球孢白僵菌DNA甲基转移酶基因Dim-2的克隆及其表达分析

本研究运用RACE技术,从球孢白僵菌中克隆出完整的DNA甲基转移酶基因Dim-2的编码区序列。该基因c DNA全长4021 bp,5′端非翻译区283 bp,3′端非翻译区303 bp,开放阅读框(ORF)3429 bp,编码1142个氨基酸。蛋白理论分子量为128 k D,理论等电点为6.13。结构域分析显示,该基因编码蛋白含有1个BAH结构域和合成5-甲基胞嘧啶的活性区域。Real-time PCR与HPLC检测表明,球孢白僵菌DNA甲基化程度会随着其生长发育的变化而不断改变。结果显示,球孢白僵菌Dim-2基因的转录表达量与基因组DNA的5-甲基胞嘧啶百分含量在菌体培养初始产孢阶段(即培养第7 d),均出现了1个低谷。这可能意味着球孢白僵菌Dim-2基因所引起的DNA甲基化与其生长发育之间具有内在的联系。本研究将为进一步探索DNA甲基化在虫生真菌生长发育中具体功能机制奠定基础。     

海葡萄蕨藻多糖ASE提取工艺研究

为研究海葡萄多糖提取的工艺条件,以蒽酮-浓硫酸法测定粗多糖中的总糖含量为指标,采用正交试验L9(33)结合加速溶剂萃取技术(ASE)对海葡萄多糖提取工艺进行优化.结果显示,海葡萄多糖的最佳提取工艺条件为温度120℃、静态提取2次、每次35 min,提取温度对多糖提取率具有极显著性影响.在最优条件下,海葡萄多糖得率为51.03(±0.62)％,与传统水提醇沉提取法(多糖提取率30.21％)相比,该提取工艺具有操作简便、缩短提取时间、节能耗、多糖得率高等优点,是一种快速经济实用的新型工艺.     

美国花旗松心材与边材化学组成、结构及纤维性质1）

以美国花旗松心材与边材为研究对象,分析比较它们的化学组成、结构和纤维性质的差异。结果表明：美国花旗松心材的热水抽提物、冷水抽提物、1％NaOH抽提物、苯醇抽提物的质量分数分别高出边材1．82％、3．10％、1．30％、2．88％。心材与边材的克拉森（Klason）木质素质量分数分别为26．54％和26．10％,综纤维素质量分数分别为71．11％和75．17％,α纤维素质量分数分别为46．78％和50．32％,半纤维素质量分数分别为24．33％和24．85％,聚戊糖质量分数分别为8．97％和8．51％。美国花旗松心材与边材纤维素、木质素和半纤维素红外光谱特征峰的变化与化学方法测定结果一致,心材与边材纤维的平均长度分别为2863、3463μm,长宽比分别为153和210,壁腔比分别为0．46和0．78,结晶度分别为51．48％和50．35％。综合来看,美国花旗松是制浆造纸和纤维板生产的良好原料。     

马尾松毛虫种群球孢白僵菌自然流行病流行菌株的异质性

2006年在皖东明光市紫阳林场,马尾松毛虫Dendrolimus punctatus种群中发生由球孢白僵菌Beauveria bassiana引起的流行病。本研究通过4对引物,对采自流行区的44株球孢白僵菌进行28S rDNAⅠ型内含子分析,以探讨流行菌株的遗传多样性及遗传类型。结果显示,存在8种不同内含子单倍型。各单倍型所占比例不同,其中BABA型占据优势地位,为79.55%;BCBC和BCBA型次之,皆为4.54%;而BAAA等5种单倍型仅各占2.27%。表明引起自然流行病的球孢白僵菌是一个异质性的群体。从生态适应性的角度出发,在球孢白僵菌种群中占据主导地位的BABA型菌株,今后可以作为明光地区生防菌株的重点筛选对象。     

小菜蛾高致病力玫烟色棒束孢菌株的筛选

小菜蛾(Plutella xylostella)是全球十字花科蔬菜上的重要害虫,并且对常用的化学杀虫剂产生了严重的抗性,每年给农业蔬菜带来了巨大损失。本研究选择分离自不同鳞翅目的 8个玫烟色棒束孢(Isaria fumosorosea)菌株,依据菌株生长速度、产孢量、萌发率和产胞外蛋白酶水平等生物学性状进行初步筛选。在此基础上,筛选出生物学性状优良菌株RCEF2180、RCEF3423、RCEF3496对小菜蛾幼虫进行生物测定。最后筛选出了生长速度快、产孢能力强、萌发率高、胞外蛋白酶产酶水平高及杀虫效果好的玫烟色棒束孢RCEF3423菌株。该菌株对小菜蛾的校正死亡率达96.16%,感染率达91.67%,在浓度为1×107孢子/mL时的半致死中时仅为4.58 d,显示出对小菜蛾的极强毒力,因此该菌株在小菜蛾的生物防治中具潜在的应用价值。     

