微小隐孢子虫三个基因主要抗原表位区的串联表达及其抗原性分析

应用多个抗原袁位预测软件对微小隐孢子虫CP15、P23和CP15/60三个子孢子表面抗原的氨基酸序列进行T细胞袁位预测及分析,从中选取了三个抗原表位富集的基因片段,利用重叠延伸PCR(gene splicing by overlapping extension PCR,SOE PCR)将该三个基因片段串联在一起,各基因片段之间以柔性氨基酸(GGGGS)碱基序列链接,得到的拼接片段命名为CpTm.将目的基因克隆到原核表达载体pET-28a(+)上,构建重组表达质粒pET-CpTm,并转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达,将纯化的重组蛋白免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体.结果成功地构建了CpTm串联基因并在大肠杆菌中以可溶形式高效表达,质谱分析表明重组表达蛋白包含了上述三个抗原的氨基酸序列.Western blot分析显示该重组蛋白能被牛抗微小隐孢子虫阳性血清及隐孢子虫鼠基因型CP15、P23、CP15/60基因重组表达蛋白免疫兔血清识别,制备的抗血清能被重组蛋白特异性识别,表明表达的重组蛋白具有较好的反应原性和免疫原性,为多表位疫苗的研制奠定了基础.     

衍生化气相色谱法检测瘤胃液和青贮液中乳酸对映体和挥发酸

利用手性衍生化试剂L-薄荷醇和气相色谱柱前衍生化,将瘤胃液和青贮液中L-和D-乳酸对映体转化为酯类非对映体对,建立同时分析发酵液中乳酸对映体和挥发酸的气相色谱检测方法。样品乳酸对映体的质量浓度在0.05~10.00 mg/mL范围内时,标准曲线的决定系数分别达到R2=0.999 5和R2=0.999 6。乳酸对映体的回收率为96.15%~108.24%,且相对标准偏差小于5%。采用本方法检测瘤胃液和青贮液样品的L-和D-乳酸对映体含量,并且与酶学检测法进行比较,2种方法的测定结果没有显著性差异(P>0.05)。发酵液中挥发酸经衍生化处理,可以与L-和D-乳酸对映体在同一色谱条件下检测,各组分在0.05~5.00 mg/mL范围内线性良好,R2=0.998 2~0.999 4。乳酸对映体和挥发酸的色谱分析在6 min完成。     

Effects and mechanisms of rural E-commerce clusters on households' entrepreneurship behavior in China

The vigorous development of rural E-commerce reveals a powerful pattern of economic clustering. Recently, many Taobao Villages have formed in more than 80% of the provinces in rural China, and increasingly households are using E-commerce for entrepreneurial innovation in Taobao Villages. However, the effect and mechanism of the Taobao Village model on households' entrepreneurship behavior remain unclear. Using survey data and structural equation modeling, we analyzed the factors of households' entrepreneurship behavior and investigated the mechanism of rural E-commerce clustering on the households' entrepreneurship behavior in Taobao Villages. The results show that: (1) rural E-commerce clusters stimulated entrepreneurial enthusiasm and increased entrepreneurial behavior; (2) local resource endowment, entrepreneurial atmosphere and culture, threshold for entrepreneurship, and demonstrative leadership had significant positive effects on households' entrepreneurship behavior; (3) external environmental support, including government, and external business environment support had significant positive effects on E-commerce development. All these results indicate that rural E-commerce clusters promote households' entrepreneurship behavior.     

