地高辛随机引物法标记探针的Southern杂交技术优化

为检测转基因抗虫棉中的Bt Cry1A基因的表达,采用地高辛随机引物法标记探针、化学发光检测的Southern杂交技术,通过纯化探针、使用最适探针浓度、优化真空转印、杂交及免疫检测方法等一系列优化过程,最终得到背景低、信号强的Southern杂交结果。     

扁桃SFB基因的克隆及其生物信息学分析

以新疆扁桃栽培品种麻壳的花药为材料,利用RT-PCR和RACE技术,克隆到了一个全长为1131bp的SFB基因(Genbank登录号为:EU909685),命名为AcSFB10。该基因编码376个氨基酸,在N末端含有一个大约50个氨基酸组成的F-box基序。经生物信息学分析,推测AcSFB10蛋白的分子式为C2000H3033N517O558S23,相对分子质量为43985.5,等电点为6.02,二级结构以α螺旋为主;理论推导半衰期大约为30h,不稳定参数为53.21,属于不稳定蛋白;并且推测此蛋白为亲水性、非分泌型蛋白,在基质内起裂合酶的作用,特异性的识别底物,正好吻合了F-box蛋白的作用。     

哈密瓜转ACC脱氨酶基因再生植株的获得

ACC脱氨酶基因表达产物具有减少植物乙烯合成的作用,从而达到果实保鲜耐贮的目的.用农杆菌侵染三种哈密瓜(皇后、迦师瓜、红蜜脆)培养8d的子叶块,接种在MS附加BA 1.0mg/L,Kana(卡那霉素)75mg/L和Amp(氨苄青霉素)200mg/L的培养基上,在温度(27±1)℃、光照2000lx条件下,经20d左右培养出现不定芽的分化;继续将这些不定芽接种在MS 附加IBA 0.1mg/L,Kana 50mg/L和Amp 200mg/L的培养基上,诱导根的产生,最终获得了转化植株.通过对转化植株的PCR扩增检测证明,1kb的ACC脱氨酶基因已经整合到哈密瓜基因组中.     

猕猴桃果实成熟生理和贮藏保鲜研究进展

从猕猴桃果实成熟生理的规律入手，分析了影响猕猴桃贮运性的因素，总结了国内外近年来各种贮藏保鲜技术，剖析了我国目前猕猴桃贮藏保鲜方面存在的问题，提出了依靠生物技术培育耐品种，配合各种常规保鲜技术来进行猕光贮藏保鲜的解决策略。     

毛竹EST资源SSR标记分析与筛选

 对来源于NCBI公共数据库的非冗余3 087条毛竹（Phyllostachys edulis）EST序进行简单重复序列SSR搜索发现：在401条毛竹EST序列中共查找到408个SSR位点,平均6.8 kb EST序列中含有1个SSR。其中二核苷酸和三核苷酸重复是毛竹EST-SSR的主要重复类型,分别占SSR总数的43.14%和49.75%。SSR的不同重复基序中,最常见的重复基序是：(AG)_n,占37.01%,其余出现频率较高的依次为(TC)_n、(AGC)_n、(GAG)_n和(CGC)_n。根据搜索结果设计了182条毛竹EST-SSR引物,以12个不同种属的竹子DNA为模板,对引物进行了稳定性、通用性的验证与评价。结果表明有42对引物有较清晰且稳定的目标扩增产物,其中39对引物的产物存在多态性,说明设计开发的毛竹的EST-SSR标记是可行且有效的。     

富共轭亚油酸乳脂对小鼠免疫特性的影响

应用从牛奶中提取的富共轭亚油酸(CLA)的乳脂对小鼠进行灌胃35 d,检测富CLA的乳脂对小鼠体重,脏体比,脾淋巴细胞增殖的影响,初步探讨富CLA乳脂对小鼠免疫功能的影响。结果显示,日粮添加量为0.1%富CLA的乳脂可显著促进T淋巴细胞增殖反应(P<0.01),但对体重和脏体比没有影响(P>0.05),这提示富CLA的乳脂具有增强小鼠细胞免疫功能的作用。     

