狗蔷薇RcKN1基因的克隆及功能分析

Class-Ⅰ KNOX(KNOX1)基因是真核生物中高度保守的同源盒转录因子,在植物的器官和胚胎发生中起着重要作用。本研究从狗蔷薇(Rosa canina L.)的类原球茎中克隆出了其同源基因,通过对其编码的蛋白质序列比对和系统发育分析,认为其属于KNOX1 在狗蔷薇中的同源基因;该基因全长 1 509bp,其中编码区 1 185 bp,编码 395 个氨基酸,将其命名为 RcKN1 基因 (GenBank 登录号:JN998201)。RT-PCR分析表明,其在叶芽、花芽、类原球茎等幼嫩的器官中表达;进一步构建了组成型表达载体并导入烟草(Nicotiana tabacum L.)中分析其功能,转基因烟草出现了叶片浅裂、叶脉紊乱、叶片基部歪斜、叶片皱缩甚至类似于复叶的叶片等多种表型。研究结果表明,RcKN1 基因在植物发育中起着重要作用,是研究叶片发育机理和培育叶型奇特的花卉新品种有价值的目的基因。     

香花槐推广应用中存在的问题及解决途径

刺槐(Robinia pseudoacacia)是豆科刺槐属植物,起源于美国,分布于北纬43°～45°.我国于19世纪末从欧洲引入刺槐,故又名洋槐.目前,在全球范围内刺槐已经成为仅次于杨树和桉树的第三大阔叶树种,有很高的经济价值.刺槐与根瘤共生固氮,每公顷刺槐林每年有50 kg N进入氮循环,是其他植物固氮能力的一倍,对土壤肥力的提高和能量的积累具有重要作用;树干可以用于生产大型板材及制造薪炭;叶片营养丰富,是很好的饲料原料;花可用于做蜜源.刺槐还是防止水土流失,防风固沙及生态恢复的重要树种.但是,普通刺槐的花朵均为白色,用于园林建设的品种比较单调,景观效果较差.     

多花蔷薇假珠芽诱导、体细胞胚发生及植株高效再生

 以多花蔷薇‘无刺3号’成熟种子为外植体,探讨了假珠芽诱导、体细胞胚发生及植株高效再生的方法。结果表明,种子的子叶在添加2, 4-D 0.5～2 mg·L-1的1/2 MS培养基上暗培养30 d后所产生的愈伤组织,接种到添加TDZ 5～20 mg·L-1的1/2 MS培养基上光培养20 d产生初级假珠芽。假珠芽在添加TDZ 10 mg·L-1和GA3 0.1 mg·L-1的诱导培养基上暗培养20 d后,在含麦芽糖的无激素培养基上光培养产生少量次级假珠芽和胚性愈伤组织。假珠芽保存在诱导培养基上。胚性愈伤组织可发育成大量正常体细胞胚,继而再生正常植物。假珠芽可通过上述方法不断诱导体细胞胚和假珠芽,通过这种方法假珠芽已经保存了2年。     

光质对狗蔷薇类原球茎发生和植株再生的影响

为探讨光照对狗蔷薇类原球茎的发生和植株再生的影响,采用发光二极管(LED)调制获取不同光谱能量分布的光质配比(纯红光、偏红光(3∶1)、等比光(1∶1)、偏蓝光(1∶3)、纯蓝光),以荧光灯和黑暗作对照,结果表明:偏蓝光条件下狗蔷薇类原球茎的发生率最高,达64%;蓝光、偏红光以及荧光灯下PLBs发生率30%左右,黑暗情况下仅14%。在偏蓝光条件下平均每外植体产生的类原球茎量是其他光质下的2倍。PLBs萌发率在纯红光条件下达到30%,在红蓝混合光下达20%左右,纯蓝光下仅为17%。但在PLBs分化和萌发过程中,含红光条件下的PLBs萌发后更易形成假珠芽,最高达12%,蓝光下仅形成畸形苗。说明不同光质组合对PLBs发育的不同阶段产生不同的影响,偏蓝光有利于狗蔷薇PLBs的发生,红光有利于PLBs的分化和萌发,在含红光的光照下容易诱导出假珠芽。     

