蛋氨酸缺乏对蛋鸡产蛋后期生产性能、血清游离氨基酸含量和肝脏蛋氨酸代谢相关基因表达的影响

本试验旨在研究蛋氨酸缺乏对蛋鸡产蛋后期生产性能、血清游离氨基酸含量和肝脏蛋氨酸代谢相关酶基因表达的影响。选取180只62周龄的海兰灰蛋鸡,根据产蛋率均匀分成3组(每组6个重复,每个重复10只):对照组饲喂蛋氨酸水平为0.33%的饲粮,蛋氨酸缺乏组分别饲喂蛋氨酸水平为0.21%和0.27%的饲粮,试验期90d。结果表明:1)饲粮蛋氨酸缺乏显著降低了蛋鸡的平均日采食量、产蛋率、平均日产蛋重、平均蛋重和不合格蛋率(P0.05),显著提高了料蛋比(P0.05)。2)蛋氨酸缺乏显著降低蛋鸡血清中蛋氨酸的含量(P0.05)。0.21%蛋氨酸组蛋鸡血清中丝氨酸、甘氨酸和丙氨酸的含量显著高于其他2组(P0.05)。0.27%蛋氨酸组蛋鸡血清中缬氨酸、异亮氨酸和精氨酸的含量显著低于对照组(P0.05),脯氨酸的含量显著低于0.21%蛋氨酸组(P0.05)。3)与对照组相比,0.21%蛋氨酸组蛋鸡肝脏中DNA甲基转移酶1、N6-甲基腺苷(m6 A)甲基转移酶3(METTL3)和m6 A甲基转移酶14的表达量显著提高(P0.05),0.27%蛋氨酸组蛋鸡肝脏中METTL3的表达量显著提高(P0.05)。4)与对照组相比,0.21%蛋氨酸组蛋鸡肝脏中甲硫氨酸腺苷转移酶1a、5-甲基四氢叶酸-同型半胱氨酸甲基转移酶(MTR)和胱硫醚-β-合成酶的表达量显著提高(P0.05),0.27%蛋氨酸组蛋鸡肝脏中MTR的表达量显著提高(P0.05)。蛋氨酸缺乏对蛋鸡肝脏甲硫氨酸腺苷高半胱氨酸酶和甜菜碱高半胱氨酸甲基转移酶的表达量无显著影响(P0.05)。由以上结果可知:蛋鸡饲粮高水平的蛋氨酸缺乏会降低蛋鸡的生产性能,可能与蛋氨酸缺乏改变蛋氨酸代谢途径,影响DNA和RNA的甲基化过程有关。     

蛇钩口线虫长沙分离株ITS基因的克隆及序列分析

为研究蛇钩口线虫长沙分离株的核糖体DNA (rDNA)内转录间隔区(ITS)序列的遗传变异情况,并利用ITS序列构建蛇钩口线虫与其它线虫的种群遗传关系,本研究利用PCR扩增蛇钩口线虫rDNA的ITS片段,并克隆至pGEM-T载体中进行序列测定及分析.结果显示,长沙市各分离株的ITS序列长度均为734 bp,与其它线虫的同源性均低于83.9％,而与十二指肠钩口线虫的同源性较高.本研究为蛇钩口线虫的分类鉴定以及进一步的分子流行病学调查和群体遗传研究奠定了基础.     

SMD残留检测的ELISA方法的建立和初步应用

用戊二醛法将SMD与载体蛋白BSA偶联 ,制备合成抗原SMD BSA作免疫原 ,同法合成包被抗原SMD OVA ,免疫健康家兔获得抗血清。分别用双向琼脂扩散试验和ELISA试验对抗血清进行定性定量测定 ,结果表明所获抗血清特异性针对SMD。用所制备的抗血清建立间接竞争ELISA方法。优化了ELISA的工作条件 ,方阵测定确定了包被抗原最佳浓度 (50 μg/mL) ,抗血清最佳稀释度 (1∶1 0 0 ) ,酶标抗体的最适工作稀释度 (1∶50 0 ) ,并建立了ELISA标准工作曲线。工作曲线表明在 1 0～ 2 0 0 0 μg/L浓度范围内呈良好的线性关系。该法检测底限为 63μg/L,低于国际规定残留限量 (1 0 0 μg/kg)和国内规定残留限量 (30 0 μg/kg)的要求。本法同时测定了回收率以及实际样品血清中的SMD的残留含量     

黄花菜胚囊受精前后的超微结构观察

 应用透射电镜技术研究黄花菜（Hemerocallis citrine Baroni）助细胞、卵细胞、中央细胞、 合子与初生胚乳核的超微结构特征。结果如下：助细胞有高度发达的丝状器;一个助细胞在花粉管进入 后退化;宿存助细胞在合子期退化。受精前,卵细胞、助细胞合点端无壁,细胞膜完整;受精后,合子 被完整的细胞壁包围。受精前超微结构特征显示卵细胞代谢活动低,合子期的代谢活性被激活;中央细 胞、初生胚乳核代谢活性较高。卵细胞质中的精核由双层核膜包被,染色质高度凝聚,核孔数少。助细 胞、卵细胞、中央细胞缺乏中央大液泡是黄花菜成熟胚囊的显著特征。     

