期循环两个阶段,目前研究发现的多种被毛突变小鼠模型主要表现为周期循环阶段的异常,例如典型的Hr基因突变小鼠表现为渐进性脱毛,而NIH稀毛小鼠属于形态发生期存在异常表现为出生后一直保持稀毛甚至无毛的状态。前期研究中对NIH稀毛小鼠的皮肤结构和免疫相关的生物学特性进行了观察和测定,发现NIH稀毛小鼠表皮层增厚、毛发周期转换异常,单增李斯特杆菌感染实验表明相较于NIH小鼠其免疫力降低。 相似文献