基于定量PCR方法初步分析西藏开菲尔粒中细菌与酵母菌数量变化

运用实时荧光定量PCR方法分析西藏开菲尔粒中细菌与酵母菌的数量变化规律,需要有效提取其微生物总基因组DNA。本文通过同时添加溶菌酶与溶壁酶优化实验方案,成功获得西藏开菲尔粒中微生物的总基因组DNA。荧光定量PCR分析提取自培养1、4、8和12周的西藏开菲尔粒的微生物总基因组DNA,结果显示:4个时间点细菌16S rRNA与酵母菌26S rRNA基因拷贝数均分别约为每微升107拷贝与105拷贝,表明细菌与酵母菌的数量相对稳定。该结果为进一步研究西藏开菲尔粒中细菌与酵母菌间的共生关系奠定了一定的基础。     

杨树食叶害虫的综合防治策略及试验总结

泊头市杨树食叶害虫的发生近几年呈现上升趋势,发生普遍,点片成灾,严重影响杨树的正常生长,为有效遏制其为害蔓延,我们采取了全面监控、科学测报、分类防治的综合防治策略.现将2003～2004年的监测及防治方法经验总结如下：     

豫西地区红富士苹果叶片营养诊断

通过22个有代表性果园苹果叶片矿质营养分析,采用诊断施肥综合法（DRIS）对豫西红富士苹果进行了叶片营养诊断。结果表明,豫西红富士苹果叶片N、P、K、Fe、Mn、Cu、Zn的适宜含量分别为:22.54±3.00 g/kg、2.42±0.28 g/kg、9.31±1.40 g/kg、104.47±15.03 mg/kg、33.89±5.77 mg/kg、3.38±0.39 mg/kg、29.71±4.91 mg/kg,N:P:K的适宜比例为1:0.08～0.14:0.31～0.55。DRIS诊断参数确定为N/P、K/N、K/P、Cu/N、P/Mn、Cu/P、P/Zn、K/Fe、K/Cu、Zn/N和K/Zn,这11种比例关系的变异程度均表现出低产园（变异系数范围为20.44％～40.82％）明显高于高产园（变异系数范围为8.69％～23.95％）;高产园和低产园的营养不平衡指数（NII）分别为39和88。对Fe、Mn和Zn元素需求强度较大的果园分别占供试果园的86％、82％和50％。相对于高产园,低产园元素间关系较不平衡;总体而言,豫西红富士苹果园需求强度较大的元素是Fe、Mn或Zn,其次是N或P。     

牡蛎疱疹病毒魁蚶株交叉引物等温扩增检测方法的建立及初步应用

为建立牡蛎疱疹病毒魁蚶株快速、灵敏、准确和操作简便的检测方法,实验根据已测序完成的OsHV-1-SB全基因组序列,选择其保守区域,建立了交叉引物等温扩增检测方法,并对反应温度、dNTPs、Mg2+浓度和反应时间进行了优化.结果显示,最佳温度为63℃,反应时间为60 min,dNTPs浓度为1.4 mmol/L,Mg2+浓度为6 mmol/L.该方法检测灵敏度为30拷贝的质粒DNA,并且特异性较强,与贝类常见病原急性病毒性坏死病毒、鲍鱼疱疹病毒、派琴虫、包纳米虫、马尔泰虫以及对虾白斑综合征病毒和副溶血弧菌均无交叉反应.使用实验建立的CPA检测方法对2012年分别采自韩国庆尚南道、山东长岛、辽宁大连共计22份OsHV-1-SB感染情况未知的魁蚶样品进行了检测.研究表明,实验所建立的OsHV-1-SB的CPA检测方法简单、快速、灵敏且特异性强.由于其检测结果可通过简单离心或者向反应管中加入核酸荧光染料GeneFinderTM进行肉眼观察,所以可以在沿海贝类养殖厂及条件简陋的实验室使用,具有较好的应用前景.     

