抗体信号肽基因的克隆和序列测定及真核表达载体的构建

根据抗体重链与轻链基因的核苷酸序列设计并合成了1对引物,以猪外周血淋巴细胞基因组mRNA为模板,通过RT_PCR方法获得了一大小约85bp的DNA片段,并将其克隆到pGEM_T载体上进行序列测定,测序结果显示,猪抗体信号肽基因核苷酸序列长度为57bp,编码19个氨基酸,核苷酸及推导的氨基酸序列与已发表的抗体信号肽基因序列一致,同时在信号肽基因3’端下游提供可供肽酶切割的窗口和外源基因的克隆位点。然后将信号肽基因亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1( )中,成功构建了一含信号肽序列的真核表达载体3.1_SFc,为外源基因在pcDNA3.1( )中的表达与分泌提供了一有效的信号肽,也为研究基因的功能奠定了基础。     

黄单胞菌α-淀粉酶基因的克隆、测序及表达探讨

用鸟枪法构建了野油菜黄单胞茵(Xanthomonas campestris pv．campestris)8004的基因组文库,经LBSP法筛选,得到了含α-淀粉酶基因的基因片段,SDS-PAGE凝胶电泳确定其蛋白质分子量约为45kd;经测序后,分析其序列结构并翻译成氨基酸序列．     

Molecular mechanism of miR-1246 enhancing radiosensitivity of cervical cancer cells

AIM: To investigate the molecular mechanism of microRNA-1246(miR-1246) enhancing radiosensitivity of cervical cancer cells. METHODS: Cervical cancer lines HeLa, CaSki, C33A and SiHa were transfected with miR-1246 mimic and negative control mimic (NC-mimic) using Lipofectamine 2000 kit, and the expression level of miR-1246 in cervical cancer tissue, normal tissue, cervical cancer cell lines and endometrial epithelium cell line ESC was detected by real-time PCR. The transfected cells were exposed to X-ray radiation. The cell viability and migration rate were measured respectively by MTT assay and Transwell method. The protein levels of γH2AX, ATM, p-ATM and p-p53 were monitored by immunofluorescence and Western blot. RESUITS: Higher miR-1246 level was found in normal tissue and ESC cells, while lower miR-1246 level was found in HeLa, SiHa, C33A and Caski cells and cervical cancer tissues. The expression level of miR-1246 in the cells transfected with miR-1246 mimic was significantly higher than that in the cells transfected with NC-mimic (P<0.05). The cell viability and migration rate of the cervical cancer cells with miR-1246 over-expression were notably lower than those of the cells transfected with NC-mimic (P<0.05) under the same conditions. The results of immunofluorescence indicated that the protein expression level of γH2AX significantly increased in the cervical cancer cells with miR-1246 over-expression exposed to radiation compared with the negative control (P<0.05). The protein expression level of γH2AX was significantly increased in the cervical cancer cells with miR-1246 over-expression, while the protein levels of p-ATM and p-p53 were significantly decreased as compared with the negative control group (P<0.05). CONCLUSION: miR-1246 is highly expressed in normal tissue and normal endometrial epithelial cells, while is low expressed in the cervical cancer tissues or cells. miR-1246 over-expression inhibits growth and migration, and significantly enhances radiosensitivity of cervical cancer cells. The molecular mechanism is possibly related to inhibiting ATM pathway and DNA damage repair.     

辣椒炭疽病抗性资源筛选

调查了46份辣椒(Capsicum annuum L.)材料对辣椒炭疽病(Collectotrichum sp.)的田间抗性表现.结果表明,19份材料对辣椒炭疽病有较强的抗性.以成都及近郊县的主要致病菌胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)为接种菌源,采用针刺接种法对绿色成熟果(青熟果)和红色成熟果(红熟果)的23份辣椒资源进行辣椒炭疽病抗性筛选.结果表明,9份材料表现为抗病,6份材料表现为耐病,8份材料表现为感病.室内抗性筛选结果与田间抗性表现基本一致.     

甄别湖北省低碳农业发展现状的实证分析

根据湖北省1980～2009年样本数据,将农业总产值指数对农业机械总动力、化肥施用量、大牲畜存栏头数、生猪存栏头数和造林面积等进行回归分析,其中,造林面积用于表征“低碳”,其余解释变量代表“高碳”,以此甄别湖北省低碳农业发展现状.结果表明,仅农业机械总动力和化肥施用量对农业总产值指数有显著影响,说明湖北省农业仍处于“高碳”发展路径,低碳农业有着广阔的发展空间.计算了两个主要因素对农业总产值的贡献率后,提出了湖北省发展低碳农业的前景方略.     

