牛奶子实时定量PCR分析中内参基因的评价与验证

【目的】实时定量 PCR结果的精确性在很大程度上取决于选择的内参基因的稳定性。通过评估候选管家基因的表达稳定性,筛选出用于牛奶子研究的最佳内参基因。【方法】设计简并引物从牛奶子中克隆12个潜在的内参基因片段,包括14-3-3、18S核糖体 RNA(18SrRNA)、β-actin (Actin)、延长因子1-α(EF1-α)、真核起始因子4A (eIF4A)、3－磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)、RNA聚合酶－Ⅱ(RPⅡ)、60S核糖体蛋白(RPL7)、翻译延长因子2(TEF2)、泛素连接酶 E2(UBCE)、泛素(UBQ)和泛素延伸蛋白5(UBQ5)。采集牛奶子5个不同器官(根、茎、叶、花和红果)、4个成熟期的果实(绿果、黄果、深粉果和完全成熟的红果)、2种激素(脱落酸、赤霉素)处理4个时间点的绿果、热处理4个时间点的离体叶片、幼苗盐胁迫2个时间点的根茎叶,应用实时荧光定量 PCR 技术检测12个内参基因在各样品中的表达情况,采用基于 CT值的 geNorm、Normfinder和 BestKeeper及 CT比较4种算法评价这些内参基因的稳定性,最终的排名则由 RefFinder算法产生。【结果】器官组稳定性好的前2位内参基因为 UBCE和 RPL7,果实成熟期组排名前2的为eIF4A和UBCE,激素处理组排名前2的为eIF4A和UBCE,非生物胁迫组排名前2的则为 Actin和 EF1-α,综合分析所有样品排名前3位的是 eIF4A、RPL7和 UBCE。分别用筛选出的稳定的eIF4A、RPL7、UBCE和不稳定的 RPⅡ作为内参基因评价目的基因八氢番茄红素合成酶基因 EutPsy 在果实成熟过程中的表达,结果显示分别以3个稳定的内参基因为单内参基因与以 eIF4A 同 UBCE 组合做内参基因所得到的结论一致,而 RPⅡ给出的则不同。【结论】在应用荧光实时定量 PCR技术研究牛奶子基因转录表达时,通常情况下eIF4A、RPL7和 UBCE相对于其他9个候选内参基因更为可靠。研究结果为牛奶子及胡颓子属其他物种的基因表达分析奠定基础。     

缺氮对佛手气体交换、叶绿素荧光及叶绿体超微结构的影响

      利用土培试验研究不同氮素水平对佛手叶片光合作用、叶绿素荧光参数、叶绿素含量、叶绿体超微结构及抗氧化酶活性的影响.结果表明,缺氮降低叶绿素(Chl)含量、叶绿素a(Chl a)含量以及Chl a /叶绿素b(Chlb),同时增加类胡萝卜素(Car)/Chl值;缺氮条件下,佛手叶片气体交换率、PSⅡ的最大光化学效率(Fv/Fm)、PSⅡ实际光化学效率(ΦPSⅡ)、光化学猝灭系数(qP)、PSII的电子传递效率(ETR)呈下降趋势,初始荧光(Fo)以及非光化学猝灭系数(qN)则随氮缺乏程度的加剧而升高;同时,缺氮导致超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)等抗氧化酶活性降低,膜脂过氧化程度加重,叶绿体类囊体片层结构损伤等.可见,缺氮主要是通过减少光合色素含量,降低光合电子传递速率,引起细胞的膜脂过氧化程度加剧,进而损伤叶绿体类囊体结构及光合反应中心,导致光合速率降低.     

佛手137 CS-γ射线辐射效应研究

采用137CS-γ射线对佛手枝条进行辐射处理,然后扦插培养,观察插条的成活率及生长状况,分析辐射效应及适宜的辐射处理条件.研究结果表明,辐射对佛手枝条的扦插成活率、新梢生长量和生长曲线都有显著影响,而且不同辐射剂量和剂量率的影响有显著差异.经过综合分析认为,采用137CS-γ辐射源对佛手枝条进行辐射诱变的适宜条件为剂量5 Gy、剂量率1Gy·min-1,或剂量10Gy、剂量率1Gy·min-1.     

