鸡软骨细胞体外分离培养鉴定以及过表达miR-15a对软骨细胞的影响

为分析miR-15a在肉鸡不同组织中的表达情况,并探究过表达miR-15a对体外培养鸡软骨细胞的影响。本研究首先通过倒置显微镜观察、PCR、凝胶电泳和甲苯胺蓝染色对体外分离培养的软骨细胞进行鉴定。通过实时荧光定量PCR检测miR-15a在肢体内外翻畸形(valgus-varus deformity, VVD)组和健康组肉鸡中(各3只)各组织的表达量。之后通过CCK8和EDU方法分析软骨细胞过表达miR-15a后细胞增殖情况。软骨细胞转染miR-15a mimics后,通过qPCR检测软骨细胞的标志基因Collagen-2、Aggrecan、Collagen-10,成熟分化基因Runx2、Sox9、VEGF、MMP9,炎性因子IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α、TGF-β3以及凋亡基因Fas、FasL、Bcl-2的表达量。并构建FKBP5 3'UTR的野生型载体和突变型载体,通过双荧光素酶检测报告检测miR-15a与FKBP5的靶向关系。结果表明,本研究所用的胰蛋白酶、Ⅱ型胶原酶和透明质酸酶联合消化法成功分离得到状态良好的软骨细胞。荧光定量结果显示,miR-15a在各组织中均有表达,与健康组相比,miR-15a在VVD组的肝(P < 0.01)、脾(P < 0.05)、胸腺(P < 0.01)中的表达量显著升高,在心和胸肌组织中的表达量显著降低(P < 0.01)。CCK8与EDU分析结果显示,与NC组相比,过表达miR-15a组软骨细胞增殖速度显著降低(P < 0.01),增殖细胞数量显著减少(P < 0.01)。qPCR结果显示,与mimics NC组相比,miR-15a mimics组的软骨细胞标志基因Aggrecan、成熟分化基因Sox9、Runx2表达量显著降低(P < 0.05),Fas基因表达量极显著上升(P < 0.01),FasL基因和抗凋亡基因Bcl-2极显著下降(P < 0.01)。成功构建了FKBP5 3'UTR野生型和突变型载体,双荧光素酶检测报告结果显示预测的靶基因FKBP5与miR-15a没有靶向关系。本研究成功分离并鉴定了鸡软骨细胞,过表达miR-15a抑制鸡软骨细胞增殖、成熟和分化并促进细胞凋亡。     

马齿苋对皖西白鹅早期生长及小肠生理的影响

为了探讨日粮中添加马齿苋对皖西白鹅早期生长及消化道生理参数值的影响,选取1日龄健康皖西白鹅180只,随机分为3个处理,每个处理3个重复,每个重复20只试验鹅,分别饲喂添加0、5%、10%马齿苋的日粮,采用饲养试验和屠宰试验,研究马齿苋对皖西白鹅2~7周龄生长、小肠pH值及部分消化酶活性的影响.结果表明:与对照组相比,日粮中添加5%和10%的马齿苋组鹅的7周龄体重分别提高了7.35%(P>0.05)和12.52%(P>0.05);试验组鹅十二指肠和空肠的pH值高于对照组,但回肠的pH值低于对照组;马齿苋能显著提高小肠淀粉酶和蛋白酶的活性,但对小肠脂肪酶活性的影响不明显.     

浅谈肉鸡胚胎发育与腿病发生的关系

肉种鸡从育成到产蛋的料位变化、限饲方式、饲料中是否添加有机微量元素等,以及孵化器中能够导致胚胎产生应激的不良微循环,都是影响腿病的重要因素.因此,在饲养过程中肉鸡发生腿病时,不仅要从本场的管理中查找原因,还应重点考虑肉种鸡的管理、营养及种蛋孵化对后代腿病的影响.     

