鸭DCN基因编码区扩增、序列分析及其在大肠杆菌中的表达、蛋白纯化

采用RT-PCR方法从鸭腿肌总RNA中扩增了鸭核心蛋白聚糖基因编码区序列,进行序列分析,并将编码鸭核心蛋白聚糖成熟蛋白的核酸片段连入原核表达载体pET-32a(+)中,加入IPTG诱导其表达后,亲和层析纯化表达的蛋白。采用SDS-PAGE检测,用质谱方法对表达的蛋白进行鉴定。研究成功克隆出鸭核心蛋白聚糖基因编码区序列,序列分析表明,鸭DCN编码区序列由1074个碱基组成,编码357个氨基酸,其中信号肽有16个氨基酸。将鸭DCN蛋白划分为9个结构域(LRR1-9),结合人DCN序列进行序列分析推测结构域中LRR4、5与TGF-β可能存在一定关系。SDS-PAGE检测和质谱鉴定结果表明获得了分子量为54.7ku的鸭DCN融合蛋白。     

禽流感病毒HA基因在S2细胞中的表达与鉴定

根据GenBank中发表的禽流感病毒(AIV)血凝素(HA)序列设计了1对引物并分别引入NotⅠ和NcoⅠ酶切位点,用PCR方法扩增AIV HA基因片段。回收目的基因片段,并用NotⅠ/NcoⅠ限制性内切酶消化,经纯化后,将其定向克隆入果蝇表达载体pMT/B/V5中,构建重组表达载体pMT-HA。测序验证正确后,用脂质体转染法与辅助质粒pCoBlast共转染果蝇S2细胞,通过Blasticidin(杀稻瘟素)进行加压筛选,获得了抗性细胞S2-HA。提取S2-HA细胞的基因组DNA,PCR检测目的基因在果蝇S2细胞中的整合与表达。用终浓度500μmol/L的硫酸铜溶液诱导表达,收集无血清的细胞表达上清,样品浓缩后进行SDS-PAGE及Western Blotting检测。结果表明,成功构建了重组表达载体pMT-HA,转染细胞经10 mg/L的Blasticidin筛选及鉴定后获得了稳定表达HA的果蝇S2细胞株。     

牧草种质资源繁殖更新技术规程

依照《农作物种质资源整理技术规程》,结合国家种质牧草中期库和多年生牧草圃在牧草种质资源繁殖更新技术方面取得的丰富经验,并针对存在问题制定“牧草种质资源繁殖更新技术规程”,使得牧草种质资源进行更科学的繁殖更新,为遗传完整且稳定的活种质的保存和利用提供依据。     

蛋氨酸硒和纳米硒对波尔山羊种公羔生长及血液、组织硒含量的比较

[目的]为了研究纳米硒(nano-selenium)和蛋氨酸硒(methionine-selenitim)对种公羊羔羊生长发育以及血液、组织中硒的沉积和谷胱甘肽过氧化物酶活性的影响.[方法]试验选用体重相近的30只种用波尔山羊断奶公羔随机分3组,每组10个重复,预试2周,正试12周,分别饲喂基础日粮(对照组);基础日粮+0.3 mg/kg纳米硒;基础日粮+0.3 mg/kg蛋氨酸硒(以硒浓度计算).每隔4周采血样一次,试验结束时,每组随机屠宰羔羊3只测量组织硒浓度.[结果]不同的硒源和一定浓度的硒对公羔生长发育影响不显著(P>0.05);添加蛋氨酸硒和纳米硒的公羔组织器官,血清,全血硒含量以及肝脏谷胱甘肽过氧化物酶活性显著高于对照组(P<0.05),添加组之问差异不显著.[结论]统计结果表明,纳米硒和蛋氨酸硒与对照相比都能有效地增加血液、组织中硒的沉积,添加纳米硒组羔羊硒沉积和谷胱甘肽过氧化物酶活性稍高于蛋氨酸硒组,羔羊添加纳米硒更易于硒的吸收和沉积.     

