金黄色葡萄球菌诱导牛原代乳腺上皮细胞的凋亡

【目的】观察金黄色葡萄球菌能否诱导牛原代乳腺上皮细胞发生凋亡。【方法】先以新鲜牛奶为材料分离培养牛乳腺上皮细胞并鉴定,然后用金黄色葡萄球菌侵染牛乳腺上皮细胞,采用普通光镜和扫描电子显微镜观察金黄色葡萄球菌诱导牛乳腺上皮细胞凋亡的形态学变化;用流式细胞仪（Annexin V/PI双染法）定量检测金黄色葡萄球菌感染对牛乳腺上皮细胞凋亡的诱导作用;RT-PCR检测细胞凋亡通路中关键蛋白caspase 3和caspase 8的变化情况。【结果】从乳汁中分离的细胞经原代培养后,细胞呈典型的铺路石状,细胞表层可产生大小不等的乳滴,RT-PCR法扩增出乳腺上皮细胞的骨架蛋白8特异性条带;免疫荧光细胞染色法结果显示分离培养的牛乳腺上皮细胞表达角蛋白8;金黄色葡萄球菌感染牛乳腺上皮细胞3 h后,可诱导牛乳腺上皮细胞发生凋亡,表现为细胞核皱缩,染色质边缘化和细胞浆内空泡增多等典型凋亡特征;Annexin V/PI双染法检测后发现,与对照组相比,感染组细胞凋亡率明显升高,差异极显著（P﹤0.01）;与对照组相比,感染组细胞caspase3及caspase 8表达量明显增高。【结论】金黄色葡萄球菌可以诱导牛原代乳腺上皮细胞凋亡,具有细胞凋亡的典型形态特征和生化特性,凋亡通路可能涉及caspase 3和caspase 8参与的外源性凋亡途径。     

大数据时代下的经管类实验教学改革对策

伴随着我国市场经济的不断发展,现代化企业对经管类专业工作人员的专业素质要求也越来越高,本文将主要针对大数据时代发展背景下,我国高职院校在经管类专业实验教学改革方面都采取了哪些应对措施,能否对大数据资源进行更好的开发和利用,提高经管类专业学生的实践技能水平。     

黑龙江省发展大型现代农机合作社情况

黑龙江省作为我国粮食产量第一大省,近年来在政策环境、自然条件和资源优势方面都有很大的发展空间,特别是大型现代农机合作社的建设发展,非常适合我省现代化大农业的发展要求。本文分析了我省发展大型现代农机合作社的优势、条件和作用,制定未来发展目标。     

基于品牌营销视角下农业企业经营管理研究——评《农业企业管理》

新的经济形势下,农业企业仅仅在生产研发上下功夫已经很难在市场上站稳脚跟,俗话说,“酒香不怕巷子深”,但在如今的信息时代,光有好的产品,却不重视树立自己的品牌形象,不注重品牌营销,这样的企业将很难形成规模化、长久性的发展格局。当今的农业企业经营管理,不能只耕耘制度设计、资源管理、生产运作等企业内部硬件软件,更需要将品牌营销的意识注入到企业的日常运营管理中,把产品品牌深深地刻印在消费者心里,如此,才能筑起企业成长壮大的生命线。     

不同原料生物炭的改性及其吸附/钝化Cd(Ⅱ)效果

综述了生物炭原料来源、改性方法、Cd(Ⅱ)吸附机理以及施加生物炭对土壤pH值、C/N和镉形态的影响,提出今后应加强(改性)生物炭修复Cd(Ⅱ)污染土壤的田间实验研究,长期跟踪施加(改性)生物炭后土壤Cd(Ⅱ)形态、土壤养分、微生物群落组成和结构等的变化。     

