濒危树种金钱松RAPD体系的建立和遗传多样性分析

通过优化随机扩增多态性DNA（RAPD） 反应体系,对浙江省不同来源的金钱松Pseudolarix amabilis进行遗传多样性分析。结果表明：18条随机引物在62个样品中可检测到172个可重复位点,其中多态性位点有170个,多态性比率为99.2%。聚类分析的结果表明：同一来源金钱松材料聚为一类,说明金钱松天然群体的RAPD多态性分类和其地理分布有一定的关系,但也有特殊个体不一致,表明金钱松天然种群体存在较高的遗传多样性,并建议对金钱松进行就地保存和迁地保存。图2表3参31     

杉木纤维素合成酶类似蛋白基因ClCslD1的克隆及其生物信息学分析

纤维素合成酶类似蛋白（CSL）作为一种重要的膜蛋白与纤维素合成酶具有相类似的蛋白结构,都含有D,D,D,QXXRW保守区。利用其他物种中的CesA基因的保守序列设计简并引物,采用反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）结合cDNA末端快速扩增技术（RACE）成功地从杉木Cunninghamia lanceolata中扩增出一个含有完整阅读框架的cDNA序列,长度为4 150 bp,开放阅读框架为3 396 bp,编码1 132个氨基酸并含有保守的D,D,D,QXXRW天冬氨酸残基序列。应用美国国家生物技术信息中心（NCBI）数据库对获得的基因进行序列分析比对,发现它属于CslD基因家族,命名为ClCslD1基因。多重序列比对结果分析表明,该蛋白与来自颤杨Populus tremuloides,水稻Oryza sativa,拟南芥Arabidopsis thaliana等的同源基因相似性高达71%以上。利用生物软件对其进行生物学分析,为进一步研究其在植物纤化中的功能奠定基础。图5参10     

伯乐树木材物理力学性质的研究

对伯乐树(Bretschneidera sinensis)木材的物理力学性质进行了测定与分析,结果表明:伯乐树木材的气干密度为0636g/cm3,体积干缩系数为065%,顺纹抗压强度为573MPa,弦向抗弯强度为1081MPa,综合强度为1654MPa,冲击韧性465kJ/m2,与光皮桦(Betula luminifera)、鹅掌楸(Liriodendron chinense)、水青冈(Fagus longipetiolata)、水曲柳(Fraxinus mandschurica)、核桃(Juglans regia)、黄檀(Dalbergia hupeana)、枫香(Liquidambar formosana)、柞木(Xylosma racemosum)8种阔叶树种木材相比,其材性属中等。     

杉木纤维素合成酶基因CesA的克隆及表达分析

通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)结合c DNA末端快速扩增(RACE)技术,从杉木Cunninghamia lanceolata中克隆到2个全长为3 235 bp和3 876 bp的纤维素合成酶基因c DNA序列,被分别命名为Cl Ces A1和Cl Ces A2,Gen Bank登录号分别为JQ844574和JQ844575。相应编码蛋白分别包含992和1 092个氨基酸残基,推测分子量为111 845.3 D和123 105.7 D,等电点为6.04和6.65。氨基酸序列分析发现,它们具有植物纤维素合成酶基因相应的结构特征——锌指结构,2个易变区CSRI和CSRII,2个保守区CRI和CRII,纤维素合成酶底物结合结构域"D,D,D,QVLRW",以及8个跨膜区。荧光定量PCR分析表明:Cl Ces A1和Cl Ces A2基因在茎中表达丰度均为最高,且成熟木质部中表达量均高于皮层中的相应数值;2个基因在根和针叶中的表达量相对较低。以具特殊材质性状的矮生杉木和正常杉木木质部为材料的进一步表达分析发现:Cl Ces A1和Cl Ces A2在正常杉木木质部中的表达量大约是矮生杉木表达量的2~12倍。2个杉木Ces A基因可能在杉木木材形成过程中具有重要作用。     

香榧雌花芽分化期内源多胺的变化

采用高效液相色谱法,分析了两类香榧植株雌花芽分化期雌花芽和叶片内源多胺含量的变化。结果发现：在采样期间,雌花芽内源腐胺（Put）和亚精胺（Spd）含量均呈先升高后降低的变化趋势,且变幅明显,精胺（Spm）含量变化相对复杂和平稳,以腐胺含量最高;同期叶片内源腐胺、亚精胺和精胺也基本呈单日峰变化,但内源亚精胺和精胺出现峰值的时间在两类植株间差异明显。另外,在形态分化的大部分时间段,历年结果相对较少植株的雌花芽中腐胺和亚精胺含量高于历年结果相对较多的植株,而精胺含量变化则相反,说明在香榧花芽分化特定期,较低含量的腐胺与亚精胺可能是多花的—个信号。     