猕猴桃光合产物输出与分配规律的研究

以‘秦美’猕猴桃４年生树为试材，研究了田间条件下整株饲喂１４ＣＯ２后，猕猴桃光合产物的输出和分布规律。结果表明：１．叶龄小于２２天的幼叶不断从成熟叶片吸取碳素营养，叶龄为２２～２４天时，叶片中光合产物输入与输出达到平衡，叶龄≥２４天时，叶片开始大量输出光合产物。２．新梢迅速生长期，光合产物主要向新梢与幼果运输，极少向地下部输送；新梢缓长期，光合产物大量向根部运输，极少向新梢顶端运输；新梢第二次生长高峰期及采果后，光合产物在新梢和根部均有分配；在整个生长季节中，光合产物都向芽中输送。３新梢迅速生长期形成的光合产物在果实成熟后极少参与形成可溶性糖、氨基酸和有机酸。新梢缓长期形成的光合产物在果实中能形成上述三类物质，并较多用于形成氨基酸。新梢第二次生长高峰期形成的光合产物在成熟果实中主要转化为可溶性糖，部分形成氨基酸，很少形成有机酸。     

佛手种质资源研究进展

主要介绍了佛手的品种分类、观赏价值和药用价值以及佛手的真伪鉴别,并从佛手化学成分研究进展上综述了佛手的发展应用前景。     

规模鸡场新城疫与禽流感的防治

结合实际工作经验,介绍了规模化养殖场新城疫与禽流感的病原体、临床症状、病理变化及防治措施,希望对广大养殖户有所帮助。     

矮化佛手的形态特征及遗传背景分析

对通过137Cs-γ射线辐射诱变产生的金华佛手矮化类型与现有的主栽类型青皮佛手进行了形态特征的比较分析,同时利用ISSR分子标记技术分析了矮化佛手的遗传背景。结果表明,矮化佛手具有植株矮、树冠小,枝条节间短、少刺,叶片小而厚,果实小等特点,与现有主栽类型青皮佛手相比更适合制作盆景;根据ISSR扩增结果进行聚类分析,结果表明矮化佛手与其它类型佛手在遗传背景上存在差异,矮化性状具有一定的遗传基础。     

不同栽培基质对蓝莓艾美瑞生长的影响

利用草炭、珍珠岩、蛭石、椰糠两两组合作为栽培基质,研究不同混合基质对蓝莓植株生长的影响。结果表明,草炭∶椰糠2∶1、草炭∶蛭石1∶1、椰糠∶蛭石2∶1对蓝莓生长的促进效果较好。综合分析植株生长状况得出,在草炭∶椰糠2∶1的基质处理下,蓝莓植株生长效果最好,为最适蓝莓栽培基质,但其价格高,投入成本大。综合考虑生产和经济效益认为,在草炭∶蛭石1∶1基质下,植株长势好,且成本低,是蓝莓规模化栽培的最佳选择。     

环境·森林·癌症

癌症已成为当今对人类威胁最大的死神之一。它每年夺走的生命数以百万计。为了战胜癌症,全世界许多科学家都在致力于癌症的研究。 随着科学的发展和对癌症病因研究的逐步深入,科学家认为,很多癌症是由环境致癌物引起的,并逐渐揭示出环境、森林与癌之间的关系。     

33种化学药剂对油茶炭疽病病原菌Colletotrichum Camelliae毒力测定

油茶炭疽病化学药剂防治的毒力测定资料,已见于有关报导.本文系1963年对33种化学药剂室内筛选的部分结果.初步证实油茶炭疽病病原菌对一般铜剂有较强的抗性,且低浓度的铜盐,对病原菌丝体尚有刺激生长的作用.几种不常用的药剂,对炭疽病病原菌丝体却有极强的抑制力.现将试验初步结果、测定方法、提供于下,供探讨.