生物安全隔离区划在禽流感防控中的应用

简要回顾了生物安全隔离区划的应用进展,重点介绍了生物安全隔离区划在禽流感防控中常用的技术手段,以期对我国禽流感防控工作和无禽流感生物安全隔离区建设提供参考。     

利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统在家蚕中表达人瘦素蛋白

瘦素(leptin)蛋白由肥胖基因编码,对人体能量代谢等多种生理过程起着重要的调节作用。利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统,将人瘦素蛋白基因(lep)克隆到杆状病毒转移载体pFastBacHTb,并转化E.coli DH10Bac,获得重组杆粒Bacmid-lep,然后转染家蚕BmN细胞,获得重组杆状病毒。用SDS-PAGE和Western blotting方法在感染重组病毒的家蚕BmN细胞检测到大小约22 kD的蛋白条带,与预期的人瘦素蛋白分子质量相符。给家蚕5龄起蚕注射重组病毒液后的4～5 d出现发病症状,RT-PCR检测发病家蚕的血液中有lep基因转录,并通过SDS-PAGE和Western blotting检测到大小为22 kD的人瘦素蛋白的表达。研究结果表明,利用Bac-to-Bac表达系统能够获得含有人瘦素蛋白基因的重组杆状病毒,并且目的蛋白能在家蚕细胞及幼虫体内表达。     

安全优质前景广阔——访苏州欧福蛋业有限公司梅中非经理

我国是禽蛋生产大国,但不是蛋品工业强国,我国的禽蛋业急需由传统加工型向现代深加工型转变。在欧美发达国家蛋品消费市场中,超过70％是蛋粉和液蛋形态,而中国98％是壳蛋。液蛋以其安全、优质的特性正逐渐在我国的食品加工、化妆品、医药等行业应用。苏州欧福是国内第一家生产巴氏杀菌液蛋产品的有限公司,近日本刊记者采访了该公司技术经理梅中非,从中真切感受到势不可挡的蛋品健康消费潮流已经悄悄到来。     

北京地区家畜养殖数字化现状

数字农业是迈向农业强国的必经之路,数字化是农业现代化的标志,是北京地区家畜养殖场发展的必然趋势。本文从家畜养殖环境、养殖过程、养殖管理等方面介绍了北京地区家畜养殖数字化现状,特别是个体信息感知、个体精准饲喂、生产性能测定等技术的发展与应用情况。从政策支持、过程管理和技术创新三个方面进行了展望,促进现代信息技术与智能化装备在家畜养殖领域的发展应用,加快转型效率,提升养殖水平,增加养殖经济效益,为北京地区家畜养殖业的高质量发展提供支撑。     

犬Ⅱ型腺病毒自然弱毒株的分离与鉴定

从一只３月龄病犬中分离出一株犬腺病毒（ＣＡＶ）,暂定名为ＹＣＡ１８。从一系列形态学、生理化学、生物学和分子病毒学实验证明这是一株Ⅱ型犬腺病毒自然弱毒。此毒株能在犬、猪肾原代细胞和传代细胞系上生长,能产生腺病毒感染的特征性细胞病变,细胞肿胀,变圆和呈“葡萄串样”。在细胞核内可见病毒粒子及其前本的晶格状排列,病毒粒子呈２０面体立体对称,表面有排列整齐的壳粒;能抵抗乙醚的处理,在ＰＨ３及５０℃温度中稳定     

半胱胺促进奶山羊乳腺发育的试验研究

为了研究半胱胺对奶山羊乳腺发育的影响,选6只空怀奶山羊进行自身前后对照试验和8只妊娠奶山羊进行同胎次配对试验。结果表明,空怀奶山羊对照期乳腺的腺泡很少发育,几乎看不到乳导管,试验期乳腺有明显导管生长和少量腺泡发育;妊娠奶山羊对照组乳腺随着妊娠的进行有少量腺泡发育,腺导管有明显的生长,试验组乳腺有大量的腺泡发育,腺导管生长更明显,且有分泌物出现,血浆中与乳腺发育相关的激素水平明显升高。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒致病机理的研究进展

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种以妊娠母猪严重繁殖障碍及仔猪的呼吸道症状和高死亡率为特征的传染病。现已遍及世界各主要养猪国家和地区,成为危害养猪业最严重的传染病之一。作者就猪繁殖与呼吸综合征病毒致病机理方面的研究情况作一综述,为诊断技术、免疫机理研究、疫苗设计和疫病防制提供借鉴。     