抗月季根癌病种质资源的筛选与评价

2003年和2004年5月18—20日，以根癌土壤杆菌J-5-1毒性菌株在田间接种了蔷薇属50个材料，以鉴定其对根癌病的抗性。根据发病率、肿瘤大小、肿瘤干质量以及感病后植株生长状况将植物的根癌病抗性分为高度抗病、中度抗病、中度感病、高度感病4个类型。重瓣玫瑰、黄刺梅、‘红双喜’、‘火焰’、‘蓝丝带’表现为高度抗病；多花蔷薇无刺4号、无刺3号、粉团蔷薇、白玉堂等17个材料为中度抗病；荷花蔷薇、多花蔷薇无刺11号、月季花、‘梅郎口红’‘金玛丽’等17个材料为中度感病；香水月季、‘曼海姆’、‘摩纳哥公主’、‘杨基歌“桔红潮’等11个材料则表现为高度感病。为克服田间鉴定的各种限制因素，对根癌病抗性的离体接种鉴定方法作了探讨。结果表明：离体嫩梢接菌后所产生的瘤状愈伤组织量可以作为区分材料根癌病抗性的依据，离体接种与田间接种鉴定结果基本一致。     

利用蔷薇科植物基因5'UTR快速扩增狗蔷薇RcPIN1和RcPLT的5’末端

狗蔷薇不定根可被噻苯隆(TDZ)高效诱导形成类原球茎,深入探讨其诱导阶段的分子生物学机制,有利于指导切花月季建立类似高效再生和遗传转化体系.快速、准确克隆和筛选狗蔷薇类原球茎发生的关键基因是进行分子生物学水平研究的一个重要前提.利用苹果(Malus×domestica)、桃(Prunus persica)和草莓(Fragaria vesca)高同源性基因5'UTR(非翻译区)的相对保守性,在其内保守区域设计上游简并引物,以M-MLV逆转录酶反转录合成cDNA为模板,直接扩增蔷薇科植物狗蔷薇(Rosa canina)RcPIN1(pin-formed)和RcPLT(plethora)基因5’末端,大大减少了获取众多目的基因全长的时间及成本.结果显示,在狗蔷薇RcPIN1和RcPLT基因与其对应苹果、桃和草莓高同源性基因的5'UTR内,很多区域表现出较高保守性,表明在5'UTR相对保守区域设计上游简并引物扩增目的基因5’末端的合理性.与常规5'CDNA末端快速扩增技术(5’RACE)相比,本方法无需对cDNA模板5’末端加尾同聚物和引入锚定引物,即不必使用昂贵的5’RACE试剂盒,具有快捷、节约等优点,是一种获取蔷薇科植物基因5'末端的可行途径.     

我国花卉种业现状与发展战略(三)

综合分析我国花卉种子工程现状,我们认为,我国应重点发展研究基础好或者我国种质资源丰富的主要花卉类型.     

超干处理与贮藏条件对一串红种子生活力与生理变化的影响

本试验采用硅胶干燥法对一串红种子进行超干处理，将含水量为8.9％的一串红种子含水量分别降低至4.5%、3.4%、3.0%、2.7%和2.2%；同时研究了不同贮藏条件对不同超干种子生活力与生理变化的影响。种子发芽率、活力指数、电导率和脱氢酶活性等试验结果表明：超干处理后含水量为3.4 ~ 4.5%的一串红种子，经过13个月的贮藏（低温和室温）后，其生理指标保持在较好的水平，种子活力较高。     

观赏植物无糖组培快繁的研究现状及展望

20世纪30年代以来,组织培养技术得到了不断的发展和完善,但真正能够用于商业化生产的观赏植物组培苗的种类却很少。究其原因,主要是组培苗的培养及驯化周期长、污染率高、移栽成活率低、生产成本高[1-2]。日本千叶大学的Kozai等针对这些问题研发了无糖组培技术,给予植物组培技术一种全新概念。无糖组培快繁也称光独立组培快繁,是在培养基不加糖分的基础上,采用环境控制手段,通过对CO2、光照、温度、湿度等环境因子的调节,使组培苗加强自身的光合作用,由异养型转变为自养型,从而有效地降低生产的成本,达到快速繁殖优质种苗目的[3-5]。本文…     

无刺桅杆槐和无刺槐再生体系的研究

以无刺桅杆槐和无刺槐的带腋芽茎段为材料获取无菌苗,再以无茵苗叶片为外植体进行植株再生研究.结果表明:2种无刺槐茎段的最佳取材时间均为5月上旬;无刺桅杆槐适宜的叶片愈伤组织诱导培养基为MS+6-BA 0.25 mg/L+2,4-D 6.00 mg/L,无刺槐为MS+6-BA 0.50 mg/L+2,4-D 2.00 mg/L,愈伤诱导率分别为60%、80%;不定芽诱导培养基,无刺桅杆槐和无刺槐均为MS+6-BA 5.00 mg/L+IBA 0.10 mg/L+GA3 0.10 mg/L,再生率分别为60%、50%.2种无刺槐的生根培养基均为1/2MS+IBA 0.05 mg/L,生根率分别为55.6%、72.2%,组培苗移栽成活率迭85%以上.