GPX4失活通过JNK通路缓解LPS诱导巨噬细胞炎症反应

【目的】研究硒蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidases 4,GPX4)失活如何参与调控脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症反应及其潜在的分子机制。【方法】体外培养RAW264.7巨噬细胞,以DMSO为对照,使用0.1～5.0μmol/L GPX4抑制剂FIN56处理,通过CCK-8法检测细胞活力和Western blotting检测GPX4蛋白表达水平,确定抑制剂最适浓度。将RAW264.7巨噬细胞分为4组：对照组,添加DMSO培养24 h; FIN56(GPX4抑制剂)组,添加0.5μmol/L FIN56培养24 h; DMSO-LPS组,DMSO培养24 h后使用LPS(100 ng/mL)刺激3 h; FIN56-LPS组,FIN56培养24 h后使用LPS刺激3 h。各组细胞经培养后,利用荧光探针2′,7′-二氯二氢荧光素二乙酸酯(2′,7′-dichlorodi-hydrofluorescein diacetate, H₂DCFDA)检测细胞内活性氧(reactive...     

陶赛特羊和小尾寒羊在青海湟源地区的生态适应性分析

为评定引入青海省湟源县良种肉羊繁育基地的陶赛特羊和小尾寒羊两个绵羊品种的生态适应性,对其18个生理生化指标进行了系统测定分析,结果表明：①引入的陶赛特羊和小尾寒羊两个绵羊品种大多数生理生化指标在品种内或不同品种间的不同性别、不同年龄个体间以及同性别、同年龄个体间差异不显著（P〉0.05）。②两绵羊品种所测血浆CO2结合力远超出本地藏绵羊水平;体温（T）、呼吸频率（R）、脉搏（P）和瘤胃蠕动频率以及白细胞数（WBC）、红细胞数（RBC）、血红蛋白含量（HGB）的测定结果均大致在本地藏绵羊的各生理指标测定范围之内。③与已引入青海牧区的小尾寒羊大多数生理生化指标相比,本次引进的小尾寒羊在经过一段时间的适应性饲养后,其大多数生理生化指标已与其基本接近或一致;同时,引入的陶赛特羊和小尾寒羊与原产地相应品种在基础生理指标上相比较接近。     

实验性脾虚大鼠小肠结构与免疫功能的变化

本试验采用利血平复制大鼠脾虚模型,观测和探讨其小肠结构与免疫功能变化。与对照组比较结果显示,脾虚组大鼠体重显著下降(P0.05),十二指肠、空肠和回肠的组织结构均有不同程度的损伤,绒毛长度与肠黏膜厚度均显著降低;黏膜上皮内淋巴细胞和杯状细胞数量均显著增加;绒毛顶端与黏膜下层TLR2表达量均显著降低。表明,小肠黏膜结构损伤是脾虚动物体重下降的原因之一;局部过强的免疫反应是造成小肠黏膜结构损伤的主要机制,且此过程并非通过TLR2介导;小肠结构损伤及TLR2表达的显著下降均提示其抵御病原侵袭的功能下降。     

典型荒漠植物凋落物分解及养分动态研究

采用分解网袋法,对古尔班通古特沙漠南缘粗柄独尾草(Eremurus inderiensis)、尖喙牻牛儿苗(Erodium oxyrrhynchum)和沙漠绢蒿(Seriphidium santolinum)3种荒漠植物叶、茎和根的分解、养分释放特性进行了研究。结果表明：叶片、茎、根系的质量损失过程均符合指数衰减模型。经过364 d的分解,粗柄独尾草叶、粗柄独尾草根、尖喙牻牛儿苗叶、尖喙牻牛儿苗茎、尖喙牻牛儿苗根、沙漠绢蒿茎、沙漠绢蒿根的失重率分别为41.96%、81.94%、42.18%、29.32%、47.02%、20.66%和20.71%;3种植物根、茎、叶的分解速率存在显著差异,分解速率依次为：粗柄独尾草根>叶;尖喙牻牛儿苗根>叶>茎;沙漠绢蒿根>茎。在整个分解过程中,N和P含量总的趋势表现为释放,叶、根凋落物质量损失与初始N、P含量显著负相关,非生物因素对其分解有重要影响。     

单核细胞增生李斯特菌精氨酸脱亚胺酶基因的克隆及原核表达

精氨酸脱亚胺酶(ADI)可能介导单核细胞增生李斯特菌抗酸应激,由arcA基因编码。利用分子克隆技术从单核细胞增生李斯特菌10403S扩增得到ADI基因,测序正确后将其插入pET30a表达载体中,构建该基因的原核表达质粒pET30a-ADI,并转化入大肠埃希菌Rosetta中进行诱导表达。核苷酸序列分析显示,ADI基因的完整开放阅读框为1 233 bp,编码410个氨基酸。SDS-PAGE表明:该基因在大肠埃希菌中成功表达,重组蛋白的分子质量约为52.5 ku。为进一步研究精氨酸脱亚胺酶的活性提供了条件,同时也为探索单核细胞增生李斯特菌抗酸应激的机理奠定了重要的基础。     

果蔬成熟和衰老中的重要酶-脂氧合酶

脂氧合酶是广泛存在于植物体中的一种酶,已有研究表明,它可能参与植物生长、发育、成熟、衰老和防御过程的调控。近年来,随着对果蔬采后生理研究的深入,越来越发现脂氧合酶与果蔬采后的变化有关,它调节某些物质的合成,参与乙烯的代谢途径,并与果蔬的抗性、风味、颜色、硬度等都有密切的关系。综述了脂氧合酶在采后的研究进展,提出了该酶可能是控制采后生理变化的关键酶,并提出寻找脂氧合酶特异性抑制剂,用反义基因技术控制该酶的生物合成,培育耐贮新品种的设想     

