4CW-2．6型船式挖藕机研制使用情况调查

4CW-2．6型船式挖藕机将动力机械、高压水泵、喷射装置、挖藕支架、行走控制系统、液压操作机构与船身有机融为一体．使船体悬浮或半悬浮于水中,在船内完成吸水、加压喷射、挖深控制、行走等全部工序,集先进性、适用性、安全性和可靠性于一体。     

转基因大豆MON89788检测质粒标准分子构建与应用

[目的]构建适用于转基因大豆MON89788检测的质粒标准分子.[方法]利用定性PCR和连接、转化等分子克隆技术,将大豆内标准基因lectin、MON89788的3'端特异性序列和5'端特异性序列依次克隆到pMD18-T载体上,获得质粒标准分子pMD-LM3M5,并进行适用性验证.[结果]获得了3 700 bp的质粒标准分子,其中重组DNA片段1 029 bp.该质粒标准分子的定性PCR检测灵敏度达到10 copy.[结论]该研究构建的质粒标准分子pMD-LM3M5能替代NON89788基体标准品,用于MON89788大豆及其产品的定性PCR检测. Abstract： [Objective] The aim was to construct a plasmid reference molecule (PRM) for detection of transgenic soybean MON89788.[Method]the lectin gene sequence,3'-junction and 5'-junction sequence between host plant DNA integrated DNA of MON89788 soybean were amplified independently,and the three fragments were cloned into the cloning vector pMD18-T in order through molecular manipulation method to construct pMD-LM3M5,the applicability of the constructed novel PRM was tested. [Result] Sequencing confirmation result showed that the PRM was 3 700 bp in length,containing 1 029 bp of recombined DNA fragment.The limits of qualitative detection of the PRM were 10 copies,[Conclusion]The PRM constructed in this study was suitable for the identification of MON89788 event.     

人CD46基因启动子的克隆和启动特性研究

为研究人CD46(hCD46)基因启动子的启动特性,研制具有hCD46组织特异性表达特征的转基因小鼠,设计扩增hCD46基因启动子的PCR引物,用HeLa细胞基因组DNA为模板扩增hCD46基因启动子DNA片段,测序结果表明:其序列与GenBank中hCD46完整基因5′端某片段的同源性高达99.9%。用此DNA片段替换表达载体pcD-NA3EGFP中的CMV启动子,且在该片段与EGFP基因之间插入兔β-球蛋白基因的第2内含子RGI。重构的表达载体在2种鼠源细胞CHO和SP2/0中均可启动EGFP表达,表达量与人体内同源组织中hCD46的相似,说明该研究克隆了结构和功能正确的hCD46基因启动子。     

外源亚精胺对高温胁迫下生菜幼苗生长及抗氧化酶活性的影响

【目的】为确定生菜喷施外源亚精胺(Spd)适宜的浓度,寻找外源Spd缓解胁迫伤害以及生菜栽培提供理论依据。【方法】以耐高温品种G-S59和不耐高温品种P-S11为试验材料,分别喷施0.1、0.5、1.0、1.5和2.0mM的外源亚精胺,并以喷施去离子水为对照,测定了不同浓度外源亚精胺对高温胁迫下生菜的生长指标、叶绿素含量、抗氧化酶活性、膜透性和根系活力。【结果】随着喷施Spd浓度的提高,2个品种的生菜植株生长量、根系活力、叶绿素含量、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和过氧化物酶活性均呈先增加后减少的趋势,且在喷施1.0mM Spd处理达到峰值;外源喷施亚精胺有效降低了膜透性和丙二醛含量,在亚精胺浓度为1.0mM时,2个生菜品种的电解质渗透率和丙二醛含量均达到最低值。【结论】生菜在高温胁迫下,外源喷施亚精胺的适宜浓度为1.0mM。     

玉米开花规律及其花粉生物学特性研究

[目的]比较研究2个不同玉米(Zea mys L.)品种开花规律及其花粉生物学特性。[方法]供试玉米品种为紫糯18和吉单35。观察和测定指标分别为每日每时雄穗小花开花数量、单株花粉量、花粉活力、花粉直径及密度。[结果]玉米开花主要集中在始花日第2～6天,大部分在07:00～09:00开放。玉米花粉直径为74.6～88.7μm,密度为1.12～1.13 g/cm3。不同玉米品种散粉量差异较大,花粉活力也有不同。花粉活力的持续时间与空气湿度和温度有关,湿度高,气温低,花粉易存活。在20～25℃、相对湿度80%时,多数花粉活力能够保持3 h。[结论]该研究可为玉米育种及转基因玉米扩散模型研究提供科学依据。     

