2019—2021年我国部分地区PRRSV ORF5基因遗传变异分析

为了解2019—2022年我国南方地区猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒（PRRSV）ORF5基因遗传变异情况,自广东、广西、湖南、江西4个省份的种猪场和育肥场,采集疑似PRRSV感染样品进行RT-PCR检测,并对部分阳性样品进行病毒分离培养和ORF5基因测序。结果显示：PRRSV总检出率为26.12%,其中育肥场场检出率（86.36%）高于种猪场（52.00%）;共成功分离到97株病毒并对其进行了ORF5测序分析,发现Sublineage 1.8占比最高（51.55%）,其次为Lineage 5(15.46%),Sublineage 1.5、Lineage 8、Lineage 3占比依次为13.40%、10.31%和9.28%;类NADC34毒株在2021年有3个省份（广东、广西和湖南）被首次检出,且当年检出率达13.40%。GP5蛋白分析结果显示,分离株中第13和151位氨基酸以及中和表位变异较多。对其中1株毒株进行重组分析发现,该毒株以类NADC30毒株为主要亲本,其多处基因组与JXA1和IA2014毒株发生了重组。结果表明：我国南方地区PRRSV流行较为普遍,尤其是在育肥猪群中;流行毒...     

4种狂犬病病毒ELISA抗体检测试剂盒的评价

为评价国产狂犬病病毒ELISA抗体检测试剂盒的性能,选择4种国产品牌ELISA抗体检测试剂盒,分别检测463份已用荧光抗体病毒中和试验（FAVN）测知狂犬病病毒抗体效价的犬血清,用Kappa检验和配对卡方检验评价ELISA试剂盒与FAVN检测结果的一致性和差异性,计算ELISA试剂盒的诊断敏感性、诊断特异性、符合率和重复性等,并比较4种试剂盒的使用范围、样品稀释倍数等参数。结果显示：经Kappa检验,4种试剂盒与FAVN一致性均为弱;经配对卡方检验,A、B试剂盒与FAVN检测结果的差异不显著（P> 0.05）,而C、D试剂盒差异显著（P <0.05）。诊断敏感性,D试剂盒最高,B试剂盒最低;4种试剂盒诊断特异性均较低,为29.5%～57.7%;各试剂盒符合率相当,为71.3%～72.8%。综合敏感性、特异性、重复性等考量因素,得出C试剂盒更能满足免疫后抗体检测需求,A试剂盒也较好,两者可作为候选试剂盒。结果表明,4种国产狂犬病病毒ELISA试剂盒的诊断敏感性、诊断特异性、批间稳定性等性能需进一步提高,以满足基层免疫抗体监测需求。     

条件性敲除D1133L基因的重组非洲猪瘟病毒的构建及增殖特性

前期研究初步表明非洲猪瘟病毒(ASFV)编码的D1133L基因对ASFV复制至关重要,本研究拟进一步探究D1133L在ASFV复制中的作用。利用同源重组技术结合大肠杆菌lac阻遏操作系统实现条件性敲除D1133L基因,以pUC118为骨架重组转移载体ASFVΔi130,将重组转移载体转染骨髓源巨噬细胞(BMDMs),以ASFV CN/GS/2018为亲本毒株感染BMDM,在β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)存在的条件下,经绿色荧光和PCR鉴定,获得条件性敲除D1133L重组毒株vD1133Li。利用荧光显微镜观察该重组毒株与亲本毒株在猪肺泡巨噬细胞(PAMs)中的复制差异,利用qPCR技术比较重组病毒与亲本毒株的复制差异,分析vD1133Li在无IPTG情况下回补D1133L蛋白后与在IPTG诱导情况下的复制差异。结果显示：本研究成功构建了条件性敲除D1133L的ASFV重组病毒vD1133Li,重组毒株不表达D1133L,在IPTG诱导下复制能力显著低于亲本毒株;在稳定表达D1133L的MA-104细胞系中,vD1133Li复制能力恢复。综上所述,D1133L基因对于ASFV复制至关重...     

