猪泛素基因与PRRSV GP5基因融合表达质粒的构建及其免疫效果

构建了泛素（ubiquitin，Ub）基因与密码子优化的PRRSVGP5蛋白（optiGP5）基因融合表达质粒pIR—Ub—optiGP5。间接免疫荧光和Western—blot分析表明，重组质粒转染293T细胞后能够瞬时表达。将pIR—optiGP5和pIR—Ub—optiGP5两种质粒DNA肌肉注射免疫BALB／c小鼠后，分别检测小鼠血清中抗GP5抗体、T淋巴细胞的增殖能力以及CTL活性。结果显示，pIR—optiGP5质粒免疫组在二免后可以检测到荧光抗体，而pIR—Ub—optiGP5质粒免疫组一直未检测到抗GP5抗体，但该免疫组的T淋巴细胞增殖指数及针对GP5的特异性CTL反应数值明显高于pIR—optiGP5质粒免疫组。这表明泛素与GP5的融合表达可增强细胞免疫反应。     

N-乙酰半胱氨酸对猪肠道功能的保护作用

动物的肠道完整性在营养、代谢和机体内环境稳定中起着非常重要的作用,是机体抵御内源性和外源性有害物质的第一道屏障.肠上皮细胞的完整性是保障肠道功能的生理基础,肠上皮受损会影响营养物质的吸收,从而降低生产性能和影响动物的健康.N-乙酰半胱氨酸(NAC)是L-半胱氨酸与还原型谷胱甘肽(GSH)的前体物质,NAC的生理功能和应用效果在很大程度上与维持细胞内的GSH水平有关.饲粮中添加NAC可以缓解脂多糖应激引起的肠黏膜损伤、乙酸刺激引起的结肠炎及改善小肠吸收功能,这些与NAC促进表皮生长因子的生成、抗黏膜细胞凋亡和促进紧密连接蛋白表达有关.本文就NAC对猪肠道功能的保护作用相关研究作一综述.     

山东省牛主要污染物产生量估算及环境效应研究

[目的]估算了山东省牛粪便的总量及其养分的负荷量和占当年排泄污染物的比例。[方法]根据2010年山东省和各地市牛存栏的行业和统计局两套数据和2012年行业数据,通过计算参数和估算的方法算出了牛粪产生总量。[结果]全省牛粪总共约在7000~9700万 t 之间,占当年所有畜禽粪便产生量的34.07%~37.37%之间,即三分之一以上。德州、济南两市单是牛粪便的土地承载量分别达到了29.7 t/hm2和27.4 t/hm2,接近了欧洲标准30 t/hm2的限量值。[结论]应该引起我们对全省牛业发展方式和发展战略的高度重视。     

乳酸菌发酵青贮对奶牛产奶量及乳成分的影响

利用从优质青贮饲料中分离鉴定并筛选的2株乳酸菌进行全株玉米的青贮中试试验,玉米青贮30天即可成熟。感官评定的结果表明,乳酸菌处理组的青贮饲料品质比对照组显著提高(p<0.05)饲喂添加乳酸菌的玉米青贮饲料对奶牛的产奶量没有显著影响,但是牛乳中蛋白质和非脂乳固体的含量也显著提高(p<0.05),而对乳脂肪的含量没有影响。     

福美双和铜对肉鸡胫骨软骨发育不良的影响

本试验旨在研究福美双和铜对肉鸡胫骨软骨发育不良、血清相关酶活性和组织铜含量的影响。100羽1日龄AA肉鸡随机分为4组,从8日龄起分别给予基础日粮(对照组),福美双日粮(基础日粮+福美双100 mg/kg),福美双低铜日粮(基础日粮+福美双100 mg/kg+CuSO4.5H2O 50 mg/kg),福美双高铜日粮(基础日粮+福美双100 mg/kg+CuSO4.5H2O 100 mg/kg),试验期至21日龄。结果表明:(1)日粮中添加福美双(100 mg/kg)能显著增加肉鸡TD的发生率;添加铜能降低福美双的这种作用,两者之间存在明显的互作关系;(2)与对照组相比,福美双组和福美双高铜日粮组肉鸡血清钙、磷水平明显升高(P<0.05);血清ALT水平在各组之间无显著差异;血清ALP、AST水平,福美双高铜日粮组与其余各组相比明显升高,差异显著(P<0.05);(3)与对照组相比,其余各组肉鸡胫骨长度均显著下降(P<0.05);(4)日粮中铜添加可提高各组织中铜的沉积;添加福美双能提高肝脏、肾脏、胰腺中铜的沉积,同时降低铜在肾脏中的沉积,而铜的添加能够降低福美双所引起的肾脏铜的增加。提示福美双可能通过损伤肝、肾功能,影响机体组织对铜的生物利用从而诱导肉鸡胫骨软骨发育不良的发生。     

