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201.
本研究建立了一种同时检测大肠杆菌和魏氏梭菌的二重PCR方法,根据兔肠致病性大肠杆菌(REPEC)的eae毒力基因和魏氏梭菌的α-toxin毒力基因的基因文库,设计了两对分别与eae基因和α-toxin基因互补的引物,用这两对引物对同一样品中的REPEC和魏氏梭菌模板进行二重PCR扩增。结果均得到了两条特异性大小与试验设计相符的833bp(REPEC)和324bp(魏氏梭菌)的扩增条带,而对其它3种病原菌的PCR扩增结果均为阴性;敏感性试验结果表明,该二重PCR技术能检出10cfu的REPEC,10cfu的魏氏梭菌。  相似文献   
202.
克隆牛病毒性腹泻病毒Singer_Arg株全长cDNA,并获得其感染性RNA。将病毒基因组分段克隆后再拼接成全长cDNA;通过巨细胞病毒即早期启动子控制病毒cDNA转录,5’-UTR上游的锤头状核酶和3’-UTR下游的丁肝病毒核酶控制转录产物5’-UTR和3’-UTR的完整性和准确性,以获得不经体外转录,直接转染细胞产生病毒感染性RNA的反向遗传操作系统;并通过Western blot、RT-PCR技术、免疫荧光等方法对子代病毒进行了一系列鉴定与遗传稳定性分析。获得了Singer_Arg株全基因组序列并通过反向遗传拯救出该毒株。成功构建了基于Singer_Arg株的BVDV反向遗传操作系统,为BVDV疫苗研发和基础研究提供了技术平台。  相似文献   
203.
为了建立稳定干扰牛β-连环蛋白的牛肾细胞(MDBK)系,针对牛β-连环蛋白基因的mRNA设计3对shRNA引物序列,分别构建shRNA慢病毒干扰载体;将牛β-连环蛋白过表达载体和shRNA载体共转染293T细胞,检测shRNA的沉默效率;将筛选有效干扰β-连环蛋白的shRNA载体进行慢病毒包装,并利用包装好的重组慢病毒...  相似文献   
204.
选用牛的12个STR基因座,利用PCR和电泳银染技术对来自不同牛场的100头荷斯坦牛进行遗传多态性检测.结果表明,12个STR基因座的杂合度、多态信息含量、有效等位基因数的均值为0.871 1,0.857 4,8.166 6,这些基因座的遗传杂合度及多态信息含量高,均为高度多态位点,适用于动物的遗传分析和个体鉴定.  相似文献   
205.
垂直绿化集建筑、植物、材料为一体,是调节城市微气候环境和缓解热岛效应的重要途径。文中通过分析垂直绿化对城市微气候影响的研究文献,探究垂直绿化对微气候环境的4个影响机制,分析垂直绿化对周围微气候环境中温度、湿度、风速和城市热岛效应的影响,指出垂直绿化对城市微气候的调节作用受垂直绿化的类型、植物特性、生长基质和气候条件等多方面的影响,并在此基础上总结垂直绿化未来研究前景和重点方向,以期为改善城市生态环境提供参考。  相似文献   
206.
随着城市化的推进,城市绿地的水平空间越来越稀缺,城市化进程中的环境压力和生活方式的改变逐渐影响城市居民的身心健康,而垂直绿化作为一种创新的城市绿地形式,对改善居民身心健康有重要作用。文中从城市空气质量、热舒适性、噪音以及城市居民情绪4个方面综述垂直绿化对城市居民身心健康的影响,阐述垂直绿化在提升城市居民生活质量方面的潜力,分析植被特征、空间特性、结构特征和气象条件对垂直绿化健康效益的影响,建议加强各学科交叉融合、明确垂直绿化发挥健康效益的机制、建立更加细致的研究指标体系、增加对特定人群的研究,以期为未来的研究和实践提供指导。  相似文献   
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