苜蓿智慧管理研究进展与应用

【目的】 结合现有苜蓿智慧管理研究进展,提出基于小型无人机+超声波检测在苜蓿智慧管理上的具体应用,为精准农业和苜蓿规模化生产的远程诊断提供思路。【方法】 文章以苜蓿为研究对象,以内蒙古呼伦贝尔市谢尔塔拉农牧场为研究区,在总结归纳当前苜蓿智慧管理研究及应用现状的基础上,进行了无人机+超声波的苜蓿田数据采集及应用。【结果】 研究进展表明与卫星相比,无人机在农作物识别与长势估算中,识别精度和速度表现出明显优势,苜蓿智慧管理的前提是数据的获取与分析,从无人机获取的代表苜蓿冠层高度信息的DSM数据能够显著提升苜蓿识别精度、苜蓿形态三维建模、苜蓿相对高度估算等方面,实时获取苜蓿生长过程中的相关参数使结果更为可靠。【结论】 该文总结现阶段苜蓿智慧管理研究进展,归纳现有研究成果的优势与不足,提出结合无人机采集的高分辨率图像和超声传感器,对不同状况下的苜蓿进行准确数据获取的方法。基于此方法配套相应的苜蓿管理决策支持系统,将可以为用户提供苜蓿长势、产量预测和实时灌溉、施肥等管理策略。     

番茄灰霉病菌拮抗菌的筛选和应用

采集番茄等蔬菜叶、根和土壤样本 1 82份 ,分离获得对番茄灰霉病菌 (Botrytiscinerea Pers.)有抑制作用的拮抗菌5 8株。其中拮抗细菌 5 4株 ,占 93 .1 % ,且多为芽孢杆菌 (Bacillus) ;拮抗真菌中木霉 (Trichoderma)和粘帚霉 (Gliocladium)各 1株。根据抑菌圈法测定 ,拮抗细菌对灰霉菌的拮抗能力有显著差异 ,其中芽孢杆菌 Y2 - 1 1 - 1 菌株拮抗性最强且稳定。试验表明 :Y2 - 1 1 - 1 悬浮液对番茄灰霉病有较好的防治效果 ,室内叶片和果实的防效分别为 69.9%和 78.2 % ;大棚内对果腐的防效 ,喷施 1次与 2次的分别为 61 .7%～ 72 .1 %和 76.6%～ 85 .3 % ,明显优于 5 0 %速克灵 (2 0 0 0倍稀释液 )。     

雏鸡HVT疫苗免疫后活性氧自由基代谢变化规律的研究

本实验以火鸡疱疹病毒（ＨＶＴ）疫苗免疫１日龄ＡＡ肉用雏鸡,于免疫后７,１４,２８,４２和５６日龄分别检测雏鸡中枢、外周淋巴器官及主要内脏器官超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、含硒谷胱甘肽过氧化物酶（Ｓｅ－ＧＳＨＰｘ）活性和脂质过氧化物（ＬＰＯ、Ｏ）含量,并首次采用化学发光（ＣＬ）法检测雏鸡中枢、外周淋巴器官淋巴细胞化学发光的动态变化。结果：（１）ＨＶＴ疫苗免疫雏鸡各器官总ＳＯＤ（Ｔ－ＳＯＤ）和Ｍｎ－ＳＯＤ活性在大部分检测时期均显著增强（Ｐ＜０．０５）,Ｃｕ、Ｚｎ－ＳＯＤ活性轻度升高,但无显著性差异（Ｐ＞０．０５）;（２）ＨＶＴ疫苗免疫雏鸡各器官Ｓｅ－ＧＳＨＰｘ活性２８、４２和５６日龄显著增强（Ｐ＜０．０５,Ｐ＜０．０１）;（３）ＨＶＴ疫苗免疫雏鸡多数器官ＬＯＰ含量于７、２８和５６日龄降低和显著降低（Ｐ＞０．０５,Ｐ＜０．０５）;（４）ＨＶＴ疫苗免疫雏鸡胸腺、脾脏和法氏囊各免疫器官淋巴细胞ＣＬ值检测各时期增高和显著增高（Ｐ＞０．０５,Ｐ＜０．０５,Ｐ＜０．０１）。本实验结果表明,ＨＶＴ疫苗免疫雏鸡活性氧自由基清除系统活性增强、淋巴细胞活性氧自由基生成增多,但脂质过氧化作用减弱,从而发挥ＨＶＴ疫苗的免疫增强效应和免疫保?     