应用ELISA检测绵羊抗东毕吸虫抗体

用东毕吸虫成虫,经葡聚糖凝胶G—100层析柱制备纯化抗原,应用ELISA间接法检测自然感染东毕吸虫绵羊的抗体,同时,配合沉淀法、孵化法和全身剖检法进行检查,显示阳性符合率为98.4％,阴性符合率为95％;除与肝片吸虫阳性血清有4.8%的交叉反应外,未发现与矛形双腔吸虫阳性血清和前后盘吸虫阳性血清有交叉反应;ELISA的阳性检出率高于沉淀法和孵化法;并证明东毕吸虫感染强度与血清抗体无相关关系。     

1日龄火鸡新城疫LaSota苗与灭活苗联合接种后的免疫应答

火鸡１日龄时用新城疫ＬａＳｏｔａ苗与油乳剂灭活苗联合免疫后，在７、１４、２１、３５日龄及攻毒后，检测了火鸡免疫器官组织法氏囊、胸腺、脾脏、盲肠扁桃体、哈德尔腺中浆细胞、ＴＡＮＡＥ＋＿数量变化。结果表明：免疫火鸡法氏囊、脾脏、盲肠扁桃体、哈德尔腺的浆细胞明显增多，机体体液免疫应答显著增强；胸腺、脾脏、盲肠扁桃体、哈德尔腺中ＴＡＮＡＥ＋也程度不同地增多，细胞免疫应答也明显增强，免疫后６０ｄ，用新城疫苗强毒攻击，免疫火鸡获得了良好的保护。     

ZIKA种母兔饲粮适宜营养水平的研究

连续三年在相同的繁殖季节，使用齐卡Ｎ系母兔１４８只，分别观察测定了四种不同营养水平组合日粮对不同繁殖状态母兔繁殖能力的影响。结果表明：在延期繁殖（母兔断奶后再配种）条件下，不同能量、蛋白水平对母兔繁殖性能的影响差异不显著（Ｐ＞０。０５），但中能高蛋白（ＤＥ１０．８８兆焦／公斤、ＣＰ１９％）的第３组日粮略胜于其它组合。由此得出，在引延期繁殖的ＺＩＫＡ能繁母兔，适宜的营养水平为：消化能（ＤＥ）１０兆焦／公斤，粗蛋白（ＣＰ）１９％，粗纤维（ＣＦ）１０％。在母兔进行半频密繁殖（母兔产后第１４天开始配种）情况下，高能高蛋白（ＣＤＥ１２．１３兆焦／公斤、ＣＰ１９％）饲粮对提高繁殖性能的效果明显优于高能低蛋（ＤＥ１２．１３兆焦／公斤，ＣＰ１５％）和低能低蛋白（ＤＥ１０．８８兆焦／公斤）和ＣＰ１５％）饲粮（Ｐ＜０．０５），尤其对提高母兔泌乳力效果明显（Ｐ＜０；０１），因此，实行频密（产后立即配种）或半频密繁殖的母兔，适宜营养水平为消化能１２兆焦繁殖的母兔，适宜营养水平为消化能１２兆焦／公斤，粗蛋白１９％，粗纤维９－１２％．     

Nine-month evaluation of dogs after open-heart surgical removal of heartworms

Adult heartworms were surgically removed from 4 infected dogs by use of intracardiac techniques during cardiopulmonary bypass. The number of worms removed ranged from 12 to 14 per dog. Observation for 9 months after surgery gave no clinical evidence of active adult heartworm infection, in spite of the consistent finding of circulating microfilariae during the follow-up period. There were no significant early or late postoperative complications. Results of postoperative hematologic and biochemical studies were unremarkable. At necropsy (following euthanasia, 9 months after surgery) the heart and pulmonary arteries of all dogs were free of adult heartworms; pathologic changes attributable to residual infection were not found.