荧光定量RT-PCR测定口蹄疫病毒悬液内病毒颗粒抗原含量方法研究

口蹄疫病毒完全颗粒(146S)含量是影响疫苗质量的重要因素。在抗原生产过程中对口蹄疫病毒颗粒含量进行监控,能够保证不同批次的口蹄疫疫苗抗原含量均达到疫苗生产质量要求。本研究应用荧光定量RT-PCR方法,结合应用口蹄疫146SELISA抗原定量技术定量的抗原作为荧光RT-PCR定量的标准对照抗原,利用两种方法分别检测倍比稀释的标准抗原,研究RT-PCRCt值与口蹄疫病毒146S抗原含量的相关关系。研究结果表明,口蹄疫RT-PCR的Ct值与口蹄疫病毒146S抗原含量log2的对数值间呈负线性相关关系。荧光定量RT-PCR可以用于口蹄疫病毒颗粒灭活前抗原含量的快速测定,可为口蹄疫疫苗生产质量控制提供一种新的检测方法。     

抗IBD和ND二联高免卵黄抗体的研制

抗ＩＢＤ和ＮＤ二联高免卵黄抗体的研制张岐蜀，胡子信，门常平，崔德凤（北京农学院牧医系）鸡传染性法氏囊病（ＩＢＤ）和鸡新城疫（ＮＤ）是目前危害养鸡业十分严重的两大病毒性传染病。据报道，两病的混合感染率可达７Ｄ～８０％，［‘，’‘混合感染的发病鸡群，病死...     

Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒RT-PCR检测方法的建立

根据获得的Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒（DHVⅠ）RNA聚合酶基因序列，应用Primer Premier5．0软件设计了1对引物，建立了检测DHVⅠ的RT-PCR方法。该法能从DHVⅠ中扩增到440bp的条带，而对正常鸭胚尿囊液、健康鸭肝、鸭瘟病毒、番鸭细小病毒、鹅细小病毒、雏鹅新型病毒性肠炎病毒、禽流感病毒（H5N2亚型）、鸭病毒性肿头出血症病毒、鸭源多杀性巴氏杆菌（5：A）的扩增结果均为阴性。该法最低可以检测到30pg的DHV工核酸模板。RT-PCR对DHVⅠ强毒CHv-1株人工感染发病死亡鸭肝的检测结果与病毒分离和Dot—ELISA检测结果的阳性检出率均为100％，对脾、肺、脑病料的检出率显著（P≤0．01）高于病毒分离和Dot-ELISA。RT-PCR、病毒分离和Dot—ELSA对1987～2005年采集且保存于-20℃的经病毒分离已确诊为鸭肝炎的临床送检肝病料的检出率分别为100％（19／19）、36．84％（7／19）和57．98％（11／19），对2000-2005年采集且于-20℃保存的来源于中国18个省份发病鸭群的48份肝病料的检出率分别为100％（48／48）、56．25％（27／48）和75．00％（36／48）。结果表明，建立的RT—PCR方法具有良好的特异性和敏感性，可用于DHVⅠ的分离鉴定、临床病料的检测和分子流行病学调查。     

仔猪黄痢白痢的综合防治效果比较

采取加强饲养管理、对母猪预防注射得米先、仔猪腹腔补水等综合治疗措施来防治仔猪的黄、白痢，与母猪不预防注射得米先、仔猪常规治疗相比，取得了较好的效果。     

鉴别诊断鸡传染性法氏囊病RT-PCR方法的建立

诊断鉴别鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)对该病的临床诊治具有重要意义。从IBDV弱毒疫苗中提取病毒RNA,采用二步RT-PCR方法,建立诊断和鉴别IBDV毒株性质的分子诊断方法。结果表明:针对IBDV VP2基因高变区的基础RT-PCR引物和巢式RT-PCR引物,分别能够扩增出目标大小的特异性片段;区分IBDV超强毒株和经典毒株的RT-PCR扩增结果与预期目标一致。该方法可用于鸡传染性法氏囊病毒病的快速分子诊断及鉴别。     

辽宁省农村土地流转的金融服务探索

随着经济全球化的发展和我国现代化产业结构的不断调整,粮食安全的支撑重要性越发明显,但农村目前的青壮年劳动力却面临主动或被动脱离土地的窘境。如何推动农村土地流转,提升土地利用率,增加农业生产效应,加强其相关金融服务是一项重要有效途径。通过研究,发现辽宁省农村土地流转的金融服务存在一系列的问题,并给出相应的政策建议。     

10种除草剂对旱直播稻田杂草的防效及安全性评价

为明确旱直播稻田杂草对除草剂的敏感性,分别选择5种土壤处理除草剂和5种茎叶处理除草剂在山东省临沂市河东区进行田间药效试验。结果表明,直播田土壤处理防除杂草宜选用33%二甲戊灵乳油3 000 g/hm~2、38%噁草酮·丙草胺乳油1 500 g/hm~2、40%苄嘧·丙草胺可湿性粉剂1 500 g/hm~2、60%丁·噁乳油1 500 g/hm~2,对总草的株防效分别为94.09%、92.81%、92.20%、91.88%,鲜质量防效分别为96.32%、94.66%、94.84%、95.14%;茎叶处理宜选用60 g/L五氟·氰氟草酯可分散油悬浮剂2 250 g/hm~2、9%嘧肟·氰氟草微乳剂1 500 g/hm~2、20%噁唑·灭草松微乳剂3 300 g/hm~2,对总草的株防效分别为96.25%、95.79%、93.77%,鲜质量防效分别为97.41%、96.73%、94.96%。以上处理对杂草持效期均长达30 d。综上,采用土壤处理和茎叶处理相结合的方式,因地制宜,轮换用药,可有效控制旱直播稻田杂草。     

园林绿化施工中废弃物处理探讨

随着我国园林绿化建设地不断发展,造成园林绿化废弃物越来越多,合理利用废弃物是解决我国园林绿化废弃物的有效方法。笔者通过对当前我国园林绿化废弃物的现状以及相关政策的分析,提出解决这一问题的对应策略。     

砂藓(Racomitrium canescens)抗旱相关基因RcAOS2的克隆及表达分析

丙二烯氧化物合酶(allene oxide synthase, AOS)是茉莉酸合成途径中关键酶,在茉莉酸合成中具有重要的作用。本研究在砂藓(Racomitrium canescens)干旱胁迫转录组数据中发现一个干旱胁迫下表达量上调的AOS基因,将其命名为RcAOS2,我们对RcAOS2的开放阅读框进行了克隆及相关的生物信息学预测分析,并对RcAOS2在砂藓快速脱水和复水过程中的表达量变化进行了检测。结果显示,该基因cDNA全长1 474 bp,开放阅读框长516 bp。RcAOS2编码蛋白质的相对分子质量为4.36 kD,等电点为5.11,不稳定系数为55.02,为不稳定蛋白质;脂肪系数为19.19;RcAOS2蛋白质疏水性较强,属于疏水性蛋白质,存在信号肽,不属于跨膜蛋白质。系统进化分析表明,RcAOS2蛋白质与其他物种AOS蛋白质亲缘关系较远,是具有AOS序列特征的新类型。实时荧光定量PCR分析结果表明RcAOS2基因在砂藓干旱和复水过程中呈现差异性表达,推测RcAOS2可能参与砂藓的干旱胁迫响应和复水回复过程。本研究成果为进一步研究砂藓抗旱基因功能提供理论基础和备选基因资源。