山农01-35×藁城9411重组自交系遗传图谱构建及粒重QTL分析

为利用分子遗传图谱进行小麦产量数量性状位点定位分析,以大粒高产小麦品系山农01-35和强筋小麦藁城9411为亲本,衍生了含182个家系的重组自交系(RIL)F₈群体,用442个DArT标记、59个SSR标记和1个TaGW2-CAPS标记,构建了包括29个连锁群的分子遗传图谱,总遗传长度为4 084.5 cM,标记间平均距离为8.13 cM。定位了54个新标记位点,包括44个DArT和10个SSR标记,分布于除4D、6B、7B外的其他18条染色体上。用该分子遗传图谱和4个环境粒重表型值,共检测到7个影响粒重的加性QTL,分别位于1B、4B、5B、6A染色体,其中QGW4B-7、QGW5B-20和QGW6A-29在单环境分别定位和4个环境共同定位两种方法中均能检测到。QGW4B-7、QGW5B-12和QGW6A-29对粒重的贡献率均超过10%,为主效QTL。本研究结果可为小麦高产优质性状的QTL分析及分子标记辅助选择提供参考。     

大豆食心虫28SrDNA基因的克隆及表达分析

文章克隆并分析鳞翅目大豆食心虫(Leguminivora glycinivorella Matsumurav)28S 核糖体 RNA 基因(28SrDNA)全序列.系统进化树分析表明,大豆食心虫28SrDNA与其他鳞翅目昆虫的28SrDNA同源性较高.利用荧光定量PCR对28SrDNA在大豆食心虫不同生育时期和幼虫不同组织的表达量进行分析.结果表明,28SrDNA基因在成虫期表达量最高,卵中表达量最低;在幼虫脂肪体和睾丸的表达量最高,中肠和卵巢的表达量最低.为进一步干扰大豆食心虫28SrDNA基因表达,将28SrDNA序列片段亚克隆到RNAi载体L4440中,经PCR和酶切鉴定证明,成功构建表达大豆食心虫28SrDNA dsRNA的RNAi载体L4440-28SrDNA     

猪氨基肽酶在昆虫细胞的分段表达及鉴定

为研究猪的氨基肽酶(Porcine aminopeptidase, pAPN)的特异性功能区域及作用机制,将除去信号肽的pAPN分为SPA,SPB和SPC三段,利用一对同尾酶Xhol I和Sal I将信号肽分别与SPA,SPB和SPC相连接后再构建到杆状病毒表达载体pFastBacTM1上,通过杆状病毒-昆虫细胞表达体系进行蛋白表达.结果表明,经SDS-PAGE分析可见获得的目的蛋白与预期大小相一致,即SPA约为42 ku,SPB和SPC相同,约为56 ku的分泌蛋白;经western-blot鉴定三段蛋白均可与天然的pAPN抗血清特异性结合,表明已经成功获得SPA,SPB和SPC三段蛋白,可为进一步研究pAPN特异性功能区域奠定基础.     

拟南芥山奈酚糖苷对UV-B辐射的响应

以拟南芥(Arabidopsis thaliana)为材料,通过施加低强度(40μw·cm-2)和相对长时间(7 d)的UV-B辐射,研究拟南芥幼苗和成苗中三种山奈酚糖苷即山奈酚-3-O-鼠李葡萄糖基-7-O-鼠李糖苷(K1)、山奈酚-3-O-葡萄糖基-7-O-鼠李糖苷(K2)、山奈酚-3-O-鼠李糖基-7-O-鼠李糖苷(K3)含量及合成途径关键酶编码基因表达水平对UV-B辐射的响应.结果表明,拟南芥幼苗三种山奈酚糖苷含量均为成苗的10倍左右.经过7 d的UV-B辐射处理,拟南芥幼苗中山奈酚糖苷积累水平、合成途径关键酶编码基因chs和fls1的相对表达量均显著高于对照植株,山奈酚糖苷表现为响应UV-B辐射而积累.在拟南芥成苗和幼苗中三种山奈酚糖苷组合模式应对UV-B辐射的变化并不一致,这与其在防御机制中的不同角色有关     

