Construction of Brucella ClpS Gene Mutant Strain and Its Effect on Virulence

The present study aimed to determine the role of ClpS gene,and to analyse the impact of ClpS mutation on the virulence of Brucella.A ClpS gene mutant strain,named ΔClpS was constructed by homologous recombination technology.The bacterial growth kinetics,the LPS synthesis ability and the survival ability of bacterial within macrophages as well as the virulence in mouse model were measured.In addition,the difference between parent strain 2308 and the mutant strain ΔClpS were compared.The results showed that under the same culture conditions,no difference in bacterial concentration was observed between 2308 and ΔClpS strains.The silver staining examination showed that the expression level of LPS extracted from two strains were similar,indicating ClpS gene mutation did not alter the growth rate and LPS synthesis ability of Brucella. In the cell infection assay,the survival ability of ΔClpS strain in cells was extremely significantly lower than that of 2308 strain at 72 h after infection (P<0.01).The results of mouse infection experiment showed that in the first week after infection,no significant difference in spleen weight and bacterial concentration between 2308 and ΔClpS strains infected mice was observed.However,at 4 weeks after infection,the bacterial concentration in spleen of ΔClpS infected mice was 10^3.93 CFU/g spleen,which was significantly lower than that of 2308 strain (10^6.68 CFU/g spleen,P<0.01).The spleen weight of ΔClpS infected mice was also remarkably lower than that of 2308 strain (P<0.01).In summary,the results suggested that the ClpS gene of Brucella did not play a role in Brucella growth rate and ability of LPS synthesis,whereas ClpS gene mutation decreased the ability of Brucella colonization in mouse spleen.     

表证动物模型研究概况

中兽医对表证动物模型的研究相对起步较晚，自1992年沈映君等为研究解表方药报道建立“类表寒证”、“类表热证”动物模型以来，风寒表证、风热表证、卫气（阳）虚证等相关动物模型的研究陆续见诸报道。笔者将近10余年来表证动物模型的研究概况综述如下。     

免疫胶体金技术诊断日本血吸虫病的研究进展

血吸虫病是一种分布广泛、危害严重的人畜共患寄生虫病。近年来,日本血吸虫病在我国部分地区死灰复燃,造成具大的经济损失。国内外对该病的检测技术研究较多,目前,诊断日本血吸虫病的经典方法仍是病原学诊断。文章对胶体金标记技术的基本原理、免疫胶体金的制备方法及其在免疫诊断中的常见标记对象做了简要介绍,并对免疫胶体金技术诊断日本血吸虫病的研究状况进行了综述。     

鸭源鸡杆菌对HeLa细胞的黏附和侵袭特性

为研究鸭源鸡杆菌(G.anatis)体外黏附和侵袭细胞的能力,选择HeLa细胞为感染模型,分别以细菌黏附和侵袭HeLa细胞数量为指标,借助革兰和姬姆萨染色及电镜观察来研究2株不同来源的鸭源鸡杆菌对HeLa细胞的黏附和侵袭特性。结果显示:黏附计数表明鸭源鸡杆菌Yu-PDS-RZ-1-SLG能高水平黏附HeLa细胞,菌株感染30、60、90、120、150min后每细胞黏附的细菌数分别为0.84、4.68、8.52、9.27、8.2个,而菌株F149T对HeLa细胞有较低的黏附作用。侵袭试验表明Yu-PDS-RZ-1-SLG有低度侵袭力,侵袭的细菌数在150min时达到最大,约8.27·1 000细胞-1,随后细胞破碎,细胞逐渐脱落,而菌株F149T未检测到侵袭力。染色及电镜试验进一步证实鸭源鸡杆菌Yu-PDS-RZ-1-SLG可黏附于HeLa细胞表面并侵入细胞内部。菌株经胰蛋白酶处理后,细菌的黏附率显著降低,表明细菌的表面蛋白参与黏附。黏附和入侵特性是鸭源鸡杆菌定殖在组织表面重要的能力,该细胞模型的建立为进一步研究其致病机制提供了条件。     