栗蚕蛹体液的一些免疫反应

为了探明栗蚕体内免疫机制,研究了栗蚕蛹体液免疫反应的某些特性。栗蚕蛹经细菌、真菌以及生理盐水诱导后,其体液对大肠杆菌(E.coli)、枯草杆菌(B.subtilis)、金黄色葡萄球菌(S.aureus)及柞蚕链球菌(T.streptoc-occus)均表现出一定的抑菌作用。大肠杆菌诱导6 h后,栗蚕蛹体液中出现抗菌活性物质,诱导后4 d,体液的抗菌活性达到高峰值,11 d后活性消失。SDS-PAGE电泳结果表明,诱导后的栗蚕蛹血淋巴中有新蛋白产生,推测可能与其产生新的抗菌活性有关。     

藏獒皮肤成纤维细胞培养与生物学特性观察

In order to study biological characteristics of Tibetan Mastiff somatic cells and preserve genetic resource, two fibroblast cell strains from Tibetan Mastiff were established by tissue culture. In vitro culture cell morphology, hyperplasia ability and some biological characteristics were researched. Tibetan Mastiff cells in vitro culture appeared typical morphology of fibroblast cells, grew well and had strong hyperplasia ability. Population doubling time of the cells was 46.1 h. Vimentin expression in the cells was confirmed by immunofluorescence staining. The rate of F5 cells with normal diploidy (2n=78) was 91.4%. Moreover, longer X chromosome belonged to submetacentric chromosome, but Y chromosome did telocentric chromosome. Tibetan Mastiff cell strains eslablished in the study offered the materials for the Tibetan Mastiff somatic cell nuclear transfer research.     

栀子、龙胆、茵陈水煎剂对獭兔胆汁分泌和胆囊平滑肌运动调节研究

为了研究栀子、龙胆、茵陈水煎剂对獭兔胆汁分泌和离体胆囊平滑肌肌条运动的影响,通过对獭兔实施胆管插管术,建立胆汁引流模型,应用 BL-420E 生物机能实验系统观察记录上述中药对胆汁分泌的影响;并取獭兔胆囊平滑肌,应用 HW-400S 恒温平滑肌槽和 BL-420E 生物机能实验系统,观察记录上述中药对胆囊平滑肌运动的影响。结果显示,栀子水煎剂可显著增加胆汁的分泌（P ＜0．05）和胆囊平滑肌收缩张力（P ＜0．05）;龙胆和茵陈水煎剂可显著增加胆汁的分泌（P ＜0．05）,但对胆囊平滑肌收缩张力作用不显著（P ＞0．05）。说明栀子、龙胆、茵陈水煎剂均可促进獭兔胆汁分泌,且栀子可提高胆囊平滑肌收缩张力,但龙胆、茵陈水煎剂对胆囊平滑肌收缩张力影响不显著。     

复杂盐碱条件对星星草种子萌发的影响

将2种中性盐NaCl、Na2SO4及2种碱性盐Na2CO3、NaHCO3按不同比例混合。模拟出24种盐度和碱度各不相同的复杂盐碱条件,并用以处理星星草种子,测定其发芽率、发芽势。结果表明,不同碱度的盐分组成对星星草种子萌发的影响基本一致,即均随着盐浓度的增高发芽延迟,发芽率降低,而且均在盐浓度超过300 mmol/L时发芽率降至零。对各胁迫因素与发芽率之间进行统计学分析,结果表明,盐浓度是影响星星草种子萌发的决定性因素,其他因素的作用很小。本实验结果表明,吸水是决定星星草种子萌动与否的关键,由于盐浓度决定水势进而决定种子吸水,所以盐浓度表现为影响种子萌发的关键因素。由于pH值、缓冲量等代表碱度的指标与水势没有直接关系,所以对星星草种子萌动阶段没有决定性影响。     

双创背景下家禽生产学实验教学改革探索

在“大众创业、万众创新”的时代背景下,以“培养具有创新精神和创造能力的人才”作为指导思想,以创新创业能力培养为导向,开展家禽生产学实验教学改革,提高地方高校动物科学专业本科生的创新创业能力。对家禽生产学实验教学课程分别从教学内容、教学模式、考核方法三个方面进行优化改革,以便更好地培养高质量的双创人才。     

贝尼尔脂质体和贝尼尔注射剂的急性毒性比较试验

我们试制了贝尼尔脂质体 ,并对其和贝尼尔注射剂进行了小鼠的急性毒性比较试验 ,试验结果表明 ,贝尼尔脂质体的毒副作用显著低于贝尼尔注射剂 ,脂质体组的 L D50 (177.83mg/ kg· bw)显著高于原药组 L D50(74.14m g/ kg· bw) ,是原药组的 2 .40倍。说明贝尼尔制成脂质体后 ,可以显著降低药物毒副作用 ,增加用药的安全性