盐胁迫浓度和胁迫时的温度对水稻耐盐性的影响

 在水培条件下，用5种不同浓度的NaCl溶液对20个水稻品种的3~4叶期幼苗进行盐胁迫处理，10 d后考查不同品种单株盐害级别、苗高、茎叶干重和根系Na[sup]+[/sup]/K[sup]+[/sup]含量比等性状。结果表明，0.5%的NaCl胁迫下，品种间的盐害级别和根系Na[sup]+[/sup]/K[sup]+[/sup]含量比差异最大；0.8%的NaCl胁迫下，品种间的相对苗高和相对茎叶干重差异最大。其中韭菜青、农林72、80 85、洞庭晚籼和丁旭稻为强耐盐水稻品种；Pokkali、IR26、小白芒、勐旺谷、明恢63为耐盐或中度耐盐品种。进一步选择8个耐盐性不同的水稻品种，在3种温度条件下进行苗期耐盐性鉴定，发现在相对低温[昼/夜为(23±3)℃/(15±1)℃\]时，水稻生长缓慢，不同品种的盐害级别和根系Na[sup]+[/sup]/K[sup]+[/sup]含量比均较低；在温度较高[昼/夜为(36±1)℃/(26±2)℃\]时，水稻生长加快，不同品种的盐害级别和根系Na[sup]+[/sup]/K[sup]+[/sup]含量比均增高；只有在适温条件[昼/夜为(30±2)℃/(24±2)℃\]下，水稻生长较快，品种间的盐害级别和根系Na[sup]+[/sup]/K[sup]+[/sup]含量比差别最明显。提出在适温条件下，以0.5%或0.8%的NaCl浓度进行水稻品种耐盐性的筛选和耐盐特性的遗传研究比较合适。     

不同群体山女鳟及其杂交F1的生产性能比较

本文系统研究了我国引进的两个山女鳟（Oncorhynchusmasoumazou）群体及其杂交F1代的生产性能。结果表明,（1）两个杂交组合的早期生产性能,如授精率、发眼率和孵化率等不存在显著优势,自交组合BH08♀×BH08♂的最终成活率为63．37％,远低于其他三组的成活率（P〈0．01）;（2）378d的生长对比试验表明,杂交组合与自交组合的体质量、绝对增重率、特定生长率和肥满度等存在一定差异,养殖时间对这些指标的影响达到极显著水平（P〈0．01）,但组间差异仅为显著水平（P〈0．05）或没有差异（P〉0．05）;（3）378d的生长对比试验结束时,两个杂交组合均表现出一定的杂种优势。方差分析表明,不同生长阶段对杂交组合杂种优势率的影响极显著（P〈0．01）,不同组合间的杂种优势率也存在极显著差异（P〈0．01）。     

黑斑狗鱼胚胎发育的研究

采用活体观察和固定观察两种方法,系统观察和详述了黑斑狗鱼Esox reichrti的胚胎发育过程及各时期的特点。结果表明:黑斑狗鱼成熟卵为圆球形,呈淡黄色,略透明,沉粘性,卵膜较薄,略有弹性,卵径为2.49±0.09 mm;在水温6~10℃下,受精卵历经529 h孵出,整个发育期间所需的积温为4511.5℃·h,约合188℃·d。黑斑狗鱼胚胎发育过程可分为6个阶段,即受精卵、卵裂、囊胚、原肠胚、神经胚,和器官形成阶段,各阶段发育所需积温分别为60.5℃·h、125℃·h、572℃·h、180℃·h、477℃·h,和3097℃·h。在胚胎期间,许多器官分化形成,至孵出时,胚胎已具有较完善的内部器官,各鳍亦已形成。     

郑州城区池鹭繁殖习性观察

1999—2003年春夏季节对河南郑州城区池鹭的繁殖习性进行了观察.池鹭于每年4月下旬至9月底在城区行道树上营巢繁殖,居留期约155 d.1999—2000年,池鹭单独成群;2001年池鹭开始与夜鹭,白鹭共同形成混合集群.繁殖对数由1999年的360对下降至2003年的94对.池鹭为单配制,但有配偶外交配行为,约占交配总数的40.78%.池鹭窝卵数为4~6枚(5.10±0.57),每窝出雏数为1~6只(4.50±1.35),孵化率为88.24%,留巢期(32.7±1.059)d,雏鸟18日龄成活率为93.33%.     

丹江口水库水体三氮时空变化特征分析

根据2000—2004年监测资料,对丹江口水库库区11个监测断面进行了氨氮(NH3-N)、硝酸盐氮(NO3-N)和亚硝酸盐氮(NO2-N)时空变化特征的分析和评价.结果发现:三氮(NH3-N,NO3-N和NO2-N的总称)中对水质影响较大的为NH3-N,NO3-N影响较小,NO2-N完全符合Ⅰ类水质标准;三氮在小清河口和唐白河口断面含量较高,枯水期含量高于丰水期,其它断面则相反;以坝上断面三氮含量为例进行年内变化分析,结果表明,NH3-N在2001和2004年出现峰底,2002年枯水期值达最高,是影响水质的主要因子.