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71.
72.
沙门氏菌PCR检测方法的建立 总被引:3,自引:1,他引:2
根据GenBank沙门氏菌侵袭蛋白A(invA)基因序列设计引物,扩增特异的202 bp核苷酸片段,经过优化PCR扩增条件,建立了沙门氏菌特异、敏感和快速的PCR检测方法。特异性试验结果表明,从沙门氏菌参考菌株中均能扩增出特异性的核苷酸片段,大肠杆菌、巴氏杆菌、金黄色葡萄菌、志贺氏菌、蜡样芽孢杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌的扩增结果均为阴性。敏感性试验结果表明,采用简便的直接煮沸裂解法制备样品DNA,该方法的敏感性可达2.43×103CFU/mL。 相似文献
73.
拟穴青蟹卵巢蛋白质双向电泳的样品制备方法 总被引:1,自引:0,他引:1
为探索适用于拟穴青蟹卵巢蛋白质双向电泳的样品制备方法,比较了TCA/丙酮沉淀法和3种裂解液抽提法对总蛋白的提取效果,4种方法分别得到133、369、306和417个蛋白点。采用裂解液Ⅲ(7 mol/L尿素、2 mol/L硫脲、4% CHAPS、40 mmol/L Tris-base、65 mmol/L DTT、2% IPG Buffer、Protease in hibitor cocktail、1 mmol/L EDTA)提取蛋白所得图谱效果最好,背景清晰,蛋白点最多。 相似文献
74.
中国林蛙抗菌肽基因在毕赤酵母中的表达及其活性检测 总被引:1,自引:1,他引:0
将中国林蛙皮肤抗菌肽基因(RC)克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9K上,使之准确融合于а交配因子分泌信号,然后通过电击转化毕赤酵母宿主菌GS115/His-,构建pPIC9K/RC。将筛选出的高效表达的重组转化子用甲醇作诱导剂进行小瓶发酵,28~30℃诱导后,经Tricine SDS-PAGE检测,表达产物在а信号因子引导下分泌到培养基中。分泌到培养基中的表达产物能够抑杀细菌和抑制肿瘤细胞生长。对酵母重组子用酵母染色体DNA的通用引物和目的片段的引物进行PCR扩增。结果表明,中国林蛙皮肤抗菌肽基因能以单拷贝整合到毕赤酵母染色体基因组中并形成转录产物。 相似文献
76.
77.
在发展养羊业的过程中,斯克里亚宾吸虫病、反刍兽绦虫病、消化道圆线虫病、食道口线虫病、毛首线虫病等消化道寄生虫病会对羊的生长发育、健康造成威胁。尽管近些年来在农区圈养方式得到普及,常规驱虫制度不断健全。但是,在不同饲养规模的养殖场户中,由于羊圈垫草、运动场环境因 相似文献
78.
79.
山羊痘病毒P32基因真核表达载体的构建及表达 总被引:1,自引:0,他引:1
从重组克隆载体pMD18-P32中扩增出山羊痘病毒P32基因,与毕赤酵母分泌性表达载体pPIC9K相连接,构建重组表达载体pPIC9K-P32.重组质粒pPIC9K-P32用Sal I线性化后,与毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115混合后电转化,使重组表达载体与酵母染色体发生同源重组.采用G418抗性梯度筛选法得到高拷贝重组菌株,甲醇诱导目的基因表达.SDS-PAGE和Western-blotting分析结果表明,用酵母成功表达出了31kD的重组蛋白,该蛋白具有生物学活性,能被山羊痘阳性血清识别. 相似文献
80.
一、发生情况和影响
(一)干旱
1、初夏旱.据驻马店1958~2003年46年气象资料(下同)分析,5月下旬~6月中旬出现初夏旱(3个旬中,每旬降雨量均少于30mm,且总降雨量少于50mm)10年,发生频率为22%,由于初夏旱往往影响玉米适时播种和出苗,其中初夏旱旱期在30天以上的,造成玉米减产. 相似文献