陆地棉(G. hirsutum L.) N-乙酰氨基葡萄糖转移酶基因(GhGnT)的克隆及耐盐性功能分析

在耐盐相关基因芯片基础上,我们筛选到盐诱导显著上调表达(Ratio>2)的N-乙酰氨基葡糖转移酶基因.选取耐盐材料中9806为材料,根据耐盐性抑制消减文库EST序列设计引物,利用RACE及RT-PCR技术获得该基因cDNA全长1970 by,命名为GhGnT.通过Blast比对,发现该基因与蓖麻乙酞氨基葡萄糖转移酶基因...     

石灰性土壤交换性钙和镁测定方法的研究

石灰性土壤交换性盐基组成的测定,通行的方法是采用70%乙醇溶液反复洗盐,再经pH 8.50.1 mol L-1氯化铵-70%乙醇(CH3CH2OH)溶液进行多次交换处理,测定交换液中的K+、Na+、Ca2+、Mg2+浓度。但此方法常常受操作步骤繁琐,以及土壤中碳酸盐的溶解量因多次浸提而增加的困扰,最终导致测定结果偏高。基于上述原因,选择不同浓度、不同pH的NH4OAc和NH4Cl 10种交换剂,对比分析10种交换剂中的碳酸盐溶解度和土壤交换性钙镁含量。结果表明,pH=8.5 1 mol L-1氯化铵-70%乙醇(CH3CH2OH)溶液较适合石灰性土壤交换性盐基的测定。此新方法是先经70%乙醇(CH3CH2OH)溶液洗盐,再用pH8.5 1 mol L-1氯化铵(NH4Cl)-70%乙醇(CH3CH2OH)溶液进行一次性交换处理,然后测定交换液的K+、Na+、Ca2+、Mg2+浓度,简化了操作程序的同时有效抑制了土壤碳酸盐的溶解,降低了测定结果的偏差。     

石灰性土壤上利用天然沸石活化磷矿粉的初步探讨

在石灰性土壤上以磷矿粉和天然沸石为试材进行盆栽试验,结果表明,在石灰性土壤上沸石对磷矿粉具有较强的活化作用,能使土壤速磷增加１４．１％－５０．５％,植物磷素增加５．０％－２１．７％,大豆产量增加９．８％－２０．７％,另外,沸石的施用量也并非越多越好,在本试验中,沸石以每盆施１２．５ｇ的效果最好。     

氯虫苯甲酰胺和氟虫双酰胺对不同虫态甜菜夜蛾的毒力作用

采用浸叶法、点滴法、夹毒叶片法、成虫药膜法、饲喂毒营养液法测定了氯虫苯甲酰胺、氟虫双酰胺对甜菜夜蛾卵、2~4龄幼虫、成虫的活性和对4龄幼虫的拒食活性,以明确氯虫苯甲酰胺和氟虫双酰胺对不同虫态甜菜夜蛾的毒力作用。结果表明,两种杀虫剂均不具有杀卵活性,但可以明显降低初孵幼虫存活率;氯虫苯甲酰胺、氟虫双酰胺均对2龄幼虫活性最高,分别为3龄幼虫的1.50、6.17倍和4龄幼虫的22.25、44.95倍,对4龄幼虫胃毒活性分别为触杀活性的14.10、8.44倍;氯虫苯甲酰胺对甜菜夜蛾成虫毒力为氟虫双酰胺的25.53~34.19倍。氯虫苯甲酰胺、氟虫双酰胺对甜菜夜蛾幼虫表现出较强的拒食作用, 至处理后48 h拒食率达到最高, 分别为 82.73%、84.15%,显著高于对照药剂甲维盐各浓度处理,处理试虫虫体皱缩、体节缩短,体重增加率明显低于对照和甲维盐各处理。