影响奶牛乳腺炎抗性的遗传因素

研究表明,遗传因素对奶牛乳腺炎的易感性或抗性具有潜在影响.目前相关的研究主要集中于对乳腺炎有重要影响的QTL和多基因变异.与乳腺炎相关的经典性状包括体细胞数、电导率和临床型乳腺炎等性状.随着自动化技术和自动挤奶设备的发展,发现了免疫学测定指标、挤奶速度等与乳腺炎相关的新性状,并发现了与乳腺上皮细胞功能相关的新生物学途径,这些均有助于阐明乳腺炎抗性牛在疾病发生中潜在的生物学机制,并以此为基础进行遗传改良.本文对上述内容进行综述.     

荷斯坦牛TLR2基因遗传多态性与乳腺炎抗性关系分析

利用PCR-RFLP方法检测TLR2基因在297头中国荷斯坦牛中的多态性,并分析其多态性与体细胞评分(SCS)的相关性.结果显示,TLR2基因exon2扩增片断的109 bp处产生C→A的突变,并导致天冬氨酸改变为谷氨酸.TLR2基因exon2被EcoRV消化后表现多态性,表现AA、AB、BB 3种基因型,其中B等位基因为优势等住基因,等位基因频率为0.784 5,而A等位基因频率则为0.215 5.经X2适合性检验,中国荷斯坦牛在该位点达到Hardy-Weinberg平衡状态.同时,群体EcoRV基因座不同基因型与SCS相关分析的结果表明,BB、AB型个体的SCS指标显著高于AA型(P<0.05),AA基因型可作为乳腺炎抗性的有利基因型,可将TLR2作为奶牛乳腺炎候选基因,应用于乳腺炎抗性分子标记辅助选择育种.     

沙棘品种间种子形态及萌发特性

采用方差分析、相关分析方法对7个沙棘品种的种子形态及萌发特性进行了研究。结果表明:7个沙棘品种间的千粒质量、种子形态、生活力、发芽速率、发芽指数、发芽率都达到极显著差异(p<0.01);千粒质量最大的品种是契切克,最小的是中国沙棘;中国沙棘的种子形态指标显著小于引进的大果沙棘品种;7个沙棘品种中,中国沙棘能在最短的时间达到最高的发芽率,萌发特点属于爆发型;依尼亚,契切克、阿尔泰、丘伊斯克、壮圆黄属于过渡型;深秋红则属于缓萌型;相关分析表明,种子大小对萌发的影响并不显著。     

兴安落叶松DNA提取-试剂盒改良法

[目的]寻找一种快速简便的兴安落叶松基因组DNA的提取方法。[方法]对DNA提取试剂盒进行改良,与原试剂盒法(离心柱)进行比较,并用琼脂糖凝胶电泳、蛋白核酸测定和ISSR-PCR对所提取的总DNA进行检测。[结果]试剂盒改良法提取的总DNA纯度和浓度较高,电泳显示其主条带较清晰,无降解现象,A260/A280值为1.75～1.84。[结论]改良后的DNA提取方法更适合兴安落叶松基因组DNA的提取。     

奶牛PRL基因CRS-PCR多态性与产奶性状的关联分析

采用CRS-RFLP技术对中国荷斯坦牛PRL基因第4外显子C8377G位点及第4内含子T8510C位点进行单核苷酸多态性分析。最小二乘分析表明：在8377位点GG基因型个体产奶量最小二乘均值显著高于CC基因型（P〈0.05）,GC基因型个体乳蛋白率最小二乘均值显著高于CC基因型（P〈0.05）;在8510位点CC基因型个体产奶量最小二乘均值显著高于TT基因型（P〈0.05）。     

牛血凝块基因组DNA提取方法的建立

建立了一种牛血凝块基因组DNA提取方法，其过程为机械性粉碎，高盐EDTA处理后用含蛋白酶K和SDS的细胞裂解液消化，苯酚-氯仿抽提，再以本方法抽提的DNA为模板进行PCR扩增，对PCR产物测序，测序结果与抗凝血DNA的PCR产物测序结果比较。结果表明：本方法提取的DNA成功地应用于PCR扩增。     

蚯蚓粪、插穗部位与扦插时间对美国白蜡嫩枝扦插生根的影响

为解决美国白蜡嫩枝扦插苗生根率低、根系不发达等技术瓶颈问题,以1年生美国白蜡嫩枝为材料,采用单因素随机区组试验设计,研究蚯蚓粪、插穗部位和扦插时间对美国白蜡扦插繁育的影响。结果表明,不同蚯蚓粪配比、插穗部位和扦插时间对美国嫩枝扦插苗生根率、生根数量、最大根长和平均根长的影响差异达到显著水平。以基质3（蚯蚓粪∶蛭石=2∶1）为扦插基质插穗生根率最高,为90.24%;中部位置插穗生根率最优,为89.23%;8月份扦插的效果最好,生根率为91.56%。综上,以基质3为扦插基质,采用美国白蜡1年生枝条的中部位置为插穗,扦插时间为8月份上旬,扦插生根效果最佳,当年苗高达到95 cm左右。     

鲁西黄牛IFN-α基因克隆及其真核表达质粒的构建

为研发牛α干扰素制剂,根据已发表的牛α干扰素基因序列设计一对引物。提取黄牛血液中白细胞基因组DNA,PCR扩增出α干扰素基因,并克隆到pMD18-T载体。测序结果表明,扩增片段含有570bp核苷酸,编码189个氨基酸,与已报道的牛α干扰素亚型氨基酸序列同源性在93.1%~95.2%之间。该基因与真核表达载体pcDNA3.1 相连,构建真核表达质粒,为牛α干扰素的临床应用奠定了基础。     

中国荷斯坦牛BoLA-DRB3.2基因座的PCR-RFLP多态性分析

主要组织复合体(Major Histocompatibility Complex,MHC)基因在动物机体免疫系统中具有重要作用,并与多种疾病的抗性或易感性存在相关性.利用限制性内切酶HaeⅢ和RsaⅠ通过PCR-RFLP技术分析了112头中国荷斯坦牛BoLA-DRB3.2基因的多态性.结果表明:所检测牛群中BoLA-DRB3.2基因在两个酶切位点均存在多态性,HaeⅢ酶切位点存在4种等位基因,有4种基因型;RsaⅠ酶切位点存在3种等位基因,有4种基因型.经x2适合性检验,所检测牛群中BoLA-DRB3.2基因在两个酶切位点均未达到Hardy-weinberg平衡状态.     

三个牛品种MBL1基因第一内含子与第二外显子遗传多态性研究

采用巢式PCR、DNA测序和CRS-PCR方法,研究中国荷斯坦牛、鲁西黄牛、渤海黑牛的MBL1基因内含子1和外显子2的单核苷酸多态性（SNPs）,发现了855（G/A）、2651（G/A）和2686（T/C）3个新SNP位点。855（G/A）位于内含子1上,2651（G/A）导致Val24Ile氨基酸的改变,2686（T/C）为同义突变。3个SNP位点在3个牛品种群体中优势等位基因相同,分别为G、G、C,其等位基因频率分别为0.87/0.58/0.57、1/0.75/074、1/0.76/0.63。经χ2适合性检验,荷斯坦牛在855（G/A）位点、鲁西黄牛在855（G/A）、2651（G/A）位点、渤海黑牛的所有位点达到Hardy-Weinberg平衡状态（P>0.05）。3个牛品种在855（G/A）位点均表现为低度多态;在2651（G/A）和2686（T/C）位点均表现为中度多态（0.25相似文献