城市化进程中工业废弃地景观更新研究

随着城市化进程的不断发展,我国随之产生了大量的工业废弃地,这些工业废弃地是宝贵的历史遗存,该文论述了用现代景观设计的手段对其进行更新改造,总结了城市化进程中的工业废弃地景观更新方法,结合场地所在地区的地域特征和历史文化背景,设计出具有民族特色、时代特征、工业特点的城市景观,满足人们对绿色的渴望,完善城市的生态系统,从而展示工业遗存的历史文化特征,引起人们对工业文明的追忆。     

辽宁省非物质文化遗产文化生态保护区建设路径研究

我国非物质文化遗产保护工作在实践中普遍认同的一项原则就是整体性保护,建立文化生态保护区则是该原则的有效方法之一。本文探讨辽宁省非物质文化遗产文化生态保护区的建设,将国内外文化生态研究作为理论基础,将国内文化生态保护区建设的思路与做法当作参照,讨论文化生态保护区建设中存在的问题,并从多角度探索文化生态保护区建设的科学性、可行性与持续性,为辽宁省文化生态保护区建设提供建议。     

蜚蠊卵荚内寄生啮小蜂的繁殖实验

作者用啮小蜂对烟色大蠊,日本大蠊、美洲大蠊和德国小蠊4种蜚蠊卵荚进行接蜂试验。结果表明:除德国小蠊卵荚外,其它8种卵荚接蜂成功,寄生率分别为45.08％、53.06％和64.04％,羽化率分别为11.69％、28.57％和47.19％,在卵荚内平均发育期分别为64.63、66.79和48.38天。美洲大蠊卵荚寄生率高,羽化出雌蜂数较多,发育历期短,容易采集。因此,作者认为实验窒繁殖寄生啮小蜂应首选美洲大蠊。     

牛白细胞介素-17真核表达载体的构建及在牛乳腺上皮细胞中的表达

【目的】在体外分离培养牛乳腺上皮原代细胞,并构建牛白细胞介素-17(bIL-17)基因真核表达质粒,观察重组质粒在牛乳腺上皮细胞的表达.【方法】提取牛脾脏细胞总RNA,通过RT-PCR扩增bIL-17,将bIL-17连入pMD19-T进行测序,测序成功后将bIL-17插入含有增强型绿色荧光蛋白报告基因的真核表达质粒pEGFP-N3上,构建真核表达质粒pEGFP-N3-bIL-17.用脂质体法将pEGFP-N3-bIL-17质粒转染于牛乳腺上皮细胞,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白在细胞中的表达,RT-PCR检测bIL-17基因在细胞内的转录,定量ELISA检测bIL-17蛋白在细胞内的表达情况.【结果和结论】成功构建具有绿色荧光和新霉素抗性的双选择标记的牛白细胞介素-17真核表达载体,并可在牛乳腺上皮细胞成功表达.     

愈痫灵方对PTZ致痫大鼠脑组织海马CA3区TLR4、NF-kBP65、TNF-α表达的影响

目的 探讨愈痫灵方对痫性大鼠脑组织海马区炎性反应因子表达的影响。方法 取健康雄性SD大鼠120只,从中随机选取10只作为正常对照组,10只作为假手术组,腹腔注射生理盐水;其余大鼠用戊四氮造模,将符合模型标准的大鼠随机分为愈痫灵组、丙戊酸钠组和模型组,每组10只。灌胃后采用免疫组织化学方法检测TLR4、NF-kB P65和TNF-α在海马CA3区的表达变化。结果 与正常组、假手术组比,模型组、愈痫灵方组、丙戊酸钠组均上调TLR4、NF-kB P65和TNF-α在脑组织海马CA3区的表达（P<0.01）,但后两组表达均低于模型组（P<0.05）,且愈痫灵方组抑制TLR4和NF-kB P65在脑组织海马CA3区表达的作用优于丙戊酸钠组（P<0.05）,而TNF-α在脑组织海马CA3区的表达两组间无明显差异（P>0.05）;结论 愈痫灵方可抑制PTZ致痫大鼠脑组织海马CA3区TLR4、NF-kB P65和TNF-α的表达,对癫痫反应中炎性因子的表达有一定的抑制作用。