仿刺参腐皮综合征病原灿烂弧菌RPA-Cas13a检测方法的建立

为预防和控制灿烂弧菌引发的仿刺参腐皮综合征，促进仿刺参养殖业的健康可持续发展，利用LwCas13a中特异性CRISPR RNA(crRNA)与靶RNA结合后可激活Cas13a蛋白对外源RNA分子附属切割活性的特征，结合重组酶介导的聚合酶扩增技术(RPA),建立1种针对灿烂弧菌gyrB基因的快速、灵敏、特异的定量检测方法——RPA-Cas13a。RPA-Cas13a可实现在37℃恒温下、60 min内对灿烂弧菌的快速实时检测。灵敏度测试结果显示，RPA-Cas13a检测限为550拷贝/μL(gyrB),与荧光定量PCR的检测灵敏度水平一致；特异性测试结果表明，RPA-Cas13a对创伤弧菌、哈维氏弧菌、鳗弧菌等其他弧菌及产黑假交替单胞菌、嗜水气单胞菌、迟缓爱德华氏菌等常见水产动物病原菌均无交叉反应，特异性较强。RPA-Cas13a方法对仿刺参体表黏液(32份)、养殖池塘水体(15份)和表层沉积物(10份)等57份环境样本的阳性检出率为8.77%,与传统荧光定量PCR方法的检出一致性高(Kappa=1.00),无统计学差异(P>0.05)。试验结果表明，灿烂弧菌的RPA-Cas13a...     

连续光照条件下LED红蓝光供光模式对紫叶生菜生长和品质的影响

为了探究连续光照(continuous light,CL)条件下发光二极管(light emitting diode,LED)红蓝光供光模式对紫叶生菜生长、产量和品质的影响，在环境可控的人工光植物工厂内，设置6组不同LED处理，分别为常规光照-光子通量密度(spectral photon flux density,SPD)恒定(RB,16 h/8 h)、CL和SPD恒定(RB’,24 h/0 h);CL和SPD发生规律性变化(S1和S2：交错光照处理，24 h周期内分别以蓝光、红蓝光、红光的顺序交替照射1次和2次；A1和A2：交替光照处理，24 h周期内蓝光和红光分别交替照射1次和2次)，其中5个CL处理之间红蓝光量子数相同，光谱光强均为200μmol·m^-2·s^-1。对不同处理模式下紫叶生菜的生长、产量和品质进行测定。结果表明，CL显著增加了生菜地上部产量，其中红蓝光交替处理下生菜地上部生物量最高，红蓝光交替和交错照射均显著增加了过氧化氢、超氧阴离子和丙二醛含量，但是并未造成严重的光氧化胁迫，且提高了抗氧化酶活性，增加了花青素和总酚含量，但...     

新环境下农村能源生态环境工程模式分析

随着农村城镇化的发展以及新农村建设的推进,我国农村地区能源短缺以及能源利用效率低的问题日益凸显。通过分析农村能源生态环境工程的设计方法,深入地探讨了3种农村能源生态环境工程模式,以供参考。     