高铜对雏鸭肝氧化状态及肝细胞凋亡的影响

将360只1日龄天府肉鸭随机分为6组,分别以对照日粮（Cu8mg／kg）和高铜日粮（Ⅰ组：Cu100mg／kg;Ⅱ组：Cu200mg／kg;Ⅲ组：Cu400mg／kg;Ⅳ组：Cu600mg／kg;Ⅴ组：Cu800mg／kg）饲喂6周,研究日粮铜水平对雏鸭肝氧化状态及肝细胞凋亡的影响。结果显示,与对照组比较,Ⅳ组和Ⅴ组肝铜锌SOD和谷胱甘肽过氧化物酶活性降低（P〈50．01）,Ⅲ组、Ⅳ组和Ⅴ组羟自由基和丙二醛含量显著升高（P〈0．01）,Ⅰ组和Ⅱ组肝铜锌SOD和谷胱甘肽过氧化物酶活性升高（P〈0．01）。高铜组肝细胞凋亡率随日粮铜水平的升高而增加。表明,日粮铜水平为400mg／kg以上时可引起肝抗氧化功能降低和肝细胞凋亡率升高。     

Ghrelin对雌激素诱导雄性小鼠胸腺萎缩的逆转及对相关细胞因子基因表达的影响

SPF级6周龄Balb/c雄性小鼠60只,随机分为3组,每组20只,适应饲养1周后进行动物试验.雌激素+Gh-relin试验组:前2周隔日腹腔注射苯甲酸雌二醇注射液(含苯甲酸雌二醇0.1 mg)0.05 mL/只,后2周按每日腹腔注射Ghrelin(含Ghrelin 60 μg)0.1mL/只;雌激素+生理盐水对照组:前2周隔日腹腔注射苯甲酸雌二醇注射液(含苯甲酸雌二醇0.1mg)0.05mL/只,后2周按每日腹腔注射0.9％生理盐水0.1 mL/只;生理盐水对照组:前2周按0.05 mL/只隔日腹腔注射0.9％生理盐水,后2周按0.1 mL/只每日腹腔注射0.9％生理盐水.动物试验结束后,统计小鼠胸腺指数,应用光镜观察胸腺形态学变化,采用实时荧光定量PCR法检测胸腺中12种细胞因子mRNA表达量的变化.结果显示,注射Ghrelin后,雌二醇诱导的小鼠胸腺萎缩在形态学上基本恢复到正常水平,胸腺中白细胞介素1(IL-1)、IL-2、IL-4、IL-6、IL-12、干扰素(1FN-γ)、白血病抑制因子(LIF)、抑瘤素(OSM)、干细胞因子(SCF)、胸腺体液因子(THF)、肿瘤坏死因子(TNF-α) mRNA含量显著降低(P＜0.05),而IL-7 mRNA含量稍微升高(P＞0.05).结果表明,Ghrelin对雌激素诱导的小鼠胸腺萎缩具有逆转作用,其机制可能是:一方面通过抑制IL一6、OSM、LIF、SCF等细胞因子的表达,从而促进胸腺细胞的增殖;另一方面通过抑制IL-1、IL-2、IL-4、IL-12、THF等细胞因子的表达,从而减少TNF-α和IFN-γ的分泌,进而抑制胸腺细胞的凋亡.     

微滴式数字PCR定量检测鸡毒支原体方法的建立

为建立微滴式数字PCR（droplet digital PCR,ddPCR）定量检测鸡毒支原体（Mycoplasma gallisepticum,MG）方法,以MG的mgpc基因序列为目的序列,在其保守区域内设计合成了1对特异性引物和1条探针,通过各反应条件优化,建立了检测MG的ddPCR方法,并测定了建立方法的特异性、敏感性以及重复性。结果显示：建立方法的最佳引物浓度为20 μmol/μL,探针浓度为10 μmol/μL,退火温度为55 ℃;该方法只检出MG,没有检出鸡滑液囊支原体、禽衣阿华支原体、禽流感病毒、鸡新城疫病毒、鸡传染性支气管炎病毒、鸡传染性喉气管炎病毒、禽脑脊髓炎病毒、禽偏肺炎病毒、禽呼肠孤病毒、鸡沙门氏菌和鸡大肠杆菌,且相互间没有交叉反应;本方法最低检测MG重组质粒标准品的检测限为3.9拷贝/μL。重组质粒标准品浓度在3.9~41 025拷贝/μL范围内,绘制的ddPCR绝对定量曲线与测得值呈良好的线性关系（R2 = 0.999）;3次重复检测试验结果的变异系数均小于5%。对采集的60份病鸡喉拭子、气囊拭子及肺样品进行MG检测,结果ddPCR方法的阳性检出率（15.0%）高于荧光定量PCR方法（13.3%）。结果表明,本研究建立的ddPCR方法定量检测MG特异性强,灵敏度高,重复性好,为绝对定量检测MG提供了技术手段。