杜鹃花枯萎病菌TaqMan MGB探针实时荧光快速检测方法

根据杜鹃花枯萎病菌(Ovulinia azaleae)及其近似种ITS基因序列差异,设计合成1对特异性引物和1条Taq Man-MGB探针,建立了杜鹃花枯萎病菌的实时荧光PCR检测方法。特异性试验结果表明,该检测方法能特异性检测杜鹃花枯萎病菌;灵敏度试验结果表明,最低检测限量为10μL反应体系中总DNA含量0.25 pg;实际样品检测结果表明,该方法可用于疑似携带杜鹃花枯萎病菌样品的检测与初筛。此方法快速、灵敏,整个反应过程约1 h,检测过程完全闭管,无需PCR后处理,为杜鹃花枯萎病菌早期诊断检测提供了重要参考。     

入世对宁波植物产品进出口贸易的影响及其检验检疫对策

分析了宁波地区进出口植物产品的特点,探讨了中国入世对宁波地区植物产品进出口贸易的影响,并就存在的问题提出了相应的检验检疫对策和措施。     

油棕猝倒病菌实时荧光PCR检测方法

油棕猝倒病菌(Pythiums plendens)是我国进境植物检疫性有害生物。本试验根据P.splendens rDNA ITS区序列,设计了实时荧光PCR引物pyspF/pyspR及荧光探针pyspT,建立了P.splendens荧光PCR检测方法,检测灵敏度为0.012pg/μL。     

稳定同位素比质谱用于不同进口国大豆溯源技术研究

为探讨锶(Sr)、碳(C)、氮(N)稳定同位素比质谱应用于我国进口大豆产地溯源的可行性,本试验利用热电离质谱检测进口大豆中⁸⁷Sr/⁸⁶Sr,利用稳定同位素比质谱仪检测进口大豆中的δ¹³C和δ¹⁵N,利用SPSS软件对进口自巴西、美国和阿根廷的大豆⁸⁷Sr/⁸⁶Sr比值、δ¹³C和δ¹⁵N进行统计分析。结果表明,不同产地国大豆样本中的⁸⁷Sr/⁸⁶Sr比值、δ¹³C和δ¹⁵N呈正态分布;方差分析和事后多重比较分析结果表明,不同产地国大豆样本中的⁸⁷Sr/⁸⁶Sr比值、δ¹³C和δ¹⁵N有显著差异(P<0.05);利用大豆样本中的⁸⁷Sr/⁸⁶Sr比值、δ¹³C和δ¹⁵N对进口大豆产地国进行判别分析,进口自阿根廷的大豆样本与进口自美国和巴西的大豆样本判别正确率达100%,3个主要大豆进口国大豆样本总体判别正确率达到82.4%。综上所述,利用⁸⁷Sr/⁸⁶Sr比值、δ¹³C和δ¹⁵N能够初步对进口自不同国家的大豆进行产地溯源和判别,为我国进口大豆产地国鉴别提供技术支持。     

宁波出口盆栽植物星天牛综合防控措施研究

[目的]应对欧盟对星天牛实施的严格检疫措施,为我国红枫等盆栽植物的出口安全提供技术支持。[方法]在综合分析欧盟有关法规的基础上,结合星天牛生物学特性、药剂熏蒸和浸泡等防治研究,提出了出口盆栽植物星天牛的综合防控措施。[结果]采用40%辛硫磷＋80%敌敌畏乳油500倍液浸泡处理36 h或25 g/L溴氰菊酯500倍液浸泡处理48 h可完全杀死苗木中的星天牛幼虫。[结论]在物理隔离基础上,结合盆栽植物生产过程控制,并配合一定的化学防治措施,可有效防控星天牛,这对有关盆栽植物出口企业有较好的指导作用。     

从荷兰番红花种球中截获的次薄滑刃线虫的检疫鉴定

宁波口岸从荷兰番红花种球中分离到大量滑刃属线虫活虫,该荷兰群体的主要形态特征为:雌虫尾呈亚圆柱形,尾端半圆形,尾端腹侧有尾尖突长1.5~3.0μm;后阴子宫囊显著,长89.3~118μmm;侧线3条。基于28S、ITS和18S基因DNA序列构建NJ系统发育进化树显示该荷兰群体与次薄滑刃线虫亲缘关系极近且在同一进化分支中。通过形态特征和DNA序列分析,鉴定该荷兰群体为次薄滑刃线虫(Aphelenchoides subtenuis Cobb,1926)。     

东亚型和欧洲型拟松材线虫的形态学和ITSPCR-RFLP鉴定

对宁波口岸截获的不同来源木质包装中的东亚型和欧洲型拟松材线虫进行形态学和ITSPCR-RFLP研究。选用5种限制性内切酶RsaI,HaeⅢ,MspI,HinfI,AluI对各株系单条线虫ITS区PCR扩增产物进行酶切,发现限制性内切酶RsaI有3种酶切结果,表明ITS区段存在DNA序列异质性。研究再次证明ITSPCR-RFLP不但是伞滑刃线虫鉴定十分可靠的辅助手段,还可有效区分种内不同地理型。对拟松材线虫与松材线虫(包括"M"型和"R"型株系)、豆伞滑刃线虫、伪伞滑刃线虫等近似种的区别进行讨论。     

小麦线条花叶病毒研究进展

小麦线条花叶病毒是一种重要的检疫性有害生物,能危害许多单子叶粮食作物,造成巨大的经济损失。该病毒在世界范围内分布广泛,欧洲、北美洲、大洋洲等多国均有报道发生;而在中国,2000年后鲜有相关报道。近几年,伴随麦类、玉米等粮食的大量进口,小麦线条花叶病毒随之传入的风险剧增。本文从生物学特性、发病特点、检测技术及CP蛋白功能研究进展等方面对小麦线条花叶病毒进行了系统性的概述,旨在为相关部门的检疫与监管提供科学依据。     

新型防腐剂处理木质包装防治松材线虫的初步研究

两种防腐剂(TANALITH CuAz和TANALITH CY)处理木包装防治松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)的研究表明,防腐剂处理松材后放置21天内,2.86%CuAz、2.22%CY对松材线虫具有明显的杀灭作用,并且其作用随着处理后放置时间的延长而增强,但二者均没有达到100%杀灭松材线虫的效果.结果分析显示,药剂浓度、药剂作用时间、木材对药剂的吸收及药剂渗透性是影响防腐剂处理对松材线虫杀灭效果的主要原因,而木材对药剂的吸收及药剂渗透性又取决于木材处理前的含水量、木材种类及所用木材的硬度等因素.