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本研究根据酵母系统密码子的偏嗜性,对成熟蛋白基因核苷酸序列进行密码子偏嗜性改造,利用毕赤酵母分泌型表达载体pPICZαC来表达犬IFN-α成熟蛋白基因。并采用非洲绿猴肾细胞(Vero) -水疱性口炎病毒(VSV)系统以细胞病变抑制法为基础来测定重组犬α干扰素的效价,同样方法测定了表达产物对PRV和CDV的抑制作用。本试验实现了犬α干扰素在酵母中的高表达,表达量高达58 mg/L,SDS-PAGE检测大小约为24 ku,比预测分子质量大,推测发生了糖基化。表达产物具有较强的种属特异性,在Vero细胞上对PRV具有较高的抗病毒活性,达到了3.6×107 U/L,对CDV也有很好的抑制作用。本研究为犬IFN-α以后的临床应用研究奠定基础。 相似文献
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腹水综合征肉鸡肺脏缺氧诱导因子-1α基因克隆及表达研究 总被引:2,自引:0,他引:2
从21日龄患腹水综合征(AS)鸡肺脏中提取RNA,根据健康鸡胚心室肌细胞缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因序列(登录号为NM204297)设计引物,采用RT-PCR技术进行cDNA扩增,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳分离、纯化、回收后与载体pMD18-T连接,转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆,测序.结果表明,已成功克隆的阳性重组子经测序鉴定其片段大小与预期大小完全一致,为1 576 bp.序列同源性分析比较表明,该cDNA及其推导的氨基酸序列与鸡胚HIF-1α cDNA和氨基酸序列同源性分别为99%和98%.采用RT-PCR技术检测4只21日龄正常肉鸡和4只21日龄AS患鸡肺脏HIF-1α mRNA,结果表明,AS患鸡肺脏HIF-1α mRNA表达丰度极显著高于正常肉鸡(P《0.01).本试验证明,HIF-1α与肉鸡肺动脉高压导致的腹水综合征相关. 相似文献
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66.
本试验旨在初步探索中华蜜蜂(Apis cerana cerana)越冬阶段维生素与矿物质的需要量.根据中华蜜蜂天然饲料--蜂蜜中的维生素和矿物质的含量设计试验饲料(维生素中剂量组、维生素高剂量组、矿物质中剂量组、矿物质高剂量组、维生素中剂量+矿物质高剂量组、维生素高剂量+矿物质中剂量组),测定维生素和矿物质对中华蜜蜂越冬阶段蜂群群势削减率和越冬饲料消耗量2个指标的影响,并以糖水和蜂蜜为对照进行比较,研究中华蜜蜂越冬阶段对维生素和矿物质的需求量.结果表明:在越冬阶段,除了使用天然蜂蜜作为越冬饲料外,也可以在中华蜜蜂常规饲料--糖水中添加复合维生素和矿物质来满足蜜蜂越冬的部分营养需求,复合维生素的最佳添加剂量应低于0.08 mg/kg,复合矿物质的最佳添加剂量应在0.95~1.89 mg/kg. 相似文献
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在青海省海北州天然草地使用甲磺隆与阔叶净混配剂进行防除狼毒试验,结果表明,混配浓度越大对狼毒的防除效果越好,但防除狼毒的同时也会对草场中的其他优良牧草造成巨大伤害,特别是对阔叶牧草造成的伤害最大;综合分析认为:400g/hm2甲磺隆+200g/hm2阔叶净和400g/hm2甲磺隆+400g/hm2阔叶净,两种浓度的混配剂不仅对狼毒防除效果较好而且对禾本科牧草产量和阔叶牧草产量影响最小,优于1125ml/hm22,4-D丁酯(72%乳油)对狼毒的防除效果。认为这两种浓度的混配液在生产中有一定推广价值。 相似文献
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兔真菌性皮肤病是一类传染性极强的人畜共患接触性皮肤病。试验选取体重相近,已感染真菌性皮肤病的吉戎兔15只,分为3组,每组5只,试验组Ⅰ为对照组,注射生理盐水,组Ⅱ和组Ⅲ皮下分别包埋5mg和10mg的两性霉素颗粒剂。给药前和给药后第10天、第20天和第30天分别称重,并观察测定兔皮毛生长及秃斑恢复情况。结果表明,试验组兔增重均高于对照组,差异显著(P<0.05),试验末期组II和组Ⅲ秃斑恢复分别达95%和90%。因此,采用皮下包埋的给药方式有效地延长了两性霉素B的药效时间,可有效治愈兔真菌性皮肤病。 相似文献
69.
硝唑尼特治疗犬贾第虫病的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
选择试验犬8只,将其随机分为4个小组,每组2只.连续6 d对8只试验犬分剐进行粪检,确定无贾第虫感染后,用体外纯培养的犬贾第虫滋养体接种试验犬,然后每天采集试验犬新鲜粪便40 g,用硫酸锌漂浮法进行粪检,当检测犬贾第虫感染呈阳性时,分别用1、2、4 mg/kg体质量剂量的硝唑尼特时1、2、3组试验犬进行灌服治疗,第4组试验犬不用药作为对照.用药后,每天以同样的方法检测贾第虫包囊,并计数.结果表明,以2、4 mg/kg体质量给药的试验犬1 d后粪检结果转为阴性,以1 mg/kg体质量给药的试验犬4 d后粪检结果转为阴性.结果表明以2、4 mg/kg体质量剂量的硝唑尼特对犬贾第虫痛有很好的疗效. 相似文献
70.
J Kwang S Yang F A Osorio S Christian J G Wheeler K M Lager S Low L Chang A R Doster A White C C Wu 《Journal of veterinary diagnostic investigation》1999,11(5):391-395
The sensitivity and specificity of recombinant open reading frame 5 products used in the Western blotting assay for confirmation of porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) serologic status were evaluated. The recombinant antigen-based assays were specifically compared with a commercial enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for PRRSV antibodies using 1) PRRSV antibody-negative reference sera (n = 30), 2) naturally infected pig sera (n = 40), 3) sequential sera obtained from 24 experimentally infected pigs, and 4) sera submitted to 3 state diagnostic laboratories (n = 200). The recombinant antigen assay yielded an average increased sensitivity of 10% over the commercial PRRSV ELISA. The negative controls (group 1 sera) showed no difference between the 2 assays. This comparison confirmed that the recombinant antigen-specific assay was more sensitive than the commercial ELISA and is well suited for routine confirmation of the presence of PRRSV antibodies. 相似文献