表皮蛋白基因TcCP14.6和TcLCPA3A参与介导赤拟谷盗对磷化氢的抗性形成

【目的】 表皮蛋白是昆虫表皮重要的结构物质,大量研究已经证实表皮蛋白基因参与介导昆虫抗药性形成。以赤拟谷盗（Tribolium castaneum）为研究对象,解析表皮蛋白基因TcCP14.6（cuticle protein CP14.6）和TcLCPA3A（larval cuticle protein A3A）在昆虫磷化氢抗性形成过程中的作用。【方法】 采用联合国粮农组织（FAO）推荐的磷化氢熏蒸方法对采自5个省份赤拟谷盗的磷化氢抗性水平进行测定。基于赤拟谷盗基因组数据获得TcCP14.6和TcLCPA3A的cDNA序列,利用在线生物信息学分析软件预测其编码的氨基酸序列、信号肽和保守结构域。分别提取赤拟谷盗不同组织（头、胸、腹的表皮、翅、足、肠道、马氏管和脂肪体）、不同磷化氢抗性水平以及磷化氢胁迫后试虫的总RNA。以TcRPS和TcRPL为内参基因,运用RT-qPCR技术分析TcCP14.6和TcLCPA3A在赤拟谷盗不同组织、不同磷化氢抗性水平和药剂胁迫下的表达模式。最后,通过RNA干扰技术结合生物测定方法分析TcCP14.6和TcLCPA3A与赤拟谷盗磷化氢抗性的关系。【结果】 生物测定结果表明,江苏（JS,RR=1.7）和云南（YN,RR=3.0）种群对磷化氢保持敏感,湖南种群（HN,RR=20.2）表现为中等抗性,四川（SC,RR=395.4）和广东（GD, RR=862.7）种群表现为极高抗。序列分析结果表明TcCP14.6和TcLCPA3A蛋白均包含信号肽和保守的几丁质结合域。RT-qPCR结果显示,TcCP14.6和TcLCPA3A均在赤拟谷盗表皮组织中高表达,而在内部器官（脂肪体、肠道、马氏管）中的表达量相对较低。此外,TcCP14.6表达量随磷化氢抗性水平的增加呈上调趋势,而TcLCPA3A表达量则呈下降趋势;赤拟谷盗经磷化氢熏蒸处理6 h,TcCP14.6和TcLCPA3A的表达量分别呈现上调和下调趋势。注射dsRNA分别干扰抗性（GD）和敏感（YN）种群两个基因的表达后再用LC₃₀的磷化氢浓度处理试虫。与对照相比,TcCP14.6基因沉默后赤拟谷盗的死亡率显著升高,而TcLCPA3A基因沉默后试虫死亡率显著下降。【结论】 表皮蛋白基因TcCP14.6和TcLCPA3A参与介导赤拟谷盗对磷化氢的抗性。     

2株伪狂犬病毒株的分离鉴定及生物学特性分析

为了解伪狂犬病病毒(PRV)变异情况，从山东和江苏两地的某发病猪场分别采集阳性病料接种BHK-21细胞，连续传代进行病毒分离，观察细胞病变；对细胞培养物进行间接免疫荧光与蛋白印迹鉴定，通过对病毒滴度的测定绘制了分离病毒株的一步生长曲线；进一步动物试验鉴定分离株的毒力，并对其gE基因进行遗传进化分析。结果显示：利用PCR成功扩增出PRV的gB、gC和gE特异性基因，病料接种BHK-21细胞后产生了特异性细胞病变；病毒感染细胞后表达了gE蛋白，并与抗PRV单抗特异性结合，显示成功分离到2株分离毒株，分别命名为SDWF2019和JSNT2019;通过序列分析，2个分离株与我国新流行的PRV毒株属于同一遗传进化分支。本研究为我国华东区猪伪狂犬病的疫情监测提供了参考。     

1987—2022年湖北省审定籽粒型大豆品种主要性状演变分析

为指导湖北省籽粒型大豆新品种选育，分析了1987—2022年湖北省审定的60份籽粒型大豆品种试验数据，研究审定品种的重要农艺性状、产量、品质性状及抗病性的变化规律与相互关系。结果表明：审定品种的遗传变异中，品质性状变异较小，产量及相关农艺性状变异较大。审定品种的株高、主茎节数、有效分枝数、单株荚数、单株粒重、百粒重、产量和脂肪含量随年份更替呈上升趋势，全生育期、蛋白质含量呈下降趋势，蛋脂含量的变化趋势不明显。2015—2022年湖北省审定的籽粒型大豆品种对SMV的抗性主要为中间型，在今后育种过程中对SMV抗性的选择仍需加强。相关性分析表明，产量与单株粒重呈显著正相关(r=0.277),单株粒重与有效分枝数和单株荚数呈极显著正相关(r=0.554, 0.646)。因此，在今后湖北省籽粒型大豆品种选育过程中，应着重关注有效分枝数、单株荚数和单株粒重的协同改良，以达到提高产量的目的。     