牛胚胎移植受体的选择方法

牛的胚胎移植就是把供体牛的胚胎移植到适宜的受体牛子宫内 ,使之附植、妊娠并分娩出优秀犊牛的技术。而母牛的发情、排卵、受精、黄体的形成、胚胎的发育、运行、附植、妊娠以及分娩是一个复杂的、有序的生理系统。所以 ,把供体牛的胚胎移植到具有相同生理环境的受体牛子宫内尤为重要。其中 ,移植所用的胚胎绝大多数是发育到第 7ｄ的桑椹胚或囊胚 ,因此被移植到子宫内的胚胎并不立即附植 ,而要游离存在 13～ 2 3ｄ ,与子宫发生紧密联系要在受精后 6 0ｄ(45～ 75ｄ) [1] 。另外 ,胚胎死亡也大多发生的妊娠最初的 18ｄ[2 ] 。故保证胚胎在子…     

猪囊尾蚴抗原的免疫化学研究

应用琼脂双扩散(DID),免疫电泳(IEP),聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)对猪囊尾蚴的匀浆抗原和囊液抗原进行分析。结果表明,两种抗原间存在相同的抗原成份,囊液的免疫化学性质优于匀浆抗原,并从免疫学和生物化学角度初步探索了囊液抗原和匀浆抗原中蛋白质之间的相互关系及主要蛋白质组分。     

波尔山羊胚胎移植技术研究与大规模推广应用效果

2003年11～12月份,通过对1 100多只本地山羊进行大规模的波尔山羊胚胎移植技术研究与推广,取得如下结果采用CIDR+FSH方法,对66只周岁波尔山羊进行超数排卵处理,63只超数排卵有效,有效率达到95.45%;平均每只羊冲取胚胎15.35枚,最高个体获得43枚胚胎;采用CIDR+PMSG方法对本地山羊进行同期发情处理,24小时内发情率达到87.67%;对受体羊单胚移植后2个情期的不返情率62.76%,实际产羔率为51.46%.试验结果还表明,受体羊与供体羊的发情时间同步和12小时和24小时以内,对胚胎移植受胎率差异不大,受体羊第二次手术与第一次手术移植,对产羔率影响不大.通过波尔山羊胚胎移植技术研究和推广,建立了规模化胚胎移植的技术体系.     

我国兽用生物制品研制、生产、流通领域中的生物安全问题和应该采取的措施

生物安全是当前人们普遍关心的问题,它的影响涉及国家安全、人类社会及生态环境等诸多方面,其中由病原微生物引起的生物安全问题直接关系到动物疾病和人类健康,其重要性尤为突出,当前一些传染病的流行与我们的生物安全防范意识薄弱,措施不当有着直接的关系,必须引起我们的高度重视。我国兽用生物制品生物安全的管理问题主要表现在以下两个方面:一是如何进一步加强对兽用疫苗的质量管理和流通领域的监控,二是严格规范和控制从事动物病原微生物操作的实验室生物安全条件。对前者,我们有相应的法律法规和管理办法,关键的问题是如何进一步落实的…     

绿色贸易壁垒对我国禽肉产品出口的影响与应对措施

绿色贸易壁垒又称环境壁垒，是指在国际贸易领域，发达国家凭借科技优势，以维护生产和消费安全、保护生态环境为借口，有意规定繁杂而苛刻的技术、卫生以及环保标准，并经常变更，使外国产品难以适应，从而形成阻止商品进口或者提高进口商品成本、削弱其竞争力的贸易壁垒。     

养羊生产发展特点及应注意的几个问题

<正>养羊生产是畜牧业乃至整个国民经济的重要组成部分。养羊生产的发展对于丰富市场供应,满足人们的生活需要及出口创汇都具有积极作用。新中国成立以来,养羊生产随着国民经济的发展步伐,经历了一个曲折过程,但从综合生产能力和整体水平看仍然取得长足进展。 作为一种经济活动,养羊生产与畜牧业内部其它畜禽生产有着紧密的联系。改革开放以来,畜牧业连续13年取得好成绩。1991年,肉类总产量达到3144.7万吨,蛋类921.8万吨,奶类525.7万吨,比1978年分别     

白羊草灌丛草地种群生态位的研究

运用以Shannon-Wieren指数为基础的生态位宽度计测公式和Pianka的生态位重叠计测公式,在土壤水分、土壤pH值、土壤全氮含量3个资源维上研究白羊草灌丛草地主要植物种群生态位宽度和生态位重叠关系。建群种白羊草的平均生态位最高,为0．905;达乌里胡枝子的生态位宽度仅次于白羊草。表明白羊草、达乌里胡枝子具有最强的耐受北方寒冷干燥及家畜放牧利用的能力。白羊草在3个资源维上同其他种群的生态住重叠值都较高,表明其在群落中具有较强的占据资源优势能力。因此,在对退化白羊草灌丛草地植被恢复时,白羊草和达乌里胡枝子是首选草种。