鸡痘病毒282E_4株TK基因重组载体质粒的构建

应用已克隆的鸡痘病毒（ＦＰＶ）２８２Ｅ＿４株基因组ＴＫ基因，在ＮｃｏⅠ部位引入痘苗病毒Ｐ７．５启动子和Ｐ１１启动子控制下的大肠杆菌ＬａｃＺ基因，经酶切鉴定，成功地构建了用于ＦＰＶ重组的载体质粒。与亲本毒株在鸡胚成纤维细胞内共转染，产生了表达ＬａｃＺ基因的重组鸡痘病毒。经传代筛选、纯化，重组病毒较稳定。实验结果表明，以ＴＫ基因构建的重组载体质粒可用于外源基因的重组表达研究。     

HIV－1gag基因重组痘苗病毒的构建和高效表达

Ｇａｇ蛋白是人Ⅰ型免疫缺陷病毒（ＨＩＶ－１）重要的结构蛋白，可诱导机体产生体液和细胞免疫应答。本试验将ＨＩＶ－１不同长度的长末端重复序列（ＬＴＲ）和全长的ｇａｇＯＲＦ置于痘病毒启动子控制下，经过同源重组、红细胞吸附试验筛选和间接免疫荧光试验鉴定，分离了６株重组痘苗病毒。免疫印迹（Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ）和免疫酶试验检测表明，６株病毒均能表达ｇａｇ基因，其中以ｖ１６ＬＧ△２的Ｇａｇ蛋白表达量最高，占细胞裂解物上清的５．１９％，相当于１４．７μｇ／１０６细胞，接近杆状病毒的表达产量。重组蛋白主要为ｐ５５ｇａｇ蛋白前体，但也有一部分被加工，生成成熟蛋白ｐ２４ｇａｇ、ｐ１７ｇａｇ及其中间蛋白。表达的重组蛋白可形成病毒样粒子（ＶＬＰ），并可诱导小鼠产生抗Ｇａｇ蛋白抗体     

以GIS为基础的禽流感预测预警研究进展

GIS是一种对地理环境等方面数据进行储存、分析、加工和呈现的综合工具。利用GIS可以把流感病例的相关数据与气候、环境和社会等数据进行整合和分析,通过统计学或数学模型,找到影响流感发生和传播的风险因素,对流感的发生趋势进行预测和可视化预警。国内外学者利用GIS在禽流感风险因素分析和预测等方面做了大量研究,包括对人感染H7N9流感、高致病性H5亚型禽流感、野禽流感风险因素和预测的研究,不同基因型病毒分布特征的研究,兽医决策辅助应用研究等。这些研究对指导兽医流行病学研究人员将GIS更好地应用于禽流感防控具有帮助意义。     

重组伪狂犬病病毒SA215(C)株的构建及其对小鼠的免疫原性

为了研制猪2型圆环病毒（PCV2）基因工程疫苗,以伪狂犬病病毒（PRV）基因缺失疫苗株SA215为病毒载体,通过同源重组,构建了共表达PCV2ORF2基因和绿色荧光蛋白基因重组伪狂犬病病毒SA215（C）株。经PCR、Southern blotting、Western blotting等证实SA215（C）构建正确,并能表达具有活性的ORF2基因蛋白和荧光蛋白。SA215（C）在IBRS-2、ST细胞中的增殖滴度与亲本株SA215相比无显著差异,表明外源基因的插入不影响病毒增殖。用SA215（C）免疫BALB/c小鼠10周后检测免疫小鼠PCV2抗体和PRV中和抗体及细胞免疫反应。结果显示,SA215（C）诱导小鼠产生了PCV2和PRV抗体并出现PCV2的细胞免疫反应。另外,以105TCID50的SA215（C）株接种BALB/c小鼠,接种后28d再接种1次,2次接种后2周,用107TCID50PRVFa和PCV2强毒联合进行攻击,结果免疫小鼠抵抗住强毒的攻击,获得了保护;表明该毒株具有很强的免疫原性,为研制安全、有效的PCV2-PRV二价基因工程疫苗奠定了基础。     

聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳分离奶牛血清碱性磷酸酶同功酶及鉴定组织来源

用聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳分离黑白花奶牛血清AKP同功酶酶谱及鉴定其组织来源。健康牛血清有5条酶带,以其泳动速率分为快(SF)、慢-1、慢-2、慢-3和慢-4(SS-1～4)。所有血清中除有主带SF和SS-1外,尚有1～3条慢带。骨只有一条泳动速率与血清主带SS-1相同的带,被认为是SS-1的来源。肝有2条泳动较快的带(LF-1和LF-2)和一条慢带LS。其中LF-1为窄的黄带,血清无对应带;LF-2与血清主带SF相对应,为SF的来源;LS为一条与SS-1相对应的浅而宽的带,为血液污染所致。小肠有3条窄的快带(IF-1～3)和一条宽的慢带(IS),慢带与比它稍快的骨带有部分重合出现于部分血清中,而3条快带未在血清出现。各种组织的AKP有不同的热稳定性。总之,血清主带SF和SS-1分别来源于肝和骨,SS-2来源于小肠,SS-3和SS-4在所分析的组织中无相应酶带。本研究较详细地描述了一种被改进的电泳方法,使其易于应用。     

Effects of formulating growing pig diet with increasing levels of wheat‐corn distillers dried grains with solubles on digestible nutrient basis on growth performance and nutrient digestibility