尼罗罗非鱼Foxp1a/b的cDNA克隆及表达模式研究

为探讨低等脊椎动物Foxp1与免疫细胞活化及机体雌激素水平的相关性,本研究首次分离克隆了尼罗罗非鱼 (Oreochromis niloticus) Foxp1的开放阅读框序列,并通过real-time PCR对其mRNA表达水平进行检测。结果显示,尼罗罗非鱼具有两种不同基因编码的Foxp1分子,分别命名为OnFoxp1a与OnFoxp1b;OnFoxp1a为1710 bp,由15个外显子编码569个氨基酸,OnFoxp1b为2040 bp,由16个外显子编码679个氨基酸;OnFoxp1a/b均含有Foxp亚家族的特征性结构,即锌指结构、亮氨酸拉链样结构和叉状螺旋结构;与OnFoxp1a相比,OnFoxp1b与高等脊椎动物Foxp1具有更近的亲缘关系。Real-time PCR检测结果显示,OnFoxp1a/b几乎在所有组织中均有表达,OnFoxp1a在精巢中有高水平表达, OnFoxp1b在心脏中有高水平表达,同时OnFoxp1b在免疫相关组织如鳃、脾脏、肾脏、肠等均有中等水平表达;淋巴细胞多克隆刺激剂PHA、PMA、LPS刺激尼罗罗非鱼外周血单个核细胞（PBMC）,结果显示,50 μg/mL PHA和50 ng/mL PMA分别刺激6、12、24 h均显著增强OnFoxp1b的表达 (p＜0.05),20 μg/mL LPS刺激后,OnFoxp1b的表达出现先降低后升高的趋势 (p＜0.05);而OnFoxp1a的表达除50 μg/mL PHA 刺激24 h后有所升高,其余均无显著变化;雌激素处理6月龄雄性尼罗罗非鱼48 h,OnFoxp1a/b在肠、肾脏中的表达显著上调 (p＜0.05),而脾脏中无显著变化 (p>0.05)。综上所述,低等脊椎动物硬骨鱼类两种不同基因编码的Foxp1a/b均为哺乳动物Foxp1的同源分子,但其序列、结构特征、表达模式迥异,提示其功能发生歧化;同时两者的表达与淋巴细胞活化及机体雌激素水平密切相关。     

南昌市郊梅岭山区油茶病虫害调查

为明确本地油茶病虫害防治对象,于2012-2013年实地调查了南昌市郊梅岭山区油茶林(树龄15年)病虫害的种类、发生情况及危害特点,分析了害虫的组成结构。结果表明,在梅岭山区油茶上可见6种病害发生,主要种类包括茶藻斑病,其病原为寄生性红锈藻(Cephaleuros virescens Kunze);油茶煤污病,其病原为田中新煤炱菌[Neocapnodium tanakae(Shirai et Hara)Yamam];油茶白绢病,其病原为齐整小核菌(Sclerotium rolfsii Sacc.)和油茶炭疽病,其病原为胶孢炭疽菌[Colletotrichum gloeosporioides(Penz.)Sacc.],尤以前两种危害严重。采集到害虫60种,其中以八点广翅蜡蝉[Ricania speculum(Walker)]、红背安缘蝽[Anoplocnemis phasiana(Fabricius)]、茶白毒蛾[Arctornis alba(Bremer)]、山茶象(Curculio chinensis Chevrolat)和歧沟臀肖叶甲(Colaspoides diffinis Lefèvre)为优势种群。这些害虫隶属于4目33科,以鞘翅目(12科)为多,占害虫总科数的36.4%。     

稻谷整精米率检验操作之探讨

整精米率作为稻谷的一项定等指标 ,是以 2 0 0 0年度起执行新的稻谷国家标准ＧＢ135 5 - 1999为标志而广泛使用的。由于影响整精米率的因素比出糙率更多 ,因此 ,增加整精米率检验项目与以前单纯用出糙率定等相比 ,更能体现稻谷的生化特性和加工食用品质 ,促进粮食种植结构的调整。整精米率在粮食流通特别是购销环节中 ,由于流通量大 ,且时间集中 ,检验以仪器检验为主 ,因此 ,规范仪器检验的操作方法显得尤为重要。1　影响整精米率检验准确性的因素1 1　非操作因素1 1 1　品种及粒型 (即长宽比 )　长宽比较大的籼型稻谷耐压力和稳定性较差 ,…     

刺槐平茬后的经营管理技术研究

刺槐林木生长到中龄林以上阶段,出现老化衰退现象,经人工平茬后达到萌蘖复壮更新的目的,其经营管理技术极为重要。通过清除伐根、严格管护、林间挖沟、补植等系列经营管理技术,才能达到复壮更新的目的。     

华北落叶松人工林密度对林木生长因子影响的研究

[目的]为调控塞罕坝机械林场的林分密度提供参考。[方法]选择林龄39年、立地条件相似的5种林分密度(225、500、600、700和800株/hm2)下的华北落叶松人工林为研究对象,采用标准地调查法,研究人工林密度对林木各生长因子的影响。[结果]在225~800株/hm2的密度范围内,随着林分密度的增大,林木直径、冠幅、冠径比和单株材积逐渐降低,高径比和林分蓄积量逐渐增大,树高变化不明显。综合考虑林木生长因子的长势和林地生产力,当林木经营密度为500~600株/hm2时,各生长因子长势较好,林分蓄积量较大。[结论]塞罕坝机械林场华北落叶松人工林的合理经营密度为500~600株/hm2。