甘蔗B家族蔗糖磷酸合成酶基因SotSPSB的克隆及原核表达

【目的】克隆甘蔗B家族s0心PsB基因并进行原核表达,为进一步研究甘蔗SPS酶学特性及SPS活性调控机制奠定基础。【方法】在进化分析的基础上,通过同源克隆获得甘蔗SofSPSB基因部分序列,再结合RACE技术获得全长cDNA序列。扩增SofSPSB基因ORF并连到原核表达载体pETBlue－2上导入大肠杆菌BL21（DE3）中表达。【结果】通过比对B家族中进化关系很近的玉米（Zeamays）ZmSPS1和水稻（Oryzasativa）OsSPS1基因序列,并在保守区设计一对引物扩增获得甘蔗B家族SPS基因（SolSPSB）2330bp序列。结合5’－RACE和3’－RACE技术获得3481 bp SofSPSB基因全长cDNA序列,该序列包含一个3225bp的开放阅读框（0I江）;起始密码子（ATG）位于转录起始位点后56bp处,终止密码子（TGA）后有一段201bp的非编码序列,并带有真核生物典型的polyA尾巴;编码1074个氨基酸,SofSPSB与Zm—SPS1、OsSPS1的核苷酸序列同源性分别为94．7％和81．3％,氨基酸序列同源性分别为96．0％和83．9％;其理论分子量Mw=118．96kDa,等电点pI=6．30。经原核表达后纯化获得带6xHis标签的融合蛋白。【结论】克隆获得甘蔗B家族Sol-SPSB基因全长cDNA序列,成功构建了SoPSPSB基因原核表达载体,使其在大肠杆菌BL21（DE3）中表达。     

高炉粒化矿渣粉用于提高混凝土抗硫酸盐侵蚀性能研究

对掺高炉粒化矿渣粉的混凝土,改变其水胶比和矿渣粉掺量,进行抗硫酸盐侵蚀试验。结果表明,当混凝土水胶比控制在0．40以下,混凝土中高炉粒化矿渣粉掺量为30％及其以上时,配制的混凝土可抵抗SO2-4浓度为20250mg／L及其以下的硫酸盐环境水的侵蚀;而混凝土中不掺加高炉粒化矿渣,仅用水泥配制混凝土时,混凝土抗侵蚀能力水平较差,当混凝土水灰比为0．40时,抵抗不了s0≯浓度为2500mg／L的硫酸盐环境水的侵蚀。     

不同提取方法对秦艽中龙胆苦苷提取率的影响

[目的]建立RP-HPLC法研究不同提取方法对秦艽中龙胆苦苷提取率的影响,为秦艽药材的合理开发利用提供理论依据。[方法]采用C18色谱柱（4．6mm×250mm,5μm）,以甲醇：0．3％H3PO4=30：70（V/V）为流动相,流速：1．0ml／min,柱温：30℃,检测波长：270nm。[结果]龙胆苦苷在0．9—2．1μg范围内呈良好的线性关系,r=0．9991,平均回收率为97．6％,RSD值为1．02％。[结论]动态热回流提取法的提取效率最高。     

保鲜剂对香石竹切花生理生化特性的影响

试验表明,2种含有不同物质的保鲜剂均能不同程度地增加香石竹切花鲜重和花径,改善体内水分状况,延缓可溶性蛋白的降解,延长瓶插寿命,其中以保鲜剂1(2%S+200mg·L-1 8-HQ+150mL AC+50 mg·L-1 Al2(SO4)3+100 mg·L-1VC+50 mg·L-1 SA)的效果较好,属环保型保鲜剂.     

甘蔗多样性微阵列技术（DArT）标记体系的建立

[目的]建立成熟、稳定的甘蔗多样性微阵列技术（Diversity array technology,DArT）标记体系,为甘蔗的遗传多样性分析、遗传图谱构建及标记辅助育种等提供新的分子标记方法.[方法]以7份不同种属的甘蔗材料为样本,优化基因组复杂性降低方法并建立甘蔗DArT标记体系,同时应用该体系分析7份材料的遗传多样性.[结果]获得了基于PstⅠ/TaqⅠ酶切组合的最优基因组复杂性降低方法,利用该方法建立了DArT体系.利用DArT体系分析了7份材料之间遗传进化关系,发现供试7份材料的遗传相似系数为0.497～0.811,平均值为0.569.以遗传相似系数0.546为阀值,可以将供试材料分为三大类,其中第一类的GT29号、拔地拉和割手密GXS85-30均为甘蔗属材料,与预期相一致;第二类为河八王2号和滇蔗茅2号,第三类为芒84-8和斑茅GXA87-36.[结论]建立的甘蔗DArT标记体系具有有效性,其遗传相似性分析结果与材料预期的亲缘关系密切程度相一致.