基于5G通信技术的配网架空线路故障自愈方案研究

为解决传统配网架空线路因没有配置保护引起跳闸或接地引起的故障无法有效实现自愈的问题，研究具有5G通信功能的配网智能开关保护配置及合理布局，可以达到配网故障快速自愈。在配网分线和主干线安装基于5G通信技术智能开关，配备电流和重合闸保护，并合理整定保护定值，与变电站出线保护有效配合，通过各智能开关终端的逻辑研判技术，实现快速隔离故障恢复非故障区域供电，从而减少停电用户数量，提升用户的用电满意度。某地区实际投入使用中，配网自动化自愈成功率明显提高，成功实现预期目标。     

中环属(Nematoda:Criconemoidea)两个广东新纪录种记述

【目的】对在广东省农作物上发现的中环属(Mesocriconema Andrásy, 1965)种类进行鉴定。【方法】利用传统形态分类学进行形态测计和描述。【结果】鉴定为奥诺中环线虫(M. onoense Luc, 1959)和华丽中环线虫[M. ornatum (Risk, 1958) Loof&De Grisse, 1989]。奥诺中环线虫的鉴别特征为体环纹111～122个，侧区无背腹环纹愈合处；头环纹3个，第1环非常窄，向前倾，亚中唇瓣较小，口针长47.2μm (43.2～53.9μm)；阴门口开放，阴道直，受精囊椭圆形，有精子，卵母细胞双行排列；肛门距离阴门约1个体环，阴门到尾端7～10个体环；阴门后虫体圆锥形，末端圆形，多瓣状。华丽中环线虫的鉴别特征为体环纹83～91个，侧区偶见背腹环纹愈合处；头环纹2个，第1环略向内凹，亚中唇瓣大且向前伸出，口针长53.7μm (50.3～57.9μm)；阴门口闭合或略开放，阴门前壁形成齿形突起，阴道直，受精囊未见精子，卵母细胞单行或双行排列；肛门距离阴门约0～2个体环，阴门到尾端6～8个体环；阴门后虫体圆锥形，末端圆形，多瓣状。【...     

金盏菊枯萎病病原鉴定及防治药剂筛选

【目的】为了明确金盏菊枯萎病的病原菌种类、筛选防治药剂。【方法】对分离得到的金盏菊枯萎病病原菌进行了形态学和分子生物学鉴定，基于该病原菌的EF-1α序列构建了系统发育树并对其致病性进行了测定。【结果】结果表明，引起金盏菊枯萎病的病原为尖孢镰刀菌Fusarium oxysporum。通过生长速率法和盆栽法筛选了防治金盏菊枯萎病的药剂，结果表明，30%噁霉灵水剂和80%乙蒜素乳油对供试菌株F.oxysporum菌丝生长的抑制活性最强，同时对于该类病原菌的盆栽防效最好，高达88.09%和82.14%。【结论】研究结果为金盏菊枯萎病病原菌的鉴定及其田间防治提供了参考。     

脂磷壁酸激活奶牛乳腺中NUPR1表达及分布研究

为了探究NUPR1基因在奶牛乳房炎中的表达及分布规律，通过构建脂磷壁酸（LTA）诱导奶牛乳腺上皮细胞（MAC-T）体外炎症模型，以奶牛核蛋白1(Nucleus Protein 1,NUPR1)基因为研究对象，利用免疫组织化学技术（IHC）测定NUPR1在患病奶牛乳腺组织中的分布情况。通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及蛋白免疫印迹（WB）检测炎症相关因子、NUPR1基因及其上下游基因在奶牛乳腺炎组织及乳腺上皮细胞炎症模型中的表达规律。qRT-PCR和WB结果显示，IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α在乳腺病理组织及细胞炎症模型中均极显著上调表达（P<0.01）,NUPR1在奶牛乳房炎病理乳腺组织及乳腺上皮细胞炎症模型中均显著或极显著上调表达（P<0.05,P<0.01），同时，DNMT1下调表达，KLF4、SESN2和SOCS3基因上调极显著表达（P<0.01）。IHC结果显示，NUPR1主要表达于奶牛乳腺上皮细胞中，并且在奶牛患病乳腺组织中的表达量高于正常组。本研究结果为进一步探究NUPR1基因在乳房炎病理进程中的调控机理提供了试验和理论基础。