PCV2感染性分子克隆的制备及体内外感染性试验

将猪圆环病毒2型（Type2 porcine circovirus，PCV2）JXL株cDNA插入到载体pMD18-T中，获得的pMDT-PCV转染猪肾细胞PK15细胞系，盲传4代后，利用PCV2阳性猪血清进行间接免疫荧光抗体试验（IFA），能检测到特异性荧光。将pMDT-PCV质粒DNA腹股沟淋巴结注射40日龄仔猪2头，分别接种2、3次，接种剂量500μg／次，首次注射35d心脏放血致死。在体内感染性试验期间，动物未出现明显临床症状。试验结束，病理切片结果显示，不同淋巴组织中分别存在淋巴细胞缺失或增多的现象；肾小球、扁桃体、空肠淋巴结和股前淋巴结等冰冻组织切片中存在大量PCV2病毒抗原；血清中PCV2特异性的ELISA抗体效价迭1：2560，IFA效价为1：1280；通过聚合酶链式反应（PCR）可以分别从体外感染PK15细胞和体内感染动物及同圈饲养的空白对照猪的淋巴组织中扩增到病毒特异性基因片段。本研究证明含有单拷贝PCV2的重组质粒pMDT—PCV在体内、外均具有感染性，能衍生出病毒，并产生符合自然感染PCV2的大体病变和组织病理学变化，并激发较强的体液免癌应答。     

鸡胚胎原始生殖细胞的体外培养

旨在对影响鸡胚胎原始生殖细胞（PGCs）体外培养、传代过程的各种影响因素进行探讨。将分离到的19期鸡胚胎生殖腺的PGCs在以鸡胚成纤维细胞（CEF）为饲养层，添加细胞因子的培养体系中进行培养、传代。经冷冻保存的PGCs在添加细胞因子的培养体系中能增殖，并具有分化能力。从细胞形态、集落形态、增殖生长能力、核型检测、碱性磷酸酶测定等方面对培养过程中的鸡胚胎PGCs进行检测。结果表明，采用传至3代的CEF为饲养层，多次离散法进行传代所获得的5代鸡胚胎PGCs不但能有效维持PGCs的未分化状态和正常二倍体核型，也具有其作为多能性胚胎干细胞的一系列特征。     

穴播条件下株行距对紫花苜蓿种子产量和质量的影响

在甘肃省酒泉市研究了穴播条件下不同株、行距处理对紫花苜蓿种子生产性能的影响，结果表明：在产种第一年（2004年）行距和株距对种子产量和产量构成因素均产生了显著的影响（P〈0．05），随着行距从60cm递增至100cm，种子产量也随之从1240kg／hm^2下降到982kg／hm^2，而各株距处理的种子产量则从15cm的1426kg／hm^2依次递减至60cm的807kg／hm^2；行距60cm和株距15cm组合的产量最高，为1833kg／hm^2，100cm行距和株距60cm组合的产量最低，为753kg／hm^2。株行距的增加显著降低了枝条密度，但结荚花序数／枝条和荚果数／结荚花序却显著提高。品种间种子产量的差异不显著。品种间的结荚花序数／枝条、种子重量、正常种苗率、发芽势和硬实率存在显著的差异（P〈0．05）。     

金耳发酵液对糖尿病小鼠降血糖作用的研究

研究表明，金耳发酵液对四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠有降血糖作用，同模型对照组相比．大剂量组差异显著（P〈0.05）；同时，大剂量组对糖尿病小鼠摄食、饮水量的减少及体重的增加均有显著影响（P〈0.05）     

保护地蔬菜节肥新技术的探讨

在建设节约型社会的今天,随着人们生活质量的不断改善和对农产品品质要求的不断提高,对保护地蔬菜施肥提出了新的要求.但目前在保护地蔬菜生产上存在的主要问题是施肥过量、施肥不合理及施肥技术落后等问题.现对保护地(冬暖大棚)蔬菜施肥过量和施肥不合理进行分析,并提出改进和措施.     