向海地区绿头鸭体内1膜壳属(Hymenolepis spp.)绦虫的分离鉴定

为了对绿头鸭肠道内分离的绦虫进行种属鉴定,本试验对向海地区的10只绿头鸭小肠内分离出的3条绦虫进行了形态学和分子生物学的鉴定。经形态学观察测量发现,该绦虫为小型绦虫,全长35 mm,头节呈球形,具有4个吸盘和1个短而圆、可自由伸缩的顶突。顶突上有20～30个小钩,排成一圈。成节有3个圆球形的睾丸,横列在节片中部,储精囊较发达,符合膜壳属绦虫的形态学特征。扩增cox1基因序列并进行序列建树分析,结果支持该绦虫为膜壳属绦虫。综合该虫的形态学特征及分子生物学分析,确定该绦虫为膜壳属绦虫。     

中药添加剂对猪血清一氧化氮和内皮素-1含量的影响

研究了藿香、苍术提取物复合制剂Ⅰ和Ⅱ对高温血管活性因子NO、ET-1含量的影响.选用中国试验用小型猪32头,分为对照组和应激组.各组分别在热应激的第1、3、6、10天前腔静脉采血,测定血清中一氧化氮和内皮素-1含量的变化.结果显示:应激组一氧化氮含量呈逐渐逐渐下降趋势,在第10天显著低于对照组(P<0.05);内皮素-1含量第10天显著高于对照组(P<0.05).提取物Ⅰ组可显著降低ET-1含量(P<0.05),但对NO含量无显著影响(P>0.05),提取物Ⅱ组可显著提高NO含量(P<0.05),但对ET-1含量无显著影响(P>0.05).说明热应激条件下,一氧化氮和内皮素-1释放失衡,血管舒张作用减弱,收缩加强,不利于机体散热.提取物复合制剂Ⅰ对ET-1具有调控作用,提取物复合制剂Ⅱ对NO具有调控作用,添加中草药复合提取制剂对热应激造成的生理损伤有缓解作用.     

不同催情药物对提高母豪猪繁殖性能的影响

为探讨添加不同催情药物对豪猪产仔数、平均初生重等繁殖性能的影响。选取2岁左右、胎次及产仔数相近的母豪猪100头,随机分为5组,每组20头,分别饲喂5种不同的日粮：对照组为基础日粮,试验Ⅰ组为基础日粮＋催情散;试验Ⅱ组为基础目粮＋中草药制剂;试验Ⅲ组为基础日粮＋“牲命1号”;试验Ⅳ组为基础日粮＋胎盘,进行3个月的饲养试验,并跟踪记录受配母豪猪数、产仔母豪猪数、产仔数、平均初生重等繁殖情况。结果表明：在基础日粮中添加中草药制剂对提高豪猪繁殖率优于在日粮中添加催情散、“牲命1号”、胎盘,效果最佳。     

中国生猪健康养殖业发展的战略思考

作者在分析生猪健康养殖业发展背景的基础上,以实现动物健康、人类健康、环境健康、产业链健康为目的,从质量保障和价值保障2个方面构建了生猪健康业发展的目标体系及其实现途径,重点从技术体系、组织结构、运行机制、适度规模等方面提出了生猪健康养殖业发展的保障策略。     

江西省萍乡市某羊场布鲁菌病的流行病学分析

江西省萍乡市某山羊场妊娠母羊散发流产,为了分析该羊场流产的发生是否与布鲁菌感染有关,同时掌握该羊场布鲁菌病的流行情况,随机抽样采血共分离得到100份山羊血清,首先使用虎红平板凝集试验进行初步鉴定,然后通过试管凝集试验重新检测阳性血清。结果表明,该羊场布鲁菌病阳性率为20％。由此可以得出,该羊场的布鲁菌病防控工作存在较严重的问题,应制定有效的防治措施,将山羊布鲁菌病的检测纳入日常疾病监测工作中,最终达到净化该病的目的。