氮素水平对科尔沁沙地羊草叶片氮代谢及产量的影响

合理的施氮量可以提高羊草氮素代谢关键酶活性,促进羊草氮素积累和利用,进而获得高产.为确定科尔沁沙地羊草适宜施氮量及其促高产的生理机制,采用随机区组设计,选取两块样地分别追施0、50、100、150、200 kg/hm2氮肥(纯N),分别用No、N1、N2、N3、N4表示,5月20日测定羊草叶片氮代谢相关酶活性及含氮物质含量,7月10日测定羊草产量.结果 表明:羊草产量、硝酸还原酶(NR)、谷氨酰胺合成酶(GS)、谷氨酸草酰乙酸转氨酶(GOT)、谷氨酸丙酮酸转氨酶(GPT)活性和游离氨基酸(AA)、可溶性蛋白(SP)含量均随施氮量的增加而呈现先增加后降低的变化趋势,其中NR、GS、GOT、GPT活性和AA含量在N3水平下达到最大值;羊草产量和可溶性蛋白含量在N2水平下达到最大值.结论:在科尔沁沙地生境下追施150 kg/hm2氮肥(纯N)羊草叶片的氮素代谢能力最强,最有利于羊草干物质产量的积累.     

PERK signal pathway is involved in hypoxia-induced endoplasmic reti-culum stress and apoptosis in cultured cardiac myocytes

AIM:To investigate the role of endoplasmic reticulum(ER) stress in the process of hypoxia-induced neonatal rat myocardial injury through PERK signal pathway. METHODS:Neonatal rat cardiac myocytes were randomly divided into control group and hypoxia 1 h, 4 h, 8 h, 12 h and 24 h groups. Cell viability was evaluated by determining the intracellular content of ATP. Apoptosis was measured by high-content analysis(HCA) cell imaging system. The protein levels of GRP78, calreticulin, p-PERK, p-eIF2α, ATF4 and CHOP were detected by Western blotting at different time points. The primary cultured neonatal rat cardiac myocytes were treated with an agonist of PERK pathway salubrinal and the cell apoptosis was observed under hypoxia. RESULTS:In the early phase, hypoxia induced an increase in the expression of calreticulin and GPR78. In the middle phase of hypoxia, the levels of p-PERK, p-eIF2α and ATF4 were increased. In the later phase of hypoxia, increased CHOP level was also observed. Salubrinal effectively protected the cardiac myocytes from hypoxic injury. CONCLUSION:Hypoxia activates ER stress in cardiac myocytes and also activates PERK signal pathway. PERK signaling protects cardiac myocytes from hypoxic damage in the early stage and triggers apoptosis of the cells in the later phase.     

猪流行性腹泻病毒N蛋白核仁定位信号对宿主细胞周期的影响

为研究猪流行性腹泻病毒(PEDV)核衣壳蛋白(N)与宿主细胞相互作用,本研究根据前期已经鉴定的PEDV N蛋白核仁定位信号序列,利用重叠延伸PCR(SOE-PCR)方法扩增出核仁定位信号序列缺失的PEDV N基因(dN),并将其与真核表达载体pAc-GFP-C1连接,构建重组质粒pAc-GFP-dN。将pAc-GFP-dN转染于Vero E6细胞中,利用激光共聚焦显微镜分析重组质粒pAc-GFP-dN表达蛋白的定位情况,并利用流式细胞仪检测转染细胞的周期变化。实验结果表明:与完整的N蛋白相比,缺失核仁定位信号的N蛋白不能定位于细胞核仁,同时丧失了使宿主细胞周期在G2/M期停滞的能力,从而揭示了N蛋白核仁定位信号对宿主细胞具有重要的影响。     

实验室中小枕异绒螨的寄生对豆卫矛蚜存活及其繁殖的影响

小枕异绒螨Allothrombium pulvinum Ewing是我国常见的蚜虫天敌之一,在我国北京、山东、江苏、上海和安徽等地发生较多。该螨幼螨每年4—5月,广泛地寄生在蚜虫体表,吸取其体液。然而该螨寄生后对蚜虫有何影响,至今国内外尚无报道。本文以豆卫矛蚜Aphis fabae为材料,在实验室中首次观察了小枕异绒螨幼螨寄生后对寄主蚜虫的存活及繁殖的影响。结果初报如下。     

黑木耳简单快速组织分离新法

利用酒精、镊子对黑木耳耳片进行组织分离,方法方便、快捷,分离成功率100%。     

激素配比和pH值对蓝莓试管苗增殖生长的影响

该文以对土壤p H值适应性截然不同的蓝莓品种‘斯巴坦’和‘北陆’试管苗为试材,研究二者组织培养条件下对激素配比和p H值的要求。结果表明:‘斯巴坦’试管苗增殖培养基最佳激素配比为ZT0.3 mg/L+IBA 0.2 mg/L,p H值4.5;‘北陆’试管苗增殖培养基最佳激素配比ZT 0.3 mg/L+IBA 0.1 mg/L,p H值5.0。