冷蒿挥发物对紫花苜蓿种子萌发及幼苗生长的影响

以7个紫花苜蓿品种为试验材料,研究了损伤和未损伤冷蒿释放的挥发物对苜蓿种子萌发生理特性的影响.结果表明:损伤和未损伤冷蒿释放的挥发物对7个紫花苜蓿品种的种子发芽指数和发芽率均有抑制作用,损伤处理与未损伤冷蒿挥发物处理相比,种子发芽率降低了5.6%～15.0%;挥发物对7个紫花苜蓿品种幼苗生长具有明显的抑制作用,与对照相比,未损伤冷蒿释放的挥发物使7个紫花苜蓿品种根生长降低了10.4%～22.8%,芽生长降低了12.7%～30.4%,幼苗鲜质量降低了11.2%～16.8%;损伤冷蒿挥发物抑制作用较未损伤冷蒿挥发物有所增强.     

鸭疫里默氏杆菌GroEL蛋白的原核表达和单克隆抗体制备

本试验旨在研制鸭疫里默氏杆菌GroEL蛋白的单克隆抗体。将鸭疫里默氏杆菌WJ4菌株的groEL基因进行原核表达,重组蛋白经过纯化后作为免疫原免疫BALB/c小鼠。经过3次免疫后,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合,用间接ELISA筛选阳性细胞株并进行3次亚克隆后制备小鼠腹水单克隆抗体。共获得2株稳定分泌鸭疫里默氏杆菌GroEL单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为1G2B6和1G2F10。2株单克隆抗体均为IgG1亚类。腹水单克隆抗体ELISA效价达到1:102 400。Western blot检测结果表明2株单克隆抗体均能与鸭疫里默氏杆菌血清1、2和10型菌株发生特异性结合,而与禽致病性大肠杆菌、沙门氏菌和禽巴氏杆菌菌株无反应性。本研究成功制备了稳定性好、特异性强的鸭疫里默氏杆菌GroEL单克隆抗体,为进一步研制基于抗体检测鸭疫里默氏杆菌抗原的试剂盒奠定了基础。     

中国草原保护建设技术进展及推广应用效果

如何有效保护和建设草原、遏制草原退化、发挥草原的多功能作用,已成为中国社会普遍关注的问题.自2000年以来,中国启动了一系列草原保护建设工程,推广和应用了多项草原保护建设技术,但仍无法改变其草原生态环境局部改善、总体恶化的趋势.人们常常质疑技术在草原保护建设和利用过程中的作用,为此探讨和分析了草原保护建设技术的现实作用和潜在作用.通过问卷调查和对1996～2005年间大量有关资料和信息的统计,分析了中国草原保护建设技术的研究进展与推广应用情况及典型县草原保护建设技术推广应用情况.结果表明,1996年以来中国草原保护建设技术进步作用明显,但与草原保护建设的实际需求仍有较大差距;典型县技术推广采用以项目推动式为主的多种推广模式,不同典型技术其推广模式和途径有不同特点,根据不同典型技术特点进行技术推广是提高草原保护建设技术推广效益和效率的有效途径;加强技术创新研究和技术推广力度、加大投入是提高技术进步作用的措施.     

玻璃化冷冻牛卵母细胞单精子注射后体外发育能力的研究

实验研究了不同成熟培养时间的牛卵母细胞玻璃化冷冻及胞质内单精子注射(ICSI)后的受精效果。结果表明:成熟后的新鲜牛卵母细胞按照ICSI注射方法穿刺而不注射精子组与未经穿刺的对照组相比,孤雌激活后的卵裂率、囊胚发育率及囊胚细胞数无显著差异(P>0.05);成熟培养16h(MⅠ)和23h(MⅡ)卵母细胞冷冻解冻后形态正常率均显著低于新鲜对照组(76.66%、87.33%vs100.0%)(P<0.05),冷冻解冻后二者分别成熟培养至24h,ICSI后胚胎的囊胚发育率(5.29%、14.41%)显著低于新鲜对照组(24.40%)(P<0.05);成熟培养23h与成熟培养16h的卵母细胞冷冻解冻后形态正常率及ICSI后囊胚发育率(14.41%vs5.29%)均有显著性差异(P<0.05)。实验证明,ICSI操作不会影响卵母细胞发育潜力;玻璃化冷冻影响卵母细胞解冻后形态正常率以及ICSI后胚胎的发育能力;成熟培养23h比16h的卵母细胞冷冻保存后经ICSI的胚胎发育潜力高。     

青海省2005年草原虫害防治存在问题及建议

青海省农牧区由于春季干旱、夏季多雨等原因,导致害虫发生种类多、面积大、分布广;主要危害种类为草原毛虫、草原蝗虫、古毒蛾及草地螟.本文针对防治工作存在经费不足、规模小、器械落后、成本高、孵化期差异性大等问题,科学地提出了今后进一步加强虫防工作的建议.