大肠杆菌病的噬菌体治疗

近年来,由于抗生素的滥用,致使耐药菌株越来越多,新的抗生素的研制又存在周期长、花费高、使用后细菌很快产生耐药性等问题,严重限制了抗生素在细菌病治疗中的应用。噬菌体作为天然抗菌剂,可抵制细菌感染,无论是裂解来自人类、动物体中的细菌,抑或消除食品及公共环境领域的污染,噬菌体均扮演着重要的角色。本研究以大肠杆菌感染的噬菌体治疗为例,介绍噬菌体临床治疗方面的研究进展。     

毛皮动物大肠杆菌对氟喹诺酮类药物及中药的耐药性研究

本试验旨在了解毛皮动物源大肠杆菌的耐药性,有效控制毛皮动物细菌病的发生.针对14株分离自毛皮动物的大肠杆菌,采用PCR方法检测氟喹诺酮类耐药基因gyrA的携带情况,并对扩增得到的gyrA基因进行克隆测序和同源性分析;进一步针对gyrA基因制备地高辛标记的核酸探针,使用斑点杂交检测大肠杆菌对氟喹诺酮类药物的耐药情况;使用牛津杯法检测了大肠杆菌分离株对复方中药的敏感性.结果显示,PCR检出gyrA基因的阳性携带率为57.1%,斑点杂交检出耐氟喹诺酮类大肠杆菌的阳性率为50.0%,对复方中药的耐药率为28.6%.结果表明,毛皮动物对氟喹诺酮类药物的耐药性非常严重,对中药表现较高的敏感性,研究结果将为临床毛皮动物大肠杆菌病的防制提供依据.     

多价噬菌体Bp7尾丝蛋白gp37的表达及其对噬菌体增殖的影响

为研究大肠杆菌多价噬菌体Bp7的尾丝蛋白gp37在噬菌体宿主识别中的作用,通过PCR扩增噬菌体Bp7尾丝蛋白gp37的C末端基因,构建原核重组表达质粒pGEX-6p-1-gp37,并转化大肠杆菌BL-21,IPTG诱导表达。以鉴定正确的融合表达蛋白免疫家兔,制备多克隆抗体,并检测抗血清对噬菌体增殖作用的影响。结果显示:经SDS-PAGE及Western blot鉴定证实得到含有GST标签67ku的融合表达蛋白;抗Bp7尾丝蛋白gp37的抗血清可明显抑制噬菌体Bp3、Bp7的增殖(P<0.05),对噬菌体Bp2、Bp5、Bp6的增殖具有抑制作用,但差异不显著(P<0.05),该抗血清对噬菌体Bp4的增殖反而具有促进作用。试验结果证实gp37参与噬菌体Bp7的宿主识别。     

谷氨酰胺对肉鸡小肠组织结构和吸收能力的影响

本试验旨在研究饲粮不同添加水平谷氨酰胺(Gln)对热应激肉鸡小肠组织结构和吸收能力的影响.选用1日龄科宝- 500肉鸡240只,随机分为6个处理,每个处理4个重复,每个重复10只.Ⅰ组为对照组,饲喂玉米-豆粕型基础饲粮,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ组为试验组,分别饲喂在基础饲粮中添加0.4％、0.8％、1.2％、1.6％和2.0...     

参与式教学在畜牧微生物学教学中的应用探讨

畜牧微生物学是青岛农业大学动物科学专业学生的专业基础必修课,本门课程专业性强、知识点多、内容琐碎,传统教学模式容易使学生提不起兴趣,对课程学习产生倦怠情绪。为了激发学生的学习热情,本文对原有的"教师教,学生学"的单一教学模式进行改革,探讨了参与式教学的应用。通过教学改革,极大地促进了学生的主动性和积极性,提高了整体教学质量。     

猪γ-干扰素基因真核重组表达质粒的构建

用RT—PCR方法从长白猪脾脏淋巴细胞中扩增出猪γ-干扰素(IFN-γ)基因，经克隆测序表明与已发表序列同源性为100％。将目的基因插入表达载体pcDNA3．1( )，构建出真核重组表达载体IFN-γ-pcDNA。将重组质粒转染COS7细胞，检测转染细胞培养上清IFN-γ活性，结果表明转染上清对猪繁殖与呼吸综合征病毒有抑制作用。     