复方中药对热应激条件下杂交小尾寒羊生产性能、生理参数和血液理化指标的影响

针对目前生产中绵羊遭受热应激的现状,研究了热应激条件下复方中药对杂交羊（小尾寒羊×内蒙古细毛羊）生产性能、生理参数和血液理化指标的影响。选择4味中草药（香薷、大黄、厚朴和黄芩）,按3∶3∶2∶2进行组方。选择240只、体重（36.61±0.73） kg相近的育肥后期杂交绵羊,随机分为4组,各组羊分别饲喂含干物质含量的0（对照组）、0.5%、1.0%和1.5%的复方中药,每组60只羊。试验期为28 d,试验期间羊舍温湿指数平均达79.68。结果表明：1）从生理指标上,日粮中添加不同剂量的中药可显著降低羊的呼吸频率（P<0.05）,并提高了羊的躺卧比例,尤其是下午12：00-16：00,较对照组提高了13.38%~19.15%。2）从生产性能上,饲喂中药显著提高了羊的平均日采食量（ADFI）和平均日增重（ADG）（P<0.05）,不同中药组的ADFI较对照组提高了1.05%~7.21%（P<0.05）,ADG和料重比（F/G）以0.5%组效果最好,ADG较对照组提高了12.12%（P<0.05）,F/G降低了14.68%（P<0.05）。3）从血液理化指标上,饲喂中药组的血清甲状腺素（T₄）和皮质醇（COR）含量分别表现出增加和降低趋势（P<0.05）,尤其0.5%组,T₄含量较对照组提高了13.97%（P<0.05）,而COR含量降低了33.15%（P<0.05）。从血清常规代谢营养指标看,各组间尿素氮（BUN）和葡萄糖（GLU）含量均表现出显著性差异（P<0.05）,0.5%组GLU含量较对照组极显著提高（P<0.01）,而BUN含量显著下降（P<0.05）。4）从经济效益分析,饲喂0.5%~1.5%中药可使增重效益提高了7.50%~13.91%,0.5%组净收益最高（4.85元·d^-1·只^-1）。可见,该复方中药可以有效缓解杂交小尾寒羊的热应激,添加日粮干物质的0.5%最佳。     

防治草莓炭疽病的芽胞杆菌组合的筛选

为开发防治草莓炭疽病的复合菌剂,比较了5株芽胞杆菌（菌株CM3、Y-48、Lh-1、Y-30和Y-9）在不同的组合方式和比例下对草莓炭疽菌Colletotrichum thebromicoia的抑制作用,筛选出抑菌效果的最佳的组合并通过盆栽防治试验测定其防治效果。抑菌试验表明,由巨大芽胞杆菌Y-30和解淀粉芽胞杆菌CM3按照2：1配比而成的组合抑菌率达到59.46%,比菌株Y-48的抑菌率高出13.86%（单菌株中抑菌率最高的菌株,抑菌率为52.22%）,比单菌株Y-30和CM3分别提高72.65%和25.22%。盆栽试验证实,复合菌处理对于草莓炭疽病的防治效果为68.69%,比化学药剂的防治效果提高了23.63%;同时,复合菌处理还有效的促进了草莓的生长,草莓株高、叶片面积、根鲜重以及茎叶鲜重都有显著提高。本试验为复合菌剂应用于草莓炭疽病的生物防治提供了依据。     

河池市兜兰属植物资源及其保护利用初探

在查阅有关资料的基础上,采用样线调查和群落生态学相结合的调查方法,对河池市范围内兜兰属植物的分布数量和生境特征老蚌生珠调查分析。结果表明:河池市兜兰属植物资源丰富,共有6种兜兰属植物分布于全市10个县市区,但分布极不均匀;兜兰属植物生长于河池市石灰岩山地的常绿落叶阔叶林下的岩壁缝隙腐殖土上,所处环境条件脆弱,兜兰植株对环境的依存程度高;特殊的生物学特性、生境的丧失和过度采挖的其致濒的主要原因;在调查分析的基础上,提出了河池市兜兰属植物的保护利用对策。     

家蚕核型多角体病毒ODV囊膜蛋白基因的融合表达及引导外源蛋白进入多角体的研究

为了探索家蚕核型多角体病毒(BmNPV)的包涵体衍生病毒(ODV)囊膜蛋白在病毒粒子包涵入多角体过程中的作用,选择2个ODV囊膜蛋白ODV-E25和ODV-E56作为研究对象,利用能够表达多角体蛋白的BmNPV Polh+Bac-to-Bac表达系统构建了融合表达E25-EGFP和E56-EGFP的重组病毒,在家蚕卵巢培养细胞系(BmN)中进行表达和定位分析。结果表明2种融合蛋白均在BmN细胞中成功表达,并于荧光显微镜下观察到绿色荧光主要分布在细胞核中。从感染的BmN细胞中收集纯化多角体,观察到多角体也能激发出绿色荧光,用Western blot方法进一步证实多角体中含有融合蛋白。这一现象表明当囊膜蛋白基因与外源基因融合表达时,外源融合蛋白能够进入多角体内部,推测这2种ODV囊膜蛋白不仅在病毒粒子包涵入多角体的过程中起信号引导作用,并能引导外源目的蛋白进入多角体。