不同森林生态系中球孢白僵菌遗传多样性比较研究

利用ISSR分子标记技术,对采集自安徽省滁州市天然次生林——琅琊山国家森林公园和宣城市人工马尾松纯林——麻姑山林场球孢白僵菌种群的遗传多样性水平和种群遗传结构进行了比较分析。用7个引物分别对2个种群共222株球孢白僵菌菌株进行扩展,共得到58个清晰的扩增位点,其中多态位点56个,多态位点百分率（PPL）为96.55%,Nei＇s基因多样性（He）为0.2993,Shannon信息指数（I）为0.4593,种群间的基因分化系数（Gst）为0.1283,基因流Nm=3.3984;可以看出,2个种群间的基因流较小,遗传分化较大,为12.83%,这可能是由于人为选择和基因流障碍引起的;琅琊山白僵菌群体（PPL=96.55%,He=0.2781,I=0.4299）遗传多样性水平较高;麻姑山白僵菌群体（PPL=93.10%,He=0.2552,I=0.3825）遗传多样性水平较低。比较研究了采集自大别山原始林中球孢白僵菌菌株的遗传多样性（PPL=81.00%,He=0.3187,I=0.4782）,可见生态环境复杂的原始林中球孢白僵菌遗传多样性最高,天然次生林种群次之,人工纯林种群最小。利用Nei’s遗传距离构建琅琊山和麻姑山白僵菌个体间的遗传关系树状图,由UPGMA聚类分析可知,不同采集地的菌株聚为一类。     

高雄山虫草无性型-细脚拟青霉原生质体制备及其再生的初步研究

对细脚拟青霉RCEF3456菌株原生质体的形成和制备有影响的多个因素,如菌丝生长时间、酶种类、酶浓度以及酶解时间等进行研究。结果表明,得到制备原生质体的最佳产量(8.0×107个.mL-1)的方法是培养18 h的菌丝、1%溶壁酶 1?llulase"Onozuka"R-10 1%蜗牛酶、酶解2.5 h,而且,酶解过程都是在30℃条件下进行的;同时,对原生质体的形成以及再生过程进行显微观察,再生率为1.2%。     

温度和盐度对羊鲍胚胎发育及幼虫发育的影响

为探究水温和盐度对羊鲍胚胎发育和幼虫发育的影响,以人工驯化后的野生羊鲍为实验材料,采用温度、盐度单一和双因子组合方法设计实验。结果表明,羊鲍孵化率和成活率受温度、盐度影响显著,28°C时,胚胎发育时间最短,孵化率最高,26°C时,幼虫发育时间最短,成活率最高。胚胎发育适宜温度为24~28°C,最适温度为26~28°C。盐度为24时,羊鲍胚胎发育和幼虫发育时间最短,孵化率和成活率最低;盐度分别为30和32时,孵化率和成活率最高。胚胎发育和幼虫发育的适宜盐度为28~32,最适盐度为30~32。温度盐度交互作用对羊鲍孵化率影响差异不显著,对成活率影响差异显著。通过响应曲面模型优化,得出温度为24.61°C,盐度为32时,孵化率和成活率均达到最大值,分别为95.32%和81.20%,满意度为0.848。研究表明,羊鲍胚胎发育和幼虫发育对温度、盐度的敏感性不同,对高温高盐的耐受性强于低温低盐。     

东寨港翡翠贻贝、红肉河蓝蛤和光裸星虫消化酶的研究

对东寨港3种不同生长阶段几种大型底栖生物的消化酶活力进行了研究，结果表明，淀粉酶、纤维素酶、脂肪酶和胃蛋白酶活力随着个体在不同底栖生物生长阶段中呈现出不同的变化：（1）翡翠贻贝（Perna viridis Linnaeus)消化酶活力的研究结果表明，淀粉酶、纤维素酶和脂肪酶活力随着个体的生长不断增大。（2）红肉河蓝蛤（Potamocorbula rubromuscula Zhuang and Cai)的研究结果表明，淀粉酶，胃蛋白酶和脂肪酶活力随着个体的生长不断减小，纤维素酶活力随着个体的生长不断增大。（3）光裸星虫（Sipunculus nudus Linnaeus)的淀粉酶和纤维素酶的活力随着个体的增大而增大，脂肪酶活力随着个体的增大而减小。     

粉拟青霉几丁质酶产酶条件的研究

对筛选的产几丁质酶的粉拟青霉(Paecilomyces farinosus)菌株RCEF0622,进行单因子试验以研究其产酶发酵条件.结果表明,该菌株产酶的适宜条件是胶体几丁质浓度为1.5%,培养基初始pH值7.0,接种量6%,100 mL装液量为10 mL,温度19℃,培养时间36 h.