侧多食跗线螨危害温室苹果苗

2003年笔者在温室育苗时发现侧多食跗线螨严重危害苹果幼苗,造成苹果幼苗停止生长。在我国关于侧多食跗线螨对苹果幼苗的危害此前未见报道。研究表明,用0.9%爱福丁乳油1500倍液可以有效防治该螨的为害。     

稳定表达小反刍兽疫病毒受体Nectin-4的MDBK细胞系的建立

小反刍兽疫病毒(Peste des petits ruminants virus, PPRV)是小反刍兽疫(Peste des petits ruminants,PPR)的病原。Nectin-4为PPRV感染宿主上皮细胞的受体。本研究采用合成的Nectin-4基因,构建重组质粒pLOV-eGFP-Nectin-4。将该重组质粒与包装质粒pSPAX2和外膜质粒pMD2.G质粒共转染293T细胞,获得逆转录病毒样颗粒。为了构建稳定表达PPRV受体Nectin-4的MDBK (Madin-Darby bovine kidney)细胞系,将含有逆转录病毒样颗粒的细胞培养上清液感染MDBK细胞,利用嘌呤霉素筛选、纯化,获得了稳定表达Nectin-4蛋白的MDBK细胞,将其命名为MDBK-Nectin-4。pLOV-eGFP-Nectin-4、p SPAX2和pMD2.G三质粒共转染293T细胞后荧光结果表明,慢病毒成功包装。嘌呤霉素对MDBK细胞最小致死浓度检测结果表明,1μg/mL的嘌呤霉素为最佳的筛选工作浓度。RT-PCR检测结果表明,Nectin-4基因能够在MDBK-Nectin-4细胞中转录成mRNA。Western blot检测结果表明,Nectin-4在MDBK-Nectin-4细胞中能够稳定表达。间接免疫荧光(indirect immunofluorescence assay, IFA)结果表明,表达的Nectin-4蛋白主要分布在细胞膜上。构建的MDBK-Nectin-4细胞系在连续传代至20代,仍然能够稳定表达Nectin-4蛋白,结果表明具有良好的遗传稳定性。PPRV分别感染MDBK细胞与MDBK-Nectin-4细胞系,后者较于前者能够更快地出现细胞病变。该细胞系的建立为深入研究PPRV与受体Nectin-4的相互作用机制,以及临床快速地分离PPRV提供了实验材料。     

羊口疮病毒127基因的克隆表达及亚细胞定位分析

为了对羊口疮病毒(ORFV) AH-F10株127基因进行原核表达及亚细胞定位,本试验采用PCR方法扩增出ORFV127基因,成功构建原核表达重组质粒pG EX-6p-1-ORFV127和真核重组质粒pE GFP-N1-ORFV127。将原核表达重组质粒转化到大肠埃希氏菌中表达,并进行纯化和鉴定。以纯化的蛋白质免疫BALB/c雌鼠制备多克隆抗体,利用Western-blot技术鉴定其反应原性。利用脂质体介导法将重组质粒pE GFP-N1-ORFV127转染至Vero细胞,通过倒置荧光显微镜观察其在细胞中的表达及亚细胞定位。结果表明,获得的ORFV127基因序列全长为558bp,ORFV127蛋白在大肠杆菌中获得高效表达,主要以包涵体蛋白质的形式表达,大小约49 000。Western-blot结果显示,免疫小鼠获得的抗ORFV127蛋白的多克隆抗体可特异性识别ORFV127蛋白,倒置荧光显微镜观察发现,ORFV127蛋白主要定位于细胞质。本试验结果为后续研究ORFV127蛋白的功能提供了宝贵的生物材料。     

西宁地区猪繁殖与呼吸综合征流行病学调查

猪繁殖与呼吸综合征是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引发的一种病毒性传染病,以母猪发热、厌食、早产、流产、死胎、弱仔等繁殖障碍及仔猪呼吸系统疾病和高死亡率为特征.     

滇桂黔石漠化片区区域发展与脱贫攻坚的问题及建议——以文山壮族苗族自治州为例

对云南省文山壮族苗族自治州林业扶贫工作做法和经验进行了系统梳理,总结了文山壮族苗族自治州林业扶贫工作的实践现状以及扶贫工作取得的成效、典型经验和做法,指出其当前石漠化片区存在的脱贫成果巩固问题、脱贫攻坚与乡村振兴衔接问题和生态产业发展等主要问题,并针对性地提出构建巩固脱贫成果的长效机制、加强脱贫攻坚与乡村振兴的衔接问题...     

家电下乡政策的实施与思考

通过回顾我国“家电下乡”政策演进,评价政策目的和意义,主要介绍了“家电下乡”政策实施情况,进而分析了政策实施过程中出现的问题并作出思考。     

高产高油早熟广适应性大豆新品种中黄35的选育

高产高油早熟大豆新品种中黄35,具有高产特点,2007年在新疆石河子获得5 577.0 kg·hm-2的产量:在黄淮海北组两年试验及全国北方春大豆两年试验增产均极显著;含油量高:黄淮海北组试验及北方春大豆试验的含油量平均为23.1%;早熟:北方春大豆晚熟组试验比对照早7 d;适应性广:已在辽宁、吉林、内蒙古东南部、河北、山东、天津、北京、陕两、宁夏、甘肃等地审定推广,是一个极有推广价值的品种.     

两级传播理论在情报用户研究中的引入

文章以传播学中两级传播理论为基础,通过对两级传播理论中意见领袖的角色和作用的论述,结合情报用户研究,进一步说明了在情报用户研究中有效的引入两级传播理论具有重要的现实意义。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪瘟病毒双重TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立

本研究根据PRRSV GL膜蛋白基因和CSFV多聚蛋白基因,分别设计2对特异性引物和1条TaqMan探针,建立了同时检测猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪瘟病毒的双重TaqMan荧光定量RT-PCR方法。结果表明,该方法只对猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪瘟病毒特异性良好,不与非洲猪瘟、猪圆环病毒Ⅱ型、猪伪狂犬病毒、猪细小病毒等常发猪病存在交叉反应;PRRSV和CSFV的检出下限分别为1.41拷贝/μL和1.6拷贝/μL;组内和组间Ct值变异系数都小于1.3%。对175份临床采集的样品检测,PRRSV单一阳性样品27份,CSFV单一阳性样品16份,检测双阳性样品24份。本方法敏感高、特异强,可以用于猪场的快速检测与诊断。     

村级会计委托代理服务工作实践——以云南省昭通市昭阳区永丰镇为例

2009年8月,村级会计委托代理服务工作云南省在昭通市昭阳区全面启动,基于此,将结合昭通市昭阳区永丰镇村级会计委托代理服务工作实践,对村级会计委托管理运行的现状及问题展开分析,并提出一些粗略的看法。