中国兰ISSR-PCR反应体系优化及引物筛选

[目的]优化中国兰的ISSR-PCR反应体系,并筛选适用于中国兰ISSR分析的候选引物,为ISSR分子标记在中国兰的辅助育种及亲缘关系和遗传多样性分析等提供技术参考.[方法]以6个中国兰品种为材料,采集其叶片样品,分别用研钵法和研磨仪法进行破碎研磨,比较两种方法提取DNA的效果,利用L25(53)正交试验和单因素试验对DNA模板量、引物浓度、2×Taq Master Mix添加量、循环数和退火温度进行优化,建立最佳ISSR-PCR反应体系,并从ISSR分子标记通用引物中筛选适用于中国兰的ISSR分析候选引物.[结果]研磨仪法提取的DNA浓度明显高于研钵研磨法,但二者提取的DNA质量均较好(OD260/OD280为1.7~2.0).对ISSR-PCR反应体系扩增结果的影响程度排序为DNA模板量>引物浓度>2×Taq Master Mix添加量.综合考虑成本和DNA模板量,最佳ISSR-PCR反应体系(20.0μL):DNA模板10.0 ng、引物0.8μmol/L和2×Taq Master Mix 9.0μL.最佳循环数为35,最佳退火温度为49.6℃.基于上述优化结果,从100条引物中共筛选出42条适用于中国兰的ISSR候选引物.[结论]研磨仪法可有效提高中国兰基因组DNA的提取率和质量,且利用优化后的ISSR-PCR反应体系和扩增程序及筛选出的引物,扩增获得的条带清晰、稳定,多样性好,可用于中国兰的遗传多样性和亲缘关系等分析研究.     

杉木亲本自交系及其杂交种DNA甲基化和表观遗传变异

表观遗传调控包括DNA甲基化、染色质结构修饰和小分子RNA调控等机制可能在杂种优势形成过程中起重要作用.为了了解DNA甲基化对杉木杂交后代杂种优势的影响,本研究利用甲基化敏感随机扩增PCR技术(methylation-sensitive AP-PCR,MS-AP-PCR),选取40对引物组合对杉木亲本自交及其亲本的杂交组合后代群体的基因组DNA进行了扩增和分析.结果表明:杉木基因组的DNA甲基化模式主要以内侧胞嘧啶的甲基化为主:6个正反交组合总的甲基化百分率相对于亲本的自交系而言,甲基化率呈减少的趋势;同一组合正反交组合后代之间在CCGG位点胞嘧啶的甲基化水平上无明显差异;6个杂交组合在CCGG的位点上的甲基化位点数明显低于它们的亲本自交子代.对3种甲基化的表达类型与性状表型值、杂种优势值、配合力进行的相关分析结果表明,检测位点外侧胞嘧啶半甲基化、内侧胞嘧啶甲基化位点变化与杉木树高,胸径和材积性状的杂种优势均成显著负相关,即杉木基因组外侧胞嘧啶半甲基化程度越低、内侧胞嘧啶甲基化位点越少,3个生长性状的杂种优势愈明显;而其他甲基化程度的指标与杂种优势之间的相关均没有达到统计学的显著水平.     

小麦抗白粉病基因聚合体DH材料的分子标记鉴定

小麦白粉病是由Blumeria graminis f.sp. tritici引起的世界性病害,利用分子标记辅助选择进行抗白粉病基因累加,可延长品种抗病性寿命,有利于提高育种效率。本研究利用Pm4b的STS-PCR标记,Pm13和PmV的SCAR-PCR标记,以及与Pm12共分离的同功酶标记（α-Amy-1）对来自小麦与玉米杂交产生的双单倍体材料的7个株系和9个穗系的4     

抗BYDV小麦——中间偃麦草易位系α-淀粉酶2同工酶的研究

对抗大麦黄矮病毒病的普通小麦－－中间偃麦草易位系Ｆ９４６３１和Ｆ９４８８５－２进行抗性和α－淀粉酶２同工酶电泳图谱的研究,证明抗性基因和控制α－淀粉酶２形成的结构基因α－Ａｍｙ－Ａｇ２（α－Ａｍｙ－Ｘ２）均位于中间偃麦草第７６组染色体长臂上。这两个基因都呈显著遗传性。α－Ａｍｙ－Ｘ２控制形成二条α－淀粉酶２特异酶带,可认为是７Ａｉ－１长臂的生化标记,经ＢＹＤＶ抗性和α－淀粉酶２遗传分析,推断这两个     