猪生殖与呼吸综合征病毒GP5基因对小鼠的DNA免疫

将表达完整猪生殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）GP5和融合表达泛素与GP5成熟肽的真核重组表达质粒（pCI—GP5和pcDNA—U—GP5）分别肌肉注射免疫BALB／c小鼠，共免疫3次。采用间接ELISA法检测血清中抗GP5的抗体水平，MTT法检测脾淋巴细胞的增殖能力，LDH释放试验检测脾NK细胞的杀伤活性，并通过流式细胞术检测脾淋巴细胞亚群的比例。结果发现，2种DNA重组质粒免疫后均可诱导小鼠产生体液免疫和细胞免疫。三免后第5周，pCI—GP5质粒免疫组诱导产生的抗GP5抗体水平及NK活性明显高于pcDNA—U—GP5质粒免疫组；而pcDNA—U—GP5免疫组的淋巴细胞增殖指数及CD4%-CD8^＋T细胞比例明显高于pCI—GP5组。表明，GP5基因可诱导产生较高的免疫反应，泛素与GP5的融合表达可增强PRRSVGP5诱导的细胞免疫反应。     

鸡大肠杆菌病病原的分离鉴定及药敏试验

自疑似大肠杆菌病例中分离到大肠杆菌44株，并对其病原特性进行了研究，结果表明这些菌的生化特性基本一致，与文献报道相符。对此44株大肠杆菌进行血清型鉴定，鉴定出血清型39株，其中O血清型13种，以O₇₈、O₃₅、O₂₄、O₁、O₁₅、O₇₆和O₈₈等7个血清型为主，占定型菌株的84.6%。其中血清型为O₇₈的菌株占定型菌株的38.5%，为优势血清型。用9种抗菌药物（头孢唑啉、庆大霉素、阿米卡星、链霉素、环丙沙星、诺氟沙星、青霉素、妥布霉素、红霉素）进行了药敏试验，结果表明分离菌株呈现出不同程度的耐药性，其中青霉素、红霉素的耐药率最高（均为97.7%），其次是环丙沙星（81.8%），大多数为多重联合耐药；而阿米卡星、妥布霉素和庆大霉素的敏感率较高，其中以阿米卡星（90.9%）最敏感。     

一株优良乳酸菌的分离鉴定与特性研究

利用乳酸菌分离专用培养基-MRS培养基从发酵40 d的酸菜汁中分离得到一株乳酸菌,利用经典分类法对所分离的乳酸菌菌株进行了系统的细菌学鉴定和生物学特性研究。结果该菌株被鉴定为乳杆菌属、植物乳杆菌。对其进行生长曲线、pH及酸度的测定,结果显示分离乳酸菌的对数生长期较长;培养以后pH下降达到稳定;酸度较高的产酸时间为前20 h。抑菌试验表明：该菌株对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌均有明显抑制作用。由于该菌具有生长快、产酸量高并具有抑菌活性等特点,因而适合作为微生态制剂的优良菌种开发利用。     

青岛地区肉鸡致病性大肠杆菌血清型鉴定及药敏试验

本试验对采自青岛地区多个肉鸡场的疑似大肠杆菌病的病、死鸡内脏器官进行病原的分离鉴定,并对大肠杆菌分离株进行培养特性、血清型及耐药性的检测.共分离到25株大肠杆菌,鉴定出15株血清型,其中以O1、O22 、O157、O24血清型为主,占定型菌株的60%.其中O22血清型占定型菌株的12%,为优势血清型.细菌的耐药性检测结果显示,分离菌株呈现出不同程度的耐药性,25株大肠杆菌对庆大霉素、阿米卡星高敏比例分别为88%和56%,卡那霉素、硫酸安普霉素次之,敏感菌株比例在20%~48%之间,乳酸环丙沙星等抑菌作用低,敏感菌株比例低于10%.而氟哌酸等对所分离的菌株几乎无抑制作用.