嗜酸乳杆菌细菌素的分离纯化及表面活性剂对其活性的影响

从本研究室保藏的一株来自于凯菲尔粒的嗜酸乳杆菌培养基质中分离出具有抑菌活性的蛋白组分——细菌素,对该嗜酸乳杆菌所产生的细菌素的分离方法及表面活性剂对其抑菌活性的影响作用进行了研究。结果表明,嗜酸乳杆菌在添加了油酸的MRS培养基中培养16h后达到产细菌素高峰;对细菌素分离纯化研究包括三个步骤：硫酸铵沉淀、离子交换色谱（IEC）和疏水作用色谱（HIC）。不同类型的表面活性剂对细菌素的抑菌活性具有不同的影响。     

抗氧化剂对橡胶树胚状体农杆菌侵染效果的影响

以体细胞胚为侵染受体,通过在共培养基添加抗氧化剂来研究抗氧化剂对橡胶树农杆菌侵染效率的影响。结果表明,参试的4种抗氧化剂中,GUS基因瞬时表达效率高低顺序为硝酸银二硫苏糖醇L-半胱氨酸硫代硫酸钠,共培养基中添加20 mg/L硝酸银的GUS瞬时表达率最高,染色总胚数最高达96.7%,显著高于对照76.7%。因此,抗氧化剂的应用有助于提高体细胞胚的农杆菌侵染效率。     

速生高产品种‘热垦523’的试种研究

通过对2000年在海南、云南、广东等地建立的11个胶木兼优试种区无性系10 a的系统观察,结果表明:‘热垦523’是一个速生高产无性系。在热科院试验区,其生长较快,年均增速达7.99 cm,可提早1 a开割;产量高,年均株产1.98 kg,显著优于对照‘RRIM600’;在生产系比区,高于对照‘GT1’、‘云研77-4’等。白粉病和炭疽病抗性为中感和中抗,抗风性与‘RRIM600’相当,死皮率低于对照,胶乳生理基础较好。其主要缺点是抗寒性较差,2008年在寒害中表现与‘PR107’差异不大。鉴于该品种很高的单产,在海南、云南等地轻寒、轻风区有较大应用潜力。     

巴西橡胶树HbEBP1生物学特性、原核表达及氨肽酶活性分析

从巴西橡胶树中筛选到了Hb EBP1基因,该基因序列长度为1 462 bp,其中5′端非编码区长度为141 bp,3′端非编码区长度为133 bp,其c DNA序列具有完整的阅读框,编码395个氨基酸,推导的Hb EBP1分子量为43.596 ku,等电点位为6.45。生物信息学分析结果表明巴西橡胶树Hb EBP1具有3个保守结构域:增值相关蛋白2G4(PA2G4-like)、氨肽酶M24(APP_Met AP)、甲硫氨酸氨肽酶(MAP)结构域。对原核表达的Hb EBP1蛋白进行氨肽酶活性测定,发现体外表达的Hb EBP1蛋白没有Map活性。这些结果表明,橡胶树Hb EBP1基因并不存在氨肽酶活性。     

转基因橡胶树中载体骨架序列的初步研究

以橡胶树转基因材料为研究对象,首次基于载体左右边界序列设计的特异引物进行载体骨架序列的初步PCR检测,结果表明,15个转基因阳性株系中有5个和2个株系分别含有左侧和右侧的边界序列,占33.3%和13.3%,结合这些株系PCR产物的序列分析结果进一步证实除T-DNA区以外的载体骨架序列确实整合到这些株系的植物基因组中。同时对载体骨架序列存在的弊端及可能的解决途径做了相应的分析。     

橡胶树胶木兼优品种热垦525适应性试种研究

以橡胶树胶木兼用型品种作为选育种的目标,于2000年始在海南、云南、广东等地建立了11个胶木兼优试种区,经过10年的系统观察结果表明,热垦525在各试种区均表现良好,适应性较强.在热科院高级系比区,热垦525生长快,年均增速达8.23 cm,可较对照提前1.5年开割,首年一次性开割率高,达到58.79％,年均株产1.62 kg/株；抗平流型寒害能力较强,2008年平均寒害级别为1.44级,与对照RRIM600相当,优于PR107;白粉病和炭疽病抗性均为中抗；风害断倒率与死皮率均优于对照,高产的生理基础好,适应性好.在其余试种区亦表现出相似结果.综合考虑,建议在海南、广东、云南中风、中寒以下气候类型区进一步扩大种植面积.