扁桃花芽的抗寒性测定与综合评价

为了探讨扁桃花芽抗寒性关键指标的鉴定参数,为选育抗寒性品种提供理论基础,以15个扁桃品种花芽为试材,采取人工模拟环境的方法对花芽进行不同低温(-15～-35℃)的处理,测定每品种花芽各个梯度的电解质渗透率、可溶性糖含量、可溶性蛋白含量、脯氨酸含量、MDA含量、SOD活性、POD活性,以及CAT活性,电解质渗出率应用logistic方程建立回归模型,确定其半致死温度,所有指标最后应用隶属函数法以及主成分分析法综合评价扁桃花芽的抗寒性。结果表明:随着温度的降低电解质渗出率符合"S"型变化曲线,确定半致死温度在-11.4～-24.87℃之间,应用隶属函数法与主成分分析法分析所得扁桃花芽抗寒性的强弱基本一致,野扁桃的抗寒性最强,综合评价抗寒性表现从强到弱依次为:野扁桃、美国引进品种、本地主栽品种。     

不同抗性品系稻田的稻飞虱发生动态分析

通过对国粳4号、佛山油占，特优18号3个不同抗性品系水稻田中稻飞虱(白背飞虱和褐稻虱)发生动态的研究，结果表明水稻品种抗性对稻飞虱的种群数量影响显著。抗虫和中抗性品种稻田飞虱，早稻和晚稻均保持在较低数量水平。稻飞虱的种类以白背飞虱(Sogatella furcifera Horvath)为主，占78．6％，其次为褐稻虱(Nilaparvata lugens Stal)占21．4％。文中还揭示了当年稻飞虱的发生特点及其抗虫性机理。     

抗生素对甜瓜植株再生的影响

在建立以农杆菌介导的表达ACC脱氨酶基因的甜瓜遗传转化体系过程中,进行了抗生素影响甜瓜植株再生试验。结果表明:卡那霉素对甜瓜愈伤组织、不定芽分化及生根均有明显的抑制作用,75 mg/L的卡那霉素百可作为今后甜瓜遗传转化筛选转化体和非转化体的临界浓度;200~400mg/L浓度范围内的氨苄青霉素能够很好地抑制农杆菌过度生长造成的污染,但对甜瓜植株再生的影响较小。     

新疆核桃种质资源遗传多样性的ISSR分析

[目的]通过ISSR标记技术,对新疆核桃种质资源的遗传多样性及遗传结构进行分析,为该资源的保护与利用提供理论依据和技术支持.[方法]采用ISSR标记对5个居群和1个栽培类型共163份样品进行遗传多样性分析.[结果]用13条引物对163份样品进行扩增,共检测扩增位点117个,其中多态性位点98个.在物种水平上,多态性位点百分率(PPL)为83.76%,Nei's基因多样性(H)为0.3010,Shannon信息指数(Ⅰ)为0.4182;在居群水平上,多态性位点百分率平均为68.36%,Nei's基因多样性(H)平均为0.1 265,Shannon信息指数(Ⅰ)平均为0.1651.基于Nei's遗传多样性分析得出的居群间遗传分化系数(Gst)为0.6425,表明有64.25%的遗传变异存在于居群间.居群间的遗传一致度平均为0.7499,估测的居群问基因流(Nm)为0.2782,表明核桃采集的6个居群或类型之间存在较小的基因流.AMOVA方差分析也表明居群间的核桃遗传变异大于居群内.Mantel检测与UPGMA聚类均表明居群间的遗传距离与居群的地理距离之间具有较高的相关性.[结论]新疆核桃遗传多样性水平较高,居群之间遗传分化大,种质资源保护和利用策略首选就地保护;在就地保护过程中,通过监测遗传多样性水平可评价其保护的有效性.