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GPAM基因过表达载体的构建及其在奶牛乳腺上皮细胞中的表达 总被引:1,自引:0,他引:1
线粒体3-磷酸甘油酰基转移酶(GPAM,glycerol-3-phosphate acyltransferase)是一种具有编码蛋白质功能的基因,位于牛的26号染色体上。GPAM酶参与催化三酰基甘油和磷脂生物合成反应的第一步,继而对甘油三酯的量进行调控,是生物体内一个必不可少的酶。试验以中国荷斯坦牛RNA反转录成cDNA,继而PCR扩增出GPAM片段,并连入pBI-CMV3载体,构建了pBI-CMV3-GPAM真核表达载体,并验证了其在奶牛乳腺上皮细胞中的表达情况。结果表明:成功构建了牛GPAM真核表达载体,并在体外奶牛乳腺上皮细胞中高效表达。 相似文献
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FADD(Fas-associated death domain protein)存在于Fas/FasL系统中,是信号传导通路的一个信号连接蛋白,FADD通过传递凋亡信号,从而介导细胞凋亡。为进一步验证FADD基因抑制细胞增殖和促进细胞凋亡的作用,从牛卵巢组织中扩增FADD基因,将FADD基因连接到带有绿色荧光蛋白报告基因的真核表达载体pAcGFP-N1中,构建过表达FADD基因载体,并构建FADD基因的RNAi载体;用脂质体介导法将FADD基因RNAi载体、真核表达载体转染到牛胎儿成纤维细胞中,观察有无荧光的表达,并使用Real-Time qPCR和Western blot方法检测FADD基因mRNA、蛋白水平的表达情况。结果表明:成功构建出FADD基因RNAi载体和高表达载体,重组质粒转染牛胎儿成纤维细胞24 h后在荧光显微镜下可观察到绿色荧光,转染效率可达50%。 相似文献
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生物信息学方法预测出miRNA-375可能的靶基因为DIAPH2和QKI,实时荧光定量法检测了靶基因在1日龄、1-7月龄军牧1号白猪睾丸组织中的表达量。结果表明,3月龄前猪睾丸组织中miRNA-375表达量极低,4-7月龄表达水平逐渐上调,差异显著。预测靶基因DIAPH2在1-7月龄呈显著下调趋势,OKI基因在1-7月龄睾丸组织中表达水平呈显著上调趋势。经SPSS13.0分析可知,不同时期睾丸组织中miRNA-375与2个预测靶基因DIAPH2和QKI的相关系数r分别是-0.396(P〈0.05),0.411(P〈0.05),2个预测靶基因DIAPH2和QKI之间的相关系数是0.151(P〉0.05),靶基因DIAPH2和QKI无明显联系,初步证明DIAPH2可能是miRNA-375的靶基因,为探索猪睾丸组织发育提供了一定的研究基础。 相似文献
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粮食问题涉及民生,是国家社会稳定和发展的重要基础,在国家经济发展中,粮油的安全问题同金融安全、生态安全问题一样,深刻的影响着国家的健康和可持续发展,粮油安全是影响国家全局的大事、要事。在粮油的生产与流通环节中,最重要的过程当属粮油的储藏,这是确保粮油安全的基础前提,在粮油储藏上,粮油储藏标准担负着监督和管理粮油安全的重任,在粮食安全方面有着深远的作用,对标准体系的研究与完善是保证粮油储藏安全、保证粮油质量的重要手段,科学严谨的粮油储藏标准化体系,能够充分的保护农民的权益,提高粮油储藏的监管能力,监督粮油的市场秩序,提高我国粮油的质量。 相似文献
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寄生虫病可发生于动物养殖过程的各个环节,不同品种、年龄、性别的动物均可感染寄生虫病。由于其发病症状不明显,不会造成急性死亡等原因,所以该类疾病没有引起足够的重视,导致了寄生虫病的大范围传播,给养殖业造成了巨大的危害。 相似文献
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猪呼吸道疾病是一直困扰猪场管理者和技术人员的问题。工厂化猪场高密度的饲养方式,数量庞大的猪群连续在同一空间饲养,加上猪只频繁周转,常常引起猪应激反应增加,使猪只机体抵抗力下降。高密度的猪群造成猪舍小气候环境恶劣,空气混浊、刺激性气味增大,刺激猪的上呼吸道黏膜,猪易感染或激发呼吸道疾病,造成猪只生长速度缓慢、饲料报酬降低、死亡率上升,推迟上市时间以及管理上恶性循环等严重的经济损失。工厂化猪场减少猪呼吸道疾病的发生有以下几个方面。 相似文献
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四川牦牛(Bos grunniens,yak)主要分布于我国海拔3 000~5 000 m的高原地区,以肉质细嫩、味美可口、低脂肪、高蛋白而受到国内外消费者的欢迎。牦牛全身都是宝,藏族人民的衣食住行都离不开它。解偶联蛋白1(uncoupling protein 1,UCP1)是棕色和米色脂肪细胞特异性表达的一种产热线粒体蛋白,通过线粒体中的电子传递链参与底物氧化和ATP分解进程,从而产生热量并为机体供能。本课题组前期通过组学分析发现:UCP1基因可能对脂质代谢具有重要调控作用。因此,本试验拟以四川牦牛为研究对象,探讨UCP1基因在四川牦牛群体中的遗传多态性,分析四川牦牛肉品质性状相关的潜在遗传标记位点。结果显示,UCP1基因的内含子4和外显子5中共发现4个SNPs位点,其中I4-769 G>A位点的AA型的背最长肌红度显著高于GG型;在I4-836 C>T位点中CC型的背最长肌红度和黄度显著高于CT型;E5-26 C>G位点的CC型的背最长肌亮度显著低于CG型,而CC型背最长肌红度和黄度显著高于CG型;E5-59 A>G位点的GA型的背最长肌24 h时的pH值显... 相似文献
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转化生长因子β1(transforming growth factor beta1,TGF-β1)基因是本课题组前期在高产和低产雷州黑鸭群体中通过转录组学测序分析筛选出的可能对雷州黑鸭繁殖性能有重要调控作用的候选基因。为进一步探究TGF-β1基因的遗传多态性,分析其产蛋性能的相关的遗传分子标记,本试验采用PCR扩增技术和直接测序法,检测100只雷州黑鸭群体中的TGF-β1基因的SNP位点,使用SPSS 26.0软件分析TGF-β1基因的遗传多态性位点基因型与雷州黑鸭产蛋性能的相关性。结果显示,在TGF-β1基因的第6个内含子中发现3个SNPs位点与雷州黑鸭的开产蛋重显著相关,分别为I6-2188 C>T、I6-2220 T>C和I6-2235 A>C;I6-2188 C>T位点与开产日龄显著相关;使用Haploview软件对SNPs位点进行连锁分析发现,H1H1单倍型的开产蛋重显著高于H2H2单倍型。综上所述,TGF-β1基因的3个SNPs位点可作为雷州黑鸭繁殖性能的遗传标记。 相似文献