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71.
本试验旨在建立一种针对检测抗H1N1亚型猪流感病毒单克隆抗体的免疫过氧化物酶单层细胞试验(immunoperoxidase monolayer assay,IPMA)筛选方法。通过优化MDCK细胞接毒量、细胞接毒后培养时间、封闭液的种类和工作浓度、工作时间等各个反应条件,并对建立的IPMA筛选方法的特异性、敏感性和重复性进行评价。结果显示,建立的IPMA检测方法的最优反应条件为MDCK细胞接毒102.63 TCID50/100 μL H1N1亚型猪流感病毒,37℃培养24 h,含3‰ H2O2的甲醇室温固定15 min,5%脱脂乳37℃封闭2 h,50 μL杂交瘤细胞上清作为一抗,37℃孵育2 h,羊抗鼠HRP-IgG二抗37℃孵育1 h。所建立的IPMA方法能特异性地检测H1N1亚型猪流感病毒单克隆抗体,与猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)和猪瘟病毒(CSFV)阳性血清不发生交叉反应;其敏感性检测结果显示,可检测1:3 200的HI=2-9标准H1N1猪阳性血清;批间和批内重复性试验结果较好。综上所述,本试验成功建立了抗H1N1亚型猪流感病毒单克隆抗体的IPMA检测方法,该方法特异性强、敏感性高、重复性好,为生产鉴定H1N1亚型猪流感病毒单克隆抗体提供了一种简便、实用、有效的检测手段。 相似文献
72.
根据GenBank已公布的狂犬病病毒(rabies virus,RV)核蛋白(N)基因序列设计并合成一对特异性的引物和探针,建立基于TaqMan探针的荧光RT-PCR检测狂犬病病毒方法。对狂犬病疫苗提取核酸后进行RT-PCR扩增,将目的条带切胶回收,克隆测序,重组质粒作为标准阳性对照。对建立的TaqMan探针荧光RT-PCR方法做灵敏度、特异性、重复性及稳定性试验。结果显示,该方法可以达到10拷贝/μL的灵敏度,可以将狂犬病病毒与犬瘟热病毒、犬细小病毒、犬腺病毒、犬冠状病毒和犬副流感病毒分开,方法重复性好,稳定可靠。 相似文献
73.
74.
随着我国畜牧养殖业的不断发展,动物防疫检疫人员在依法严格把关、确保动物及其产品检疫质量、保护人民身体健康、促进养殖业健康发展等方面,做出了积极努力和贡献。但动物防疫检疫人员作为与各种动物及其产品的密切接触者,其自身对消毒防护措施的重视程度,与动物疫病的发生和流行有着一定的关系。 相似文献
75.
醉马草化学成分预试及毒性部位筛选 总被引:1,自引:0,他引:1
以春秋两季醉马草样品作为试验材料,粉剂样品分别做系统预试验比较所含主要成分种类和数量上的差异,并通过分光光度法测定了2种材料的生物碱和黄酮含量;分别用不同极性溶剂制作的悬浮液,做毒性筛选试验。结果表明,春季材料含的生物碱类成分远远超过秋季材料,而秋季材料所含的黄酮类成分远远超过春季材料;毒理试验表明,毒性成分主要集中在春季材料的950 mL/L乙醇提取部分。 相似文献
76.
类风湿关节炎多为对称性,发病原因不明,多发于20-45岁,女性多于男性。现代医学认为此病与感染、自身免疫下降、遗传因素、内分泌失调等有关,而寒冷和潮湿是诱发本病的重要因素。 相似文献
77.
葛云法尹兆正丁良冬俞建昌邵丽霞章金泉方盛国 《野生动物》2014,(1):81-84
为做好朱鹛的迁地保护工作,进行人工繁育是短时间内提高种群数量的最有效措施。浙江省德清珍稀野生动物繁育研究中心自2008年从陕西野生动物救护中心引入5对朱鹦,通过5a努力,目前存栏数已达118只,取得了一些成绩,同时也积累了一些经验教训。本文以朱鹦浙江种群的人工繁育工作实践为基础,结合现有的相关文献,对浙江省德清珍稀野生动物繁育研究中心2008—2012年饲养的138只朱鹃雏鸟的非传染性疾病进行了统计分析,同时阐述了其发病原因和防治措施。主要疾病包括:腿部疾病4种(10例,占7.25%):船桨腿、卷曲趾、关节肿大、皮下气肿;头颈部疾病3种(15例,占10,87%):交叉喙、长短喙、歪脖子;还有其他疾病3种(5例,占3.62%):育雏室小气候控制不良引发的疾病、胚胎病或孵化不良引发的疾病、不明原因死亡的疾病。通过分析病因,提出防范措施,为后续的育雏工作提供指导,以避免类似的疾病再次发生,促进朱鹦人工种群的发展,对其他濒危野生鸟类的人工复壮也有一定的指导意义。 相似文献
78.
试验旨在研究奶牛日粮中添加不同梯度的吡啶羧酸铬对热应激期奶牛体温、呼吸率、产奶量和牛乳中铬及乳成分的影响,为吡啶羧酸铬在奶牛热应激期的安全应用提供依据。选择20头荷斯坦泌乳牛,采用单因子区组设计,分为对照组和处理Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三个试验组。对照组饲喂基础日粮,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组在此基础上分别添加吡啶羧酸铬4、8和12mg/(头·d),试验期60d。结果表明,奶牛在热应激状态下,日粮中添加吡啶羧酸铬4、8、12mg/(头·d)对牛奶中铬含量影响不显著(P>0.05);对牛奶常规成分(乳脂率、乳蛋白率、乳糖率、总固形物)无显著影响(P>0.05);添加8、12mg/(头·d)水平的吡啶羧酸铬对减缓奶牛热应激、提高产奶量有显著作用(P<0.05)。 相似文献
79.
80.
猪繁殖与呼吸综合征是猪群中的一种免疫抑制性传染病,是严重危害养猪业的主要疫病之一,运用各种检测技术对该病做出准确的诊断是预防和控制该病的前提。猪繁殖与呼吸综合征的检测包括检测病毒、检测血清抗体及分型诊断,涉及的技术和方法有病毒分离技术、免疫组化技术、RT-PCR技术、间接免疫荧光试验、免疫过氧化物酶单层细胞试验、酶联免疫吸附试验、基因芯片技术等。每种诊断技术都有其各自的优势和局限性,应根据研究目的及工作条件等予以选择,作者对各种诊断技术的原理、方法及特点进行了概述和比较,并对今后的应用前景和发展趋势进行了展望。 相似文献