Formulating swine diets containing fibrous coproducts based on net energy (NE) and standardized ileal digestible amino acid (SID AA) values is recommended for optimizing pig performance. However, the effects of applying this approach to diets with increasing dietary levels of wheat‐corn‐derived distillers dried grains with soluble (wcDDGS) on pig performance have not been evaluated. Thus, 48 pigs with an average body weight [BW] of 25.5 kg were used to determine the effects of increasing wcDDGS (1:1 wheat to corn ratio) content in grower diets on performance and apparent total tract digestibility (ATTD) of energy and nutrients. Pigs were housed in pens of either 2 barrows or gilts balanced for BW and fed 4 diets within sex for 42 days. Diets were a nutrient adequate corn–barley–soybean meal‐based diet with 0%, 10%, 20% and 30% wcDDGS, and were similar in calculated NE and SID AA values. Acid insoluble ash was used as the indigestible marker. Final BW and overall average daily gain (ADG) linearly decreased (p < 0.05) and feed efficiency tended to decrease (p = 0.07) with increased dietary wcDDGS. Overall average daily feed intake was not affected (p > 0.10) by dietary treatment. The ATTD of dry matter and energy linearly decreased (p < 0.01), whereas the ATTD of neutral detergent fibre linearly increased (p < 0.01) with increasing dietary level of wcDDGS. Increasing dietary wcDDGS content did not affect (p > 0.10) ATTD of Ca and P. In conclusion, increasing dietary wcDDGS content reduced growth performance and ATTD of energy in growing pigs. Thus, the risks of high dietary wcDGGS content may not be completely alleviated by formulating growing pig diets on the basis of NE and SID AA systems.     

紫花苜蓿9个盐响应相关基因表达模式

紫花苜蓿(Medicago sativa)是世界上种植面积最大、应用最广泛的豆科牧草。由于其耐盐性中等,其在我国北方地区的产量和种植受到土壤盐渍化的限制。因此提高紫花苜蓿的耐盐性具有重要的科学和生产意义。为此,以龙牧801紫花苜蓿(M.sativa‘Longmu 801’)为试验材料,采用实时荧光定量PCR技术分析了不同浓度NaCl胁迫下9个盐胁迫蛋白质组筛选出的盐响应相关基因的表达模式。结果显示,处理时间和处理浓度对9个基因的相对表达量均有显著性影响,表明这9个基因均在紫花苜蓿盐胁迫应答中发挥着一定作用。处理1h时,G6PI、ABP19a、Trx-h1、PR bet 1、FBPA、6PGDH和ALDH这7个基因的相对表达量在不同NaCl胁迫浓度处理的紫花苜蓿中均显著上调,RRM和GDPD在NaCl处理2h后开始上调。除G6PI基因,其他8个基因在0.4%NaCl处理下相对表达量显著高于0.2%和0.8%NaCl处理。这些基因参与糖代谢、信号转导和胁迫响应。以上结果表明,紫花苜蓿的耐盐性极其复杂,涉及到多基因的表达和代谢通路的调控。研究结果有助于全面研究并了解紫花苜蓿的盐响应相关基因的表达模式,促进紫花苜蓿耐盐分子育种。     

湖南省新化县高风险区羊布鲁氏菌病横断面研究及活羊流通网络调查

湖南省新化县近几年动物布鲁氏菌病疫情和人间病例不断增多。为掌握新化县羊群布鲁氏菌病的群体流行率,了解饲养场户、贩运户和经销商对该病的知晓情况以及羊贩运户和经销商的一般经济行为,寻找养殖环节中导致布鲁氏菌感染的风险因素,应用流行病学方法,以新化县10个乡镇现存栏羊15只以上的养殖场户为研究对象,第一阶段以场户为单位,以估计流行率为目的,以名单为抽样框,随机抽样;第二阶段在群内选择个体,以发现疫病为目的,随机或基于风险采样。将采集的血清样品,采用虎红平板凝集和竞争酶联免疫吸附垂直试验进行检测。重点调查出现动物布鲁氏菌病疫情和人间病例乡镇的养殖场,以及活羊贩运经纪人和经销商等从业人员,掌握羊群布鲁氏菌病流行情况和活羊流通情况。调查结果显示:新化县高风险区存栏羊15只以上养殖场户的羊布鲁氏菌病流行率为0(95%CI:0～2.8%);新化县羊养殖场户以小规模自繁自养为主,一般放牧于自家附近山头;出栏羊主要在县内流通,养殖场户内生物安全防护措施不到位;养殖场户的布鲁氏菌病总体知晓率为80.6%,屠宰零售商为15.2%,贩运经纪人为25.0%,职业人群自我防护差;活羊调入以省外为主,冬季调运频繁,主要流向屠宰终端,经纪人在流通环节中充当重要角色。调查结果提示:应加强活羊流通领域的检疫监管,特别是冬季,要提高监测频次;当地需坚持实行"监测+扑杀"的综合防控策略,持续开展布鲁氏菌病相关的健康宣教和行为干预,重点针对屠宰经销商和经纪人,以提高职业人群的预防意识,培养其良好的职业行为和习惯。本研究为新化县布鲁氏菌病防控提供了依据,也为全国布鲁氏菌病防控积累了经验。     

用忠诚擦亮警徽——记深圳市公安局刑警支队警犬队队长吴世林

他——挚爱警犬事业,挚爱着警犬队说到吴世林,整个刑警支队是无人不知,无人不晓。领导说:“他是个雷厉风行、办事严谨、闲不住的大忙人。”民警说:“他是个没有假日的好民警。”妻子说:“他从当兵到当警察20多年来没有真正与家人逛过街。”的确,吴世林是个出了名的“工作狂”,20多年来,他刻苦钻研警犬业务知识,精益求精。他曾说:“只要一天没见犬心里就痒痒,3天不牵犬则手痒痒了”。似乎只有在训练场上,吴世林才能找到人生最大的乐趣。