Expression of TGF-β1 and Smad2/3 in kidney of STZ-induced diabetic nephropathy rats

AIM: To study the role of TGF-β/Smad pathway in the development of renal fibrosis in diabetic nephropathy.METHODS: Rats were induced to diabetic nephropathy by using tail intravenous injection of STZ.The expression of TGF-β₁, Smad2/3 protein and mRNA in kidney were examined at 2, 4, 8 and 16 weeks after STZ induction.CTGF, collagen-Ⅲ, PAI-1 mRNA expression in kidney at 16 weeks of STZ-induced diabetic nephropathy and normal rats were studied by RT-PCR.RESULTS: Weak TGF-β₁, Smad2/3 protein were detected in normal renal tissues while strong TGF-β₁, Smad2/3 staining were observed in renal tissues of diabetic nephropathy (0.057±0.030/0.223±0.040;0.017±0.010/0.153±0.010, respectively, P<0.05).The TGF-β₁, Smad2/3 protein expression were constantly high with the development of diabetic nephropathy and fibrosis (0.153±0.010, 0.122±0.050, 0.141±0.070 and 0.216±0.030 for 2, 4, 8 and 16 weeks, respectively).The TGF-β₁, Smad2 mRNA expression also increased with the development of diabetic nephropathy (2.86, 3.25 fold compared to control, respectively).The expression of TGF-β₁, Smad2, CTGF, collagen-Ⅲ and PAI-1 mRNA were significantly higher in kidney of 16 week diabetic nephropathy rats than that in normal ones (3.92, 2.95, 1.57, 1.95 and 1.97 folds compare to control, respectively, P<0.05).CONCLUSION: The results indicate that TGF-β₁/ Smad2 pathway activity might play an important role in pathophysiological process of diabetic nephropathy.It may be involved in diabetic renal fibrosis through up-regulation of CTGF and PAI-1 to promote extracellular matrix deposition.     

杨盘二孢激发子的分离及稳定性研究

 从杨盘二孢的培养滤液和菌丝中获得2种激发子粗提物,分别测定其糖和蛋白质的含量,发现滤液激发子粗提物(CFE)糖和蛋白质的含量分别为41.07和40mg/mL,菌丝激发子粗提物(CME)糖和蛋白质含量分别为48.07和55mg/mL。滤液激发子粗提物对温度不敏感而对碱性条件敏感;菌丝激发子粗提物对酸碱不敏感而对温度敏感。用Sephadex G-100柱层析的方法初步纯化2种激发子,并且菌丝激发子粗提物过柱后得到2个活性组分J14和J25;滤液激发子粗提物过柱后获得2个活性组分L9和L16。将4个组分进行烟草叶片过敏反应和I-895杨酶活性的诱导,结果表明,菌丝激发子强活性物质集中在J14组分;而滤液激发子强活性物质集中在L9组分。     

同源四倍体皇家嘎拉苹果的生长结果特性

皇家嘎拉苹果四倍体是一个由皇家嘎拉苹果二倍体经诱变处理获得的品系。为了解皇家嘎拉苹果四倍体与二倍体对照植株在生长结果特性方面的差异,取2种果树的接穗高接到10年生大树上,在植株结果后进行了调查研究。结果表明,由皇家嘎拉苹果二倍体诱变成的同源四倍体植株在高接后第3年开始结果,其花萼、花瓣、雌蕊、雄蕊及花药比对照大;叶片变宽,叶柄和果柄变短粗;单果大,种子数少,果形指数小,果实可溶性固形物、总糖和可滴定酸含量增高;其节间长、叶长及果肉硬度与二倍体则无显著差异。     

盐胁迫对珠美海棠和山定子膜保护酶系统的影响

实验以耐盐种珠美海棠(MaluszumiMats)和盐敏感种山定子[Malusbaccata(L.)Borkh]为试材,比较研究了在盐胁迫下叶片质膜透性、叶绿素和丙二醛(MDA)含量、膜保护酶超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)活性及根质膜透性的变化,为探索苹果属植物耐盐机制提供素材。结果表明,盐胁迫对根质膜透性没有明显的影响;但导致叶片质膜透性增加,盐敏感种山定子的质膜透性高于耐盐的珠美海棠。随盐胁迫加重,叶绿素a、b含量降低,叶绿素a/b比值增加,类胡萝卜素变化不明显。MDA含量随盐胁迫而升高,但珠美海棠低于山定子。山定子叶片中SOD、POD、CAT活性随盐胁迫加重而降低,而珠美海棠SOD活性在盐胁迫下保持稳定,POD、CAT活性增高。由此可见珠美海棠在盐胁迫条件下有活性较高的膜保护酶系统。