杉木纤维素合成酶类似蛋白基因ClCslD1的克隆及其生物信息学分析

纤维素合成酶类似蛋白(CSL)作为一种重要的膜蛋白与纤维素合成酶具有相类似的蛋白结构,都含有D,D,D,QXXRW保守区.利用其他物种中的CesA基因的保守序列设计简并引物,采用反转录-聚合酶链式反应(RTPCR)结合cDNA末端快速扩增技术(RACE)成功地从杉木Cunninghamia lanceolata中扩增出一个含有完整阅读框架的cDNA序列,长度为4 150 bp,开放阅读框架为3 396 bp,编码1 132个氨基酸并含有保守的D,D,D,QXXRW天冬氨酸残基序列.应用美国国家生物技术信息中心(NCBI)数据库对获得的基因进行序列分析比对,发现它属于CslD基因家族,命名为ClCslD1基因.多重序列比对结果分析表明,该蛋白与来自颤杨Populus tremuloides,水稻Oryza sativa,拟南芥Arabidopsis thaliana等的同源基因相似性高达71％以上.利用生物软件对其进行生物学分析,为进一步研究其在植物纤化中的功能奠定基础.     

高色素甘薯淀粉糊化特性的基因型差异

运用差示扫描量热分析仪(DSC)和淀粉黏度速测仪(RVA)分析了8个高色素甘薯品种淀粉糊化特性的差异。结果发现：品种间直链淀粉含量存在一定差异,变幅为19.59%～25.46%;DSC分析所得糊化温度也表现一定差异,起始温度（To）、峰值温度（Tp）和终止温度（Tc）的变幅分别为59.84～70.87℃、69.73～78.20℃和79.85～83.62℃,糊化     

香榧雌花芽部分内源激素的 HPLC 分析及动态变化

以香榧Torrega grandis `Merrillii' 雌花芽为材料, 研究了芽体中内源吲哚乙酸(IAA)、脱落酸(ABA )和赤霉素(GA3 )的提取、纯化方法和色谱测定条件。结果发现以石油醚作萃取剂, 并结合添加水不溶性聚乙烯吡咯烷酮和过Sep-PakC18小柱处理可达到较好的提纯效果。采用ODS-C18反相柱和Waters 486 型紫外检测器。用甲醇-水(体积比为50∶50 , 用乙酸调节pH为3.0 )作流动相, 流速为1 mLmin-1 , 柱温设为25 ℃, 进样量20 L , 分离IAA 和ABA 时紫外检测波长为280 nm 。分析GA3 时紫外检测波长为210 nm , 选用外标法进行定量。测定结果显示:该方法回收率高, 重演性好, 符合痕量分析要求。从2004 年2 月21 日至4 月29日的香榧雌花芽分化过程中, 芽体中IAA 和GA3 的质量分数呈现先上升后下降的变化趋势,而ABA 的质量分数表现出上升略下降再明显上升 的变化。图4 表4 参11     

施肥对石蒜生长的影响及其营养诊断的方法

对石蒜栽培中土壤营养、叶片营养与生长的关系进行研究。结果显示,石蒜鳞茎球重增量和围径增量随施肥量的增加呈现出明显的单峰曲线变化趋势,鳞茎的最大生长量比对照组增产15.7%,过量施肥会造成减产;依据养分平衡原理,确定了根据土壤肥力状况的施肥量模型;利用叶分析法对石蒜营养诊断方法进行初步尝试,得到叶片氮磷钾营养元素的临界浓度为3.05%,19.40%和31.29%,维持一个高于该临界浓度的营养水平对保证植株的产量至关重要。     

花叶络石的组织培养

通过对植物生长调节物质种类、质量浓度及配比对花叶络石Trachelospermumjasminoides‘Variegatum’茎段和腋芽诱导、增殖、腋芽增殖、最佳继代时间和生根的影响进行探讨,旨在建立花叶络石组织培养的再生体系,为其产业化生产提供技术平台。结果表明:花叶络石较理想的腋芽诱导培养基为MS BA 3.0 mg.L-1 NAA 0.1 mg.L-1,其诱导率为88%;最佳的腋芽增殖培养基为MS BA1.5 mg.L-1 NAA 0.1 mg.L-1,增殖系数为6,继代周期以25 d为佳,最佳的生根培养基为1/2MS或1/2 MS BA 0.1 mg.L-1 NAA 0.1 mg.L-1,生根率均达到90%以上。表4参6