肠致病性大肠杆菌和魏氏梭菌PCR诊断方法的建立

本研究建立了一种同时检测大肠杆菌和魏氏梭菌的二重PCR方法,根据兔肠致病性大肠杆菌（REPEC）的eae毒力基因和魏氏梭菌的α—toxin毒力基因的基因文库,设计了两对分别与eae基因和α—toxin基因互补的引物,用这两对引物对同一样品中的REPEC和魏氏梭菌模板进行二重PCR扩增。结果均得到了两条特异性大小与试验设计相符的833bp（REPEC）和324bp（魏氏梭菌）的扩增条带,而对其它3种病原菌的PCR扩增结果均为阴性;敏感性试验结果表明,该二重PCR技术能检出10cfu的REPEC,10cfu的魏氏梭菌。     

武隆县村级动物防疫员队伍现状与思考

<正>近年来,随着畜牧业的快速发展,动物及动物产品流通频繁、国内外动物疫病尤其是高致命性禽流感、牲畜口蹄疫、高致命性猪蓝耳病等重大动物疫病,严重地威胁着人民群众的食品安全,动物防疫工作形势十分严峻。而武隆县动物疫病防治人员队伍建设难以适应动物疫病和畜产品安全形势日趋严峻的形势要求,影响和阻碍了养殖业的正常发展。为真实掌握武隆县基层动物防疫人员队伍建设现状,以便提出有针对性的建议,武隆县采取实地考察走访、召开座谈会、发放调查问     

强化畜禽产品流通建设 促进畜牧产业健康发展

1.武隆县畜牧产业发展情况 截至2009年12月底,全县生猪存栏48.64万头、大牲畜存栏9.70万头,山羊存栏22.77万只、小家禽存栏151.35万只,大牲畜出栏3.21万头、山羊出栏21.64万只、小家禽出栏182.14万只,畜牧业产值11.05亿元。     

雄性动物抑制素的功能及其对繁殖力的影响

抑制素(inhibin,INH)是主要来源于睾丸支持细胞和卵巢颗粒细胞的一种糖蛋白激素,其主要生理作用是特异性地调控垂体促卵泡素(FSH)的分泌.随着对哺乳动物INH合成的部位、分子结构及生理作用的逐步深入认识,以及人工合成重组INH的不断成熟,已利用INH进行牛、羊、猪等多种家畜的免疫试验,证实INH免疫对家畜生殖有重要调节作用,可提高其繁殖力.国内外关于母畜的INH报道较多,而对于公畜的研究相对较少,但由于人工授精技术的广泛应用,INH对公畜繁殖力的影响已引起越来越多的关注.     

柳树还原糖含量与光肩星天牛危害的关系

利用3,5-二硝基水杨酸比色法检测还原糖,检测结果为无论是树木休眠期还是生长期,韧皮部还原糖含量均明显大于木质部含量。休眠期,不同柳树品系韧皮部的还原糖含量除黄柳被害后增加外,其余品种均有所减少,木质部还原糖含量被害前后变化无规律。不同品种间的还原糖含量差异显著,各品系韧皮部与木质部间差异显著,健康与被害树种之间差异不显著。生长期,除糖槭之外,各品系无论是韧皮部还是木质部,还原糖含量均有所增加。不同品种间的还原糖含量差异显著,各品系韧皮部与木质部间差异显著,健康与被害树种之间差异显著。无论是休眠期还是生长期,韧皮部以及木质部的还原糖含量与柳树被害率均无紧密相关性。     

中国荷斯坦牛POU1F1基因第6外显子多态性与产奶性能相关研究

牛POU1F1蛋白对牛乳腺发育有重要作用。哺乳动物上已有很多关于POU1F1基因的研究,但未见该基因对中国荷斯坦牛产奶性能影响的相关报道。作者采用PCR-RFLP技术对182头中国荷斯坦牛POU1F1基因第6外显子的A/G变异进行分析,得到AA、AG和GG基因型频率分别为0.434、0.451和0.115。2χ检验后显示,样本群体符合哈迪-温伯格平衡状态。利用POPgene32软件进行分析表明,该位点多态信息含量属于中度多态。应用SAS 8.1软件的GLM程序进行POU1F1多态性与产奶性状(包括90 d和305 d产奶量、乳脂率、乳蛋白率)关联分析,结果显示GG基因型牛与AA和AG型牛相比,有更高的乳蛋白率(P<0.05);而该位点对乳脂率和产奶量影响不显著(P>0.05)。因此,POU1F1基因的SNP初步可以作为影响中国荷斯坦牛乳蛋白率的实践依据。     

hsp70基因编码区一新SNP的发现及其多态性与热应激性状的相关性研究(英文)

为了探索hsp70基因多态性与热应激性状（直肠温度和红细胞钾含量）的相关性,利用PCR-SSCP方法检测290头中国荷斯坦奶牛hsp70基因的未知SNP,并利用PCR-RFLP方法对基因进行分型,采用SBYE荧光定量PCR方法检测不同组织中hsp70 mRNA表达水平。结果显示,在1524位点发现一个G/A突变,有两种基因型（AA/AB）,基因频率和基因型频率分别是0.957 0,0.043 0和0.913 7,0.086 3,卡方检验该群体处于哈迪-温伯格平衡。相关性分析结果表明,AA、AB基因型的直肠温度没有显著差异,但在红细胞钾含量中有极显著差异。肝脏中hsp70 mRNA表达水平显著高于其他组织。推测hsp70基因1524位点的G/A SNP与中国荷斯坦奶牛热应激有关。     

具有绿色荧光标记的表达T7 RNA聚合酶稳定细胞系的建立

[目的]建立具有绿色荧光标记表达T7 RNA聚合酶的稳定细胞系。[方法]从BL21（DE3）大肠杆菌中克隆出T7RNAP基因,定向克隆质粒FG12后,构建了表达T7 RNA聚合酶基因（T7）的Lenti-virus重组质粒FG12-T7 RNAP。用此重组质粒转染293T细胞,WB可检测出瞬时表达的T7 RNAP蛋白;利用辅助质粒对表达T7的非复制型Lenti-virus病毒进行体外包装,所获得的非复制型Lenti-virus病毒感染BHK-21细胞,利用GFP通过流式细胞分选仪筛选表达T7的细胞系,并利用WB检测基因的表达。[结果]通过WB检测出不同代次的阳性细胞中均能稳定表达目的基因T7 RNA聚合酶。[结论]T7 RNA聚合酶能顺利在真核细胞内表达,并在此基础上建立的稳定细胞系为RNA病毒体内拯救技术平台的建立奠定了基础。     

小RNA病毒与细胞凋亡

在小RNA病毒科中,口蹄疫病毒等不同病毒的不同基因可诱导宿主细胞发生凋亡,其作用机制也不完全相同.论文对小RNA病毒诱导细胞凋亡的机制进行了综述,并对相关研究进行了展望.