两种桉树与厚荚相思混交的生长效应研究

对尾叶桉和雷林１号桉与厚荚相思的两种混交方式混交林的生长、抗风力进行了研究,结果表明：以桉树为主要目的树种的混交林,所选用桉树的生长量大于相思时,其增产效应显著,尾叶桉与厚荚相思带状混交能明显提高尾叶桉的生长量,以４行带效果最好,适宜在风害不严重的地区采用。尾叶桉与厚荚相思行间混交能降低厚荚相思的风害率并能明显增加混交林单位面积的木材产量,在沿海台风多发地区是有推广价值的一种混交方式。     

紫花含笑扦插繁殖试验

采用L9(34)正交设计,研究不同生根促进剂种类、浓度及不同扦插基质对紫花含笑扦插生根率、生根条数的影响,结果表明:3个因素对紫花含笑扦插生根率、生根条数的影响均达到极显著水平,最佳组合为ABT1#800 mg·kg-1、基质为红壤+珍珠岩(1∶1),该组合能使紫花含笑扦插平均生根率达到87.9%、平均生根数达到9.6条。采用双因素试验研究不同插穗下切口型、不同木质化程度插穗对紫花含笑扦插生根率的影响,结果表明,2个因素对紫花含笑扦插生根率的影响均达到极显著水平,最佳组合为采用半木质化绿枝为插穗,下切口双削面,平均生根率达89.9%。综合试验结果表明,紫花含笑扦插育苗以半木质化绿枝为插穗,下切口双削面,蘸ABT1#800 mg·kg-1溶液,红壤+珍珠岩(1∶1)为基质扦插效果最好。     

拓朴预测在林木良种产量预测上的应用

收集福建省洋口林场1971－1998年杉木种子园单位产量为原始材料，应用拓朴学原理和灰色系统理论，建立了种子产量拓扑预测及其残差修正模型群。通过计算，绘制出该场未来15a杉木种子园单位产量的预测曲线。预测结果经1999年实际产量检验，精度达95．4％。     

桉树与厚荚相思混交林经济效益分析

采用国际惯用的财务分析方法,对桉树与相思混交林进行了经济效益分析,结果表明∶尾叶桉（无性系ＭＬＡ）与厚荚相思行间混交纯利润最高达２１８８３．６２元／ｈｍ２,比带状混交提高４２．１％,比尾叶桉纯林提高３３．５％;行间混交、带状混交和纯林内部收益率分别为５１．９％,４９．４％和５１．６％;投资回收期行间混交为５．１年,其余为５．２年。雷林１号桉（实生苗）与厚荚相思混交,行间混交林纯利润最高,达１２００１．５８元／ｈｍ２,比带状混交林提高４６．４％,比纯林提高４９．３％;行间混交、带状混交、纯林的内部收益率分别为３９．４％,３８．２％和３７．７％;投资回收期均为５．３年。     

杉木第一代改良种子园经济效益评价

以折现值，投资净现值，内部收益率为经济分析指标。对杉木第一代改良种子园投资与产出，财务及社会经济效益进行了系统的评价，以25年为一个种子园周期，其本身的财务净现值为净亏损，国家必须对建设单位进行投资补偿，营建300亩改良代种子国，以社会贴现率6%计算，其社会经济净现值为5949.66万元。具有显著的社会经济效益，影响杉木种子园经济效益的敏感性因子为种子的遗传品种（良种增益）和种子产量。     

杉木种质资源保存利用现状及发展策略

在介绍我国杉木种质资源保存利用现状的基础上,综合分析了杉木种质资源收集、保存、利用和评价各个环节之间相互制约、相互影响的关系,论述了“方法多样化、滚动式发展、保存与利用相结合”的保存方法和发展模式。并针对杉木种质资源保存与利用的现状,提出了今后研究利用的思路及发展对策。