天坛株痘苗病毒基因缺失弱毒株的构建及鉴定

本研究旨在通过敲除部分与天坛株痘苗病毒(vaccinia virus Tiantan strain,VTT)毒力和宿主范围等相关的复制非必需基因,并结合双标记筛选及外源筛选标记敲除技术,构建多基因缺失VTT弱毒株。人工合成7对重组臂,结合痘病毒早晚期复合强启动子pE/L和外源筛选标记增强型绿色荧光蛋白(Enhance green fluorescent protein,EGFP),构建穿梭载体质粒pTC-EGFP、pTA35-EGFP、pTA66-EGFP、pTE-EGFP、pTB-EGFP、pTI-EGFP和pTJ-EGFP。将上述质粒依次与VTT或基因缺失VTT共转/感染BHK细胞,并通过同源重组和荧光蚀斑筛选方法,逐一敲除拟缺失基因片段(TC:TC7L^TK2L;TA35:TA35L;TA66:TA66R;TE:TE3L;TB:TB13RTK2L;TA35:TA35L;TA66:TA66R;TE:TE3L;TB:TB13R^TB14R;TI:TI4L;TJ:TJ2R)。利用Cre/Loxp系统实现对外源筛选标记的敲除,最终获得天坛株痘苗病毒基因缺失弱毒株TTVAC7,并运用PCR方法对TTVAC7进行鉴定和遗传稳定性检测。结果表明,本研究成功构建了缺失7个目的片段的天坛株痘苗病毒弱毒株TTVAC7,且该弱毒株具有良好的遗传稳定性。     

苦参碱对奶牛乳腺上皮细胞增殖、凋亡及抗氧化能力的影响

【目的】探究苦参碱对体外培养的奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)增殖、凋亡及抗氧化能力的影响。【方法】利用含0(A组),25(B组),50(C组),75(D组)和100μg/mL(E组)苦参碱的培养基培养奶牛乳腺上皮细胞。通过四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测BMECs活性,采用流式细胞仪(AnnexinV/PI双染法)检测苦参碱对BMECs凋亡的影响,并检测苦参碱对BMECs抗氧化酶活性及丙二醛(MDA)含量的影响,采用real-time PCR对BMECs中Caspase-3、p53、STAT1和SOCS3基因的相对表达量进行检测。【结果】用药5d时,低质量浓度(25和50μg/mL)苦参碱对BMECs增殖具有促进作用,高质量浓度(75和100μg/mL)苦参碱对细胞增殖具有抑制作用;B~E组BMECs的凋亡率均极显著高于A组(P0.01);B~E组BMECs培养上清液中NO和乳酸脱氢酶(LDH)水平明显高于A组。B~E组BMECs的过氧化氢酶(CAT)活性均比A组高,其中C组极显著高于A组(P0.01);B~E组的谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性均极显著高于A组(P0.01),E组的超氧化物歧化酶(SOD)水平极显著高于A组(P0.01),各组MDA含量无显著性差异。与A组相比,苦参碱上调了B~E组BMECs中Caspase-3、p53、STAT1和SOCS3基因的相对表达量。【结论】低质量浓度苦参碱能够促进BMECs增殖,高质量浓度苦参碱则会抑制BMECs增殖;不同质量浓度苦参碱均可提高BMECs的抗氧化能力,其中50μg/mL苦参碱提高BMECs抗氧化能力的效果最明显。     

2014年3月以来我国生猪生产及猪肉消费相关数据信息

1生猪价格 发改委数据显示，国内生猪价格在经历了连续22周下跌后，从五一节开始，出现较大幅度上涨。截至2014年5月14日，全国大中城市生猪出场价格13.04元/kg，比节前（2014年4月23日）上涨18.0%；全国主要批发市场玉米价格为2.42元/kg，比上周上涨0.8%；猪粮比价为5.39∶1，连续17周低于6∶1的盈亏平衡点；全国二元母猪销售价格为28.83元/kg，比上周上涨1.2%（图1）。据农业部重点监测的50家批发市场猪肉价格数据显示，2014年第19周（2014年5月5～11日），猪肉周均价为16.73元/kg，环比涨4.9%，为连续11周下跌后首次回升。猪肉价格1月份延续波动下降，于4月27日降至年内最低点15.73元/kg，与2010年7月份水平基本持平，之后降速有所放缓。目前，猪肉价格止跌略升，5月11日，全国批发均价为17.32元/kg，与4月27日相比，上涨10.7%（图1）。     

园林植物春季最佳观赏期调查研究

目前,由于缺乏准确的园林植物最佳观赏期的资料,导致优秀的规划设计方案难以落到实处,园林景点建成之后景观效果大打折扣。针对以上问题,作者采用实地调查观测的方法对园林植物春季最佳观赏期和最佳观赏顺序进行了研究。记录整理典型地点园林植物的最佳观赏期和最佳观赏顺序,为园林规划设计、植物配置和养护管理提供科学的参考依据。