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11.
以pcDNA3.1-pIL-18为模板,采用PCR技术扩增到了猪白细胞介素18(IL-18)的成熟蛋白基因,通过KpnⅠ+SacⅠ双酶切及连接反应,构建了pET32c—pIL—18原核表达质粒。经过限制性内切酶分析、PCR鉴定及DNA序列测定证实,重组质粒中的基因片段连接正确。之后,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),于37℃、1.0mmol/L IPTG条件下诱导表达。菌体裂解产物经SDS—PAGE分析,在分子质量约为33ku处出现了预期的目的蛋白。用8mol/L脲对表达产物变性,经Ni^2+NTA柱纯化,透析复性,得到了纯化的IL-18蛋白。Western—blot分析证实,纯化的重组IL-18蛋白具有反应活性。上述研究结果为重组IL-18的应用奠定了基础。 相似文献
12.
13.
猪白细胞介素-18基因表达及重组蛋白的纯化 总被引:1,自引:0,他引:1
以pcDNA3.1-IL18为模板进行PCR扩增获得猪白细胞介素-18(IL-18)的成熟肽基因,以KpnⅠ、SacⅠ双酶切PCR产物作为供体,KpnⅠ、SacⅠ双酶切的pET41c和pET32c作为载体,连接载体供体,转化DH5α,经双酶切、PCR鉴定及测序筛选出阳性重组质粒,并命名为pET41c-IL18和pET32c-IL18。将pET41c-IL18和pET32c-IL18转化大肠埃希氏菌BL21(DE3),用1 mmol/L IPTG 37℃诱导表达。SDS-PAGE及W estern-blotting分析结果表明,所表达的重组蛋白主要以包涵体形式存在,pET32c-IL18重组蛋白分子质量约33 ku,与预期大小相符。将包涵体提取物用8 mol/L脲变性,经N i-NTA柱纯化,透析复性,得到了纯化的IL-18蛋白。 相似文献
14.
初步研究了利用家蚕蛹大量繁殖白蛾周氏啮小蜂的可行性。观察了白蛾周氏啮小蜂在家蚕蛹上的发育历期,子代蜂的寿命及飞行能力,认为繁蜂的最佳蜂蛹比为15~20∶1;4次接蜂结果显示,周氏啮小蜂可以利用家蚕蛹连续繁殖,单蛹出蜂量及单雌产卵量均较高;利用家蚕蛹繁殖的白蛾周氏啮小蜂对国槐尺蛾蛹寄生率为76.7%,表明利用家蚕蛹繁殖的子代蜂对其他寄主具有较强的寄生能力。 相似文献
15.
禽流感H9亚型油乳剂灭活疫苗的改进 总被引:1,自引:0,他引:1
用新引进的6株禽流感病毒(AIV)H9亚型和现制苗用的AIV-H9毒株分别制备AIV-H9、AIV-H5、NDV二联三价油乳剂灭活疫苗,免疫5日龄和10日龄雏鸡,于免疫当日直至80日龄鸡出栏期间定期采血,用HI法检测相应的AIV-H9、AIV-H5和NDV抗体。结果表明,10日龄免疫鸡的AIV-H9抗体效价最高,5日龄和10日龄免疫鸡的AIV-H5抗体效价差别不明显;用引进的3号AIV-H9毒株制备的联苗对10日龄雏鸡免疫后20d产生AIV-H9保护性抗体,一直持续到80日龄以上,期间的抗体平均效价为6.72(1b),而现制苗用的AIV-H9毒株制备的联苗免疫力较差;现制苗用的A1V-H5毒株制备的联苗免疫效力仍较好;分别接种0.25、0.30mL/只联苗的雏鸡AIV-H5抗体效价没有明显差别,而AIV-H9抗体效价以接种0.30mL/只剂量的为高;不同日龄、不同免疫剂量的试验鸡NDV抗体效价没有明显差异。 相似文献
16.
17.
鸡慢性小肠球虫病的防治不可或缺 总被引:1,自引:0,他引:1
鸡球虫病是一种对养鸡生产危害极大的常见病。根据其临诊表现的不同,可分为急性盲肠球虫病、急性小肠球虫病和慢性小肠球虫病三种类型。 急性盲肠球虫病是由柔嫩艾美球虫寄生于盲肠所引起,以拉鲜红色或酱油色血便,剖检见盲肠肿大出血为特征,可导致鸡只大批发病死亡。但本病的临诊特征明显,容易确诊,只要及早发现,及时用药,可将发病死亡损失减到最低限度。急性小肠球虫病是由毒害艾美球虫寄生于小肠中段所致,以拉粘稠带血粪便,剖检见小肠中段比正常肿大2倍以上,长度约缩短一半,粘膜上有大量粟粒般大小的出血斑点及灰白色坏死灶… 相似文献
18.
19.
阐述牡丹江地区白头翁的种类、分布、开发与利用价值以及繁殖技术,为扩大药源开发与利用提供可靠的理论依据。 相似文献
20.