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为研究盖塔病毒(GETV)致病机制,需搭建可靠的盖塔病毒(GETV)反向遗传操作平台。首先构建GETV/HuN1株的全长感染性克隆质粒,并在nsP4基因与C基因之间或E1基因与3′UTR之间插入亚基因组启动子26S和报告基因EGFP,将3个重组质粒分别转染至BHK-21细胞中,拯救病毒,鉴定重组病毒和外源基因稳定性,测定病毒滴度并绘制生长曲线。以重组质粒pACYC-177-GETV为模板进行RT-PCR扩增,结果显示,GETV每个蛋白基因均能正确扩增出相应条带。IFA鉴定结果显示,E2与6K蛋白抗体能与rGETV特异性结合。将EGFP基因分别插入到C基因的上游或E1基因的下游,产生报告病毒rGETV-EGFP/C和rGETV-EGFP/E1。在2种报告病毒感染的BHK-21细胞上均能观察到EGFP高表达,将报告基因插入E1基因下游,可保持其更高的稳定性。此外,生长曲线显示,重组病毒具有与亲代病毒相似的生长速度。综上,GETV反向遗传操作平台的成功建立为研究GETV蛋白功能和研发疫苗奠定了基础。 相似文献
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为揭示陆均松花芽分化阶段的生理生化变化规律,本研究以不同时期陆均松大小孢子叶球(Dacrydium pectinatum)为材料,测定其在陆均松大、小孢子叶球发育过程中蛋白质、碳水化合物及叶绿素含量的变化。结果表明,在陆均松小孢子叶球花粉母细胞发育前,蛋白质、碳水化合物及叶绿素含量均呈现上升趋势,这说明了在小孢子发育前期,这些指标有利于小孢子叶球的发育。在陆均松大孢子叶球发育期间,可溶性糖和可溶性蛋白含量在胚珠形成期间有上升趋势,该结果说明了可溶性糖和蛋白质含量的增加有利于胚珠的形成。本研究为陆均松花芽分化的分子研究提供了参考基础。 相似文献
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免毛蒿系菊科兔毛蒿属植物兔毛蒿FilifoiumSibiricum(L)Kitam(TanacltumSbirocumL .)别名线叶菊、疔毒花。在祖国医药史上及当代国内外文献上尚未有进入草药之列。但在民间用于人的清热解毒、抗菌消炎、治疗疖肿、痈、疮、中耳炎等外科疾病已有报道。在兽医上应用于动物疾病的治疗报道尚无见载。为此 ,我们应用了现代科学方法对草药“兔毛蒿”的性状、有效成份、抑菌作用等进行了一些初步的试验研究 ,以便将草药“兔毛蒿”引为治疗动物病提供科学依据。现将试验结果报告如下。1 材料与方法1.1 … 相似文献
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鹿振起 《中国预防兽医学报》1983,(2)
对流免疫电泳技术是 Graber 氏等(1953)将琼脂扩散和免疫电泳结合进行抗原抗体的检测。它具有方法简便,特异性强和出现结果快速等优点。其原理是溶液中的带电质点,在电场的作用下向着相反的电极移动称为电泳。由于抗原在偏碱的溶液中带负电荷,在电场中向正极移动;而抗体球蛋白由于接近等电点,借内渗流的作用与抗原相反缓慢的移向负极。通过将抗原抗体孔作以适 相似文献
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今后我国农业机械化将根据农业结构调整的新形势 ,合理安排发展布局 ,重点抓好粮食、经济作物以及养殖业的机械化生产。粮食作物机械化生产重点在小麦、水稻、玉米三大作物。当前 ,要在巩固小麦生产机械化的基础上 ,加大水稻、玉米生产机械化的工作力度 ,争取早日在水稻栽培、收获和玉米收获环节实现重大突破。目前 ,我国经济作物机械化发展潜力较大 ,农民需求也大。今后一个时期要突出抓好大棚蔬菜、设施农业等经济作物机械化生产。在发展养殖业机械化方面 ,将重点围绕节食型、节粮型畜牧业的发展 ,做好秸秆收获青贮和秸秆氨化处理机械化工… 相似文献
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防止代理服务器、有效控制病毒的传播和防止黑客对用户计算机的攻击,以及用户上网行为的管理与控制,是目前网络管理中实际遇到的问题,在充分考虑了这些问题的基础上,设计和实现了基于安全策略的上网用户管理系统,以增强网络安全性和易管理性. 相似文献
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