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透明颤菌血红蛋白基因(vgb)在大肠杆菌中的高效表达 总被引:3,自引:0,他引:3
利用PCR技术将透明颠菌血红蛋白基因(vgb)克隆到融合表达载体pET28a,在大肠杆菌BL21(DE3)表达。重组蛋白在30℃诱导获得可溶表达。利用Ni^2+亲和层析对重组蛋白进行了纯化,得到重组的透明颠菌血红蛋白,蛋白呈红色。实验现象显示重组蛋白与血红索相结合。紫外光区和可见光区波长扫描分析显示:蛋白粗提物和纯化后的血红蛋白在230nm和413nm都有强吸收峰,初步表明,尽管重组蛋白比天然蛋白多36个氨基酸,重组蛋白仍然具有生理活性。诱导后4h和6h的培养液氨基乙酰丙酸含量分别达到17mg/L和21mg/L。说明重组蛋白的表达明显促进了体内heme合成途径。 相似文献
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鬼针草与含羞草化感作用及其入侵性的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
采用培养皿滤纸法研究入侵植物鬼针草与含羞草根、茎、叶浸提液对种子萌发和幼苗生长的影响,从化感角度揭示外来植物的入侵机制。结果表明:1)鬼针草根、茎、叶浸提液随浓度升高显著抑制鬼针草和含羞草种子萌发,高浓度(0.04 g·mL-1)的叶浸提液使萌发率降低了67%~87%;高浓度(0.04 g·mL-1)的含羞草叶浸提液使其种子萌发率降低了21.7%,但对鬼针草种子萌发影响较小。2)鬼针草和含羞草根长随2种植物根、茎、叶浸提液浓度的升高而降低,尤其是高浓度的叶浸提液有较强抑制效应。3)各浓度的鬼针草根、茎、叶浸提液均能降低含羞草茎长,高浓度的叶浸提液抑制效应最强;高浓度(0.04 g·mL-1)的含羞草茎和叶浸提液抑制鬼针草茎长,中等浓度(0.02~0.03 g·mL-1)的根和叶浸提液促进鬼针草茎长;含羞草各器官浸提液对其茎长的抑制作用随浓度增大略有增强。4)鬼针草各器官浸提液(尤其叶浸提液)抑制自身根冠比,促进含羞草根冠比;含羞草各器官浸提液轻微降低自身根冠比,显著降低鬼针草根冠比。5)鬼针草对自身种子萌发率、根长及根冠比的化感强度大于鬼针草他感强度;鬼针草对含羞草茎长的化感强度大于其自感强度,也大于含羞草他感强度;含羞草对鬼针草根长及根冠比的化感强度大于其自感强度,也大于鬼针草他感强度。鬼针草主要通过抑制含羞草茎长,增强入侵性,而含羞草主要通过抑制鬼针草根的生长,增大竞争力。 相似文献
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AIM:To study the role of cell membrane ectopic calreticulin (CALR) expression on the protective immunie effect of T-cell vaccine (TCV) on experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE). METHODS:EAE model was established by myelin oligodendrocyte glycoprotein 35-55 (MOG35-55) immunization in C57BL/6 mice, and the mice were immunized with MOG35-55-specific CALR+ and CALR- T-lymphocytes. Symptomatic scores were compared at the maximum of the disease. On the 15th day after immunization, the proportion of CD4+ CD25+ Foxp3+ regulatory T cells (Treg) in the spleen, and the expression of interferon-γ (IFN-γ), interleukin-4 (IL-4), IL-10 and IL-17A in the serum were measured. RESULTS:Increased expression of CALR in activated T cells after γ-irradiation was observed. Blockade of CALR on the vaccinating T-cell surface reduced the protective effect of TCV. Furthermore, blockade of CALR reduced the number of Treg in the spleen and up-regulated pro-inflammatory cytokines. CONCLUSION:CALR expression in the T cells is necessary for the protective immunity induced by TCV in EAE mice. 相似文献
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表达马立克氏病病毒CVI988/Rispens株糖蛋白B基因的重组鸡痘病毒疫苗的免疫保护研究 总被引:1,自引:0,他引:1
用鸡痘病毒载体表达马立克氏病病毒(MDV)糖蛋白B(gB)基因构建成重组鸡痘病毒(rFPV)。以MDV GA或Md5和RBIB混合攻毒,在不同品种的鸡中评价rFPV-gB/R单价苗和与火鸡疱疹病毒(HVT)组成的二价苗的免疫保护效力。试验结果表明,MDV疫苗和FPV母源抗体阴性的SPF鸡和母源抗体阳性的商品鸡中,rFDV-gB/R均能提供免疫保护作用,且其中一种商品蛋鸡中rFPV-gB/R与HVT液氮苗或HVT冻干苗结合使用,均有显著的免疫协同保护作用。免疫学研究指出,rFPV-gB/R与常规疫苗一样,可显著地降低疫苗免疫攻毒鸡的病毒血症和羽囊排毒。 相似文献
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PK15细胞是一种被广泛应用于兽用疫苗生产的细胞,然而现今生物制品行业快速发展,传统贴壁培养PK15细胞已经不能满足生产需要.目前通过全悬浮培养技术来培养细胞、病毒已经是发展趋势,但是由于生产用细胞多数为贴壁细胞,难以实现悬浮培养,所以,目前该项技术在疫苗生产上还未广泛应用,技术也还未成熟.故本文探讨PK15细胞在无血... 相似文献
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以牡丹皮等16种中草药的丙酮提取物为材料,测定了其对5种植物病原菌的生长抑制活性。结果表明:在供试质量浓度为0.05 g/mL时,牡丹皮提取物对所有供试病原菌菌丝生长抑制效果最好,除对杨树溃疡病菌菌丝生长抑制率为85.3%外,对其他植物病原菌的抑制率均为100%。高良姜提取物抑菌活性次之,对4种供试植物病原菌菌丝生长抑制率均在80%以上,对番茄灰霉病菌的抑制率最低,也达到68%。黄芩提取物对供试的3种植物病原菌的抑制率超过60%。连翘、知母、蔓荆、乳香和地榆等5种中药提取物分别对供试的5种植物病原菌中的2种有较好的抑菌活性。在供试质量浓度为0.1 g/mL时,牡丹皮、高良姜等2种中药提取物对杨树溃疡病菌孢子萌发抑制作用相当明显,抑制率均在80%以上;白花蛇舌草、乳香、川楝等3种中药提取物对杨树溃疡病菌孢子萌发抑制作用次之,抑制率均在60%以上。 相似文献
59.
对最新版本的《南京市绿地系统规划》(2013-2020)进行分析与研究,综合相关规划文件,对南京市近几年绿地规划、建设内容进行回顾与评价,总结南京市在绿地规划方面的可取与不足之处。对南京城市的历史沿革、山水格局、绿地现状、自身定位、发展趋势进行思考,结合国内政策、国外理念等因素统筹地对南京未来的绿地发展方向进行展望与研究,包括绿地宏观布局层面、中观联系层面、微观建设层面3方面。 相似文献
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Chengquan Tan Yongcheng Ji Xichen Zhao Zhongquan Xin Jiaying Li Shuangbo Huang Zhiying Cui Lijun Wen Caihua Liu Sung Woo Kim Jinping Deng Yulong Yin 《动物营养(英文)》2021,7(1):111
Increased metabolic burdens in breeding sows, which are induced by elevated systemic oxidative stress, could increase the need for nucleotides to repair lymphocyte DNA damage; however, de novo synthesis of nucleotides may be insufficient to cover this increased need. This study investigated the effects of dietary nucleotides on milk composition, oxidative stress status, and the reproductive and lactational performance of sows. Forty multiparous sows were assigned to 2 dietary treatments (Control group, and 1 g/kg Nucleotides group) based on a randomized complete block design using their BW at 85 d of gestation as a block. Sows from 2 groups were fed a restricted diet during gestation and ad libitum during lactation. The experiment lasted from 85 d of gestation to 21 d of lactation. The reproductive performance of sows and the growth performance of suckling piglets were measured. Oxidative stress parameters and milk components were also analysed. Data were analyzed using contrasts in the MIXED procedure of SAS. Sows in the Nucleotides group consumed more feed during the first week (P < 0.01) and from 1 to 21 d (P < 0.05) of lactation than those in Control group. Correspondingly, the litter weight gain of piglets showed a tendency to increase from cross-fostering to 9 d (P = 0.09) and from cross-fostering to 20 d (P = 0.10) in the Nucleotides group relative to the Control group. Additionally, the Nucleotides group was higher (P < 0.01) than the Control group in the concentrations of uridine 5''monophosphate, guanosine 5''monophosphate, inosine 5''monophosphate, adenosine 5''monophosphate and total nucleotides in milk. Furthermore, the Nucleotides group was higher (P < 0.01) than the Control group in the serum levels of total antioxidant capacity (P < 0.01) for sows at 109 d of gestation and glutathione peroxidase for weaning piglets, but lower at the levels of thiobarbituric acid-reactive substances (P < 0.05) in serum of weaning piglets. This study indicated that maternal dietary nucleotides could promote piglet growth, probably due to the higher lactational feed intake and higher concentration of nucleotides in the milk of sows, and lower oxidative